人重组表皮生长因子MJ‑hEGF基因优化序列及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种人重组表皮生长因子MJ‑hEGF基因优化序列及其制备方法和应用，具体是通过将MJ短肽与hEGF连接制备重组人表皮生长因子，得到人重组表皮生长因子MJ‑hEGF基因优化序列，并且将此基因克隆到pET‑30a载体上，获得高表达的mj‑hEGF多肽表达工程菌，制备重组人表皮生长因子，发挥生物学活性。本发明专利技术提供的人重组表皮生长因子MJ‑hEGF基因优化序列在原核表达体系中表达量显著提高，对EGF的产业化以及今后在化妆品和生物医药领域的应用有重要意义。

Recombinant human epidermal growth factor MJ optimized hEGF gene sequence and its preparation method and Application

The present invention provides a recombinant human epidermal growth factor MJ optimized hEGF gene sequence and its preparation method and application, in particular by connecting with the hEGF MJ peptide preparation of recombinant human epidermal growth factor, recombinant human epidermal growth factor by MJ optimized hEGF gene sequence, the gene was cloned into pET 30A the carrier, MJ high expression of hEGF polypeptide engineering bacteria, preparation of recombinant human epidermal growth factor, its biological activity. The invention provides a recombinant human epidermal growth factor MJ hEGF gene sequence optimization significantly increased in prokaryotic expression system, has important significance for the industrialization of EGF and the application in cosmetics and medicine.

【技术实现步骤摘要】
人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列及其制备方法和应用。
技术介绍
EGF是继神经生长因子之后发现的第二个生长因子，1959年由Chone首先从小鼠领下腺中分离出来，因为能够促进小鼠门齿的萌出及眼睑睁开，最初被称为“齿睑因子”。随后发现这种多肽能够促进表皮生长，又将其命名为表皮生长因子(即小鼠表皮生长因子，mEGF)121。1975年Gergoyr从人尿中提取出一种具有抑制胃酸分泌的物质称为尿抑胃素(urogastrone)，后来证实尿抑胃素即人EGF(hEGF)。hEGF含有53个氨基酸残基，分子量为6200Da，沉降系数1.255，等电点pH4.7，含3个链内二硫键，是多肤生长因子中最小的一个。相对于其它多肤类物质，EGF对酸和热均较稳定，是已知的最稳定的蛋白多肽之一。hEGF系一单链多肤，圆二色谱研究表明，hEGF没有α螺旋，β片层结构占22％。在整个hEGF分子中，主要折叠为两个结构域：1-32氨基酸残基区域为N-端结构域，33-53氨基酸残基区域为C-端结构域。其本文档来自技高网...

【技术保护点】
人重组表皮生长因子MJ‑hEGF基因优化序列，其特征在于：所述序列如SEQIDNO.1所示。

【技术特征摘要】
1.人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列，其特征在于：所述序列如SEQIDNO.1所示。2.权利要求1所述的人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，在基因数据库中获取人表皮生长因子hEGF基因；步骤2，基因优化：对人表皮生长因子hEGF基因的编码区进行大肠杆菌密码子偏爱性的基因优化得到优化序列，如SEQIDNO.2所示，优化序列编码的氨基酸与人表皮生长因子hEGF基因编码形成的氨基酸序列一致；步骤3，基因重组：将优化序列与MJ活性肽核苷酸序列，如SEQIDNO.3所示，进行重组，得到人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列；步骤4，添加酶切位点：在人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列的5’端添加一种内切酶的酶切位点，在重组序列的3’端添加另一种内切酶酶切位点，得到合成序列；步骤5，基因合成：对得到的合成序列进行全基因合成。3.根据权利要求2所述的人重组表皮生长因子MJ-hEGF基因优化序列的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：张超，冷晓燕，徐燕，段云飞，常菁，虞强，
申请(专利权)人：江苏迈健生物科技发展股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32