VKORC1基因多态性快速检测的引物、分子信标、试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了VKORC1基因多态性快速检测的试剂盒，包括PCR反应混合液；PCR反应混合液的原料及终浓度为，DNA聚合酶0.04‑0.1 U/μL；dNTPs 0.1‑0.5mM；5X PCR缓冲液0.5‑1.5X；MgCl2  1.5‑3.5mM；十二烷基硫酸钠0.0005‑0.015％（w/v）；聚乙二醇辛基苯基醚0.001‑0.03％（w/v）；上游引物0.2‑1.0 μM；下游引物0.2‑1.0 μM；突变型分子信标0.2‑1.0μM；野生型分子信标0.2‑1.0 μM；其用于检测口腔黏膜脱落细胞样品。本发明专利技术要解决的技术问题是提供一种操作简单、避免污染且检测快速的VKORC1基因多态性快速检测所涉及的引物、分子信标、试剂盒及其检测方法。

【技术实现步骤摘要】
VKORC1基因多态性快速检测的引物、分子信标、试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种VKORC1基因多态性快速检测的引物、分子信标、试剂盒及其检测方法。
技术介绍
单核苷酸多态性(SingleNucleotidePolymorphism，SNP)主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。SNP与许多疾病相关，决定了人类疾病的易感性和药物反应的差异性。因此，SNP在分析诊断、临床检验、法医学、病原检测、遗传疾病和新药研发等方面具有重要的应用价值。华法林是目前临床使用比较广泛的一种香豆素类口服抗凝药，具有抗凝和溶栓的双重作用。华法林可用于机械心脏瓣膜置换术术后、非瓣膜性心房颤动以及深静脉血栓等患者的抗凝治疗。华法林的抗凝治疗指数范围狭窄，如果剂量不足则达不到治疗效果，剂量稍微过量则会引起出血，重者危及病人生命。同时，华法林血浆药物浓度和疗效存在明显的个体差异，即使同一个体在不同时期所需的剂量也可能不同。华法林的剂量受多种因素影响，如遗传基因多态性、体重指数、年龄等及其他药物因素等。研究表明，不同患者使用抗凝药物华法林的剂量可以相差20倍，本文档来自技高网...

【技术保护点】
VKORC1基因多态性快速检测的试剂盒，其特征在于，包括PCR反应混合液；PCR反应混合液的原料及终浓度为：DNA聚合酶           0.04‑0.1 U/μL；dNTPs               0.1‑0.5mM；5X PCR缓冲液        0.5‑1.5X；MgCl2               1.5‑3.5mM；十二烷基硫酸钠      0.0005‑0.015％（w/v）；聚乙二醇辛基苯基醚  0.001‑0.03％（w/v）；上游引物            0.2‑1.0 μM；下游引物            0.2‑1.0 μM；突变型分子信标      0....

【技术特征摘要】
1.VKORC1基因多态性快速检测的试剂盒，其特征在于，包括PCR反应混合液；PCR反应混合液的原料及终浓度为：DNA聚合酶0.04-0.1U/μL；dNTPs0.1-0.5mM；5XPCR缓冲液0.5-1.5X；MgCl21.5-3.5mM；十二烷基硫酸钠0.0005-0.015％（w/v）；聚乙二醇辛基苯基醚0.001-0.03％（w/v）；上游引物0.2-1.0μM；下游引物0.2-1.0μM；突变型分子信标0.2-1.0μM；野生型分子信标0.2-1.0μM；其用于检测细胞样品。2.根据权利要求2所述的VKORC1基因多态性快速检测的试剂盒，其特征在于：所述的PCR反应混合液的原料终浓度为：DNA聚合酶0.09U/μL；dNTPs0.2mM；5XPCR缓冲液1.1X；MgCl22.5mM；十二烷基硫酸钠0.005％w/v；聚乙二醇辛基苯基醚0.01％w/v；上游引物0.3μM；下游引物0.3μM；突变型分子信标0.2μM；野生型分子信标0.5μM。3.根据权利要求3所述的VKORC1基因多态性快速检测的试剂盒，其特征在于：所述的细胞样品为口腔黏膜脱落细胞。4.根据权利要求4所述的VKORC1基因多态性快速检测的试剂盒，其特征在于：还包括提纯的人类基因组DNA基因序列。5.根据权利要求1~4任意一项所述的试剂盒中的VKORC1基因多态性快速检测的引物，其特征在于，上游引物5’-3’的基因序列为：CCAAAATGCTAGGATTATAGGC；下游引物5’-3’的基因序列为：GTCAAGGCAAGAGAAGACCTG。6.利用与权利要求5所述的试剂盒中引物检测的VKORC1基因多态性快速检测的分子信标...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洪娇，贺庭祯，向·霄，熊伟，
申请(专利权)人：重庆京因生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50