一种以人Ad5复制缺陷型腺病毒为载体的寨卡病毒病疫苗制造技术

本发明专利技术公开了一种能够表达寨卡病毒Env蛋白，并且密码子得到优化的核苷酸序列，所述序列可以与密码子得到优化的寨卡病毒prM蛋白以及prM蛋白内源信号肽融合，插入穿梭载体pDC316后，与辅助载体pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK293细胞，包装出以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒为载体的重组腺病毒，所述重组腺病毒载体能够在感染细胞中高效表达寨卡病毒的包膜蛋白。插入所述核苷酸的重组腺病毒作为疫苗单次免疫动物后即可快速诱发强烈的体液免疫和细胞免疫反应。所述重组腺病毒载体寨卡疫苗可以大规模快速制备，能够用于寨卡疫情爆发时大规模人群的应急接种及平时人群的预防性免疫。

A Ad5 vaccine against human adenovirus replication defective adenovirus

The invention discloses a expression of Zika virus Env protein and nucleotide sequence of codons are optimized, the sequence and codon optimized Zika virus prM protein prM protein and endogenous signal peptide fusion, inserted into the shuttle vector pDC316, and the auxiliary carrier pBHGlox_E1,3Cre were co transfected into HEK293 cells, packaging with E1, E3 combined with the lack of replication defective human adenovirus type 5 recombinant adenovirus vector, the recombinant adenovirus vector can efficiently express Zika virus envelope protein in infected cells. The recombinant adenovirus inserted into the nucleotide acts as a vaccine to induce a strong humoral and cellular immune response after a single immunization of the animal. The recombinant adenovirus vector vaccine can be prepared on a large scale and quickly, and can be used for the emergency vaccination of large populations and the prophylactic immunization of the crowd at the time of the outbreak.

【技术实现步骤摘要】
一种以人Ad5复制缺陷型腺病毒为载体的寨卡病毒病疫苗
本专利技术公开了一种以人Ad5复制缺陷型腺病毒为载体的寨卡病毒病疫苗，本专利技术属于生物工程

技术介绍
寨卡病毒(ZikaVirus，ZIKV)是一种单股正链RNA病毒，与黄热病毒(YellowFever)、登革热病毒(DengueFever)、日本脑炎病毒(Japaneseencephalitisvirus，JEV)、森林脑炎病毒(Tick-borneencephalitisvirus，TBEV)和西尼罗河病毒(WestNileVirus，WNV)等同属于黄病毒(Flavivirus)科黄病毒属。ZIKV于1947年首次发现于乌干达寨卡森林的猴子身上，主要通过伊蚊传播，少数情况下也可以通过母婴传播、性传播和输血传播。ZIKV最初仅在少数地区有小规模的爆发和流行:1952年，在乌干达、尼日利亚和印度进行的血清流行病学调查显示人类有感染寨卡病毒；1951-1983年，寨卡病毒在非洲和亚洲多个国家传播；2007年，大洋洲的密克罗尼西亚爆发了寨卡疫情，为首次非洲和亚洲之外的爆发；2013-2014年，法属波利尼西亚、复活节岛、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能够表达寨卡病毒Env蛋白的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列含有如SEQ ID NO:1所示的Env蛋白编码序列。

【技术特征摘要】
1.一种能够表达寨卡病毒Env蛋白的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列含有如SEQIDNO:1所示的Env蛋白编码序列。2.一种能够表达寨卡病毒前膜蛋白的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列含有如SEQIDNO:2所示的前膜蛋白编码序列。3.根据权利要求1所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列同时含有如SEQIDNO:2所示的编码前膜蛋白的核苷酸序列。4.根据权利要求3所述的核苷酸序列，其特征在于，所述编码前膜蛋白的核苷酸序列位于所述核苷酸序列的5’端。5.根据权利要求4所述的核苷酸序列，其特征在于，在所述编码前膜蛋白的5’端还含有如SEQIDNO:3所示的前膜蛋白内源信号肽密码子优化的核苷酸序列。6.根据权利要求5所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。7.一种含有如权利要求1、3-6任一所述核苷酸序列的穿梭质粒载体，其特征在于，所述载体为pDC316。8.一种能够表达如权利要求1、3-6任一所述核苷酸序列的人复制缺...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈薇，郭强，侯利华，吴诗坡，宋小红，付玲，王步森，张金龙，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11