一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒。该试剂盒包括组分甲和/或组分乙；组分甲包括封闭序列甲和引物对甲；组分乙包括封闭序列乙和引物对乙；封闭序列甲和封闭序列乙均为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；引物对甲由上游引物F1和下游引物R1组成；引物对乙由上游引物F2和下游引物R2组成；封闭序列甲、上游引物F1、下游引物R1、封闭序列乙、上游引物F2和下游引物R2的核苷酸序列依次如序列表中的序列2、序列3、序列4、序列6、序列7和序列8所示。实验表明，采用本发明专利技术提供的试剂盒检测人类KRAS基因突变，准确率高，灵敏度也较高，从而大大的降低了检测的假阴性率，具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒
本专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒。
技术介绍
目前，靶向治疗已经成为肿瘤临床治疗的重要手段。表皮生长因子受体(EGFR)是靶向治疗的主要作用靶点。EGFR靶向药物包括EGFR单克隆抗体药西妥昔单抗、尼妥珠单抗、帕尼单抗，以及EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼和厄洛替尼。EGFR靶向药物能通过抑制肿瘤发生、发展中必须的表皮生长因子受体酪氨酸激酶阻断肿瘤细胞的信号传导，从而达到抑制肿瘤细胞的增生、侵袭、转移、血管生成并促进肿瘤细胞的凋亡。但是，临床试验表明EGFR靶向药物仅对部分肿瘤患者有显著的疗效。进一步的研究发现，肿瘤组织中KRAS基因发生突变(体细胞突变)的肿瘤患者对EGFR靶向药物完全耐药。因此，检测肿瘤患者KRAS基因是否突变成为决定能否使用EGFR靶向药物的必要前提条件。研究表明约30％的人类恶性肿瘤与RAS基因突变有关，RAS基因家族包括KRAS基因、NRAS基因和HRAS基因等，其中KRAS基因突变比例最大，起开关作用，正常时能调控细胞生长通路，异常时则阻止细胞自我毁灭并导致细胞的生长、增殖和血本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒，包括组分甲和/或组分乙；所述组分甲包括封闭序列甲和引物对甲；所述封闭序列甲为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；所述引物对甲由用于扩增特异DNA片段甲的两条引物组成；所述特异DNA片段甲中具有靶序列甲；所述靶序列甲为人类基因组中上游引物F1和下游引物R1组成的引物对甲的靶序列；所述上游引物F1为如下a1)或a2)：a1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；a2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述下游引物R1为如下a3)或a4)：a3)序列表的序列4所示的单链DNA分子；a4)将序列4经...

【技术特征摘要】
2016.11.23 CN PCT/CN2016/1068721.一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒，包括组分甲和/或组分乙；所述组分甲包括封闭序列甲和引物对甲；所述封闭序列甲为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；所述引物对甲由用于扩增特异DNA片段甲的两条引物组成；所述特异DNA片段甲中具有靶序列甲；所述靶序列甲为人类基因组中上游引物F1和下游引物R1组成的引物对甲的靶序列；所述上游引物F1为如下a1)或a2)：a1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；a2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述下游引物R1为如下a3)或a4)：a3)序列表的序列4所示的单链DNA分子；a4)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；所述封闭序列甲和所述靶序列甲满足如下关系(c1)或(c2)或(c3)或(c4)或(c5)或(c6)：(c1)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的一条链中的50个以上连续核苷酸相同；(c2)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的正义链中的50个以上连续核苷酸相同；(c3)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的反义链中的50个以上连续核苷酸相同；(c4)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的一条链相同；(c5)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的正义链相同；(c6)所述封闭序列甲和所述靶序列甲的反义链相同；所述组分乙包括封闭序列乙和引物对乙；所述封闭序列乙为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；所述引物对乙由用于扩增特异DNA片段乙的两条引物组成；所述特异DNA片段乙中具有靶序列乙；所述靶序列乙为人类基因组中上游引物F2和下游引物R2组成的引物对乙的靶序列；所述上游引物F2为如下a5)或a6)：a5)序列表的序列7所示的单链DNA分子；a6)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；所述下游引物R2为如下a7)或a8)：a7)序列表的序列8所示的单链DNA分子；a8)将序列8经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列8具有相同功能的DNA分子；所述封闭序列乙和所述靶序列乙满足如下关系(d1)或(d2)或(d3)或(d4)或(d5)或(d6)：(d1)所述封...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛猛，余倩，王宏伟，
申请(专利权)人：北京福安华生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11