一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒，包括盒体、位于盒体内部的基于红光激光的低能量激光康复治疗仪和若干试剂瓶，若干所述试剂瓶内分别盛装有组织分解液、细胞培养液和细胞消化液。本发明专利技术提供的低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒可以从组织中分离间充质干细胞，并进行培养扩增，再通过低能量激光的诱导使间充质干细胞血管化，分离纯度高，培养增殖效果佳，诱导分化效果好、效率高，并有效防止了诱导过程中血管化过度的问题，可以得到丰富的血管内皮细胞用于促进创伤后皮肤早期血管化，从而有利于促进创伤皮肤的修复。

Kit for low energy laser induced mesenchymal stem cell vascularization

The invention provides a kit for low energy laser induced mesenchymal stem cells angiogenesis, including low energy laser treatment instrument red laser and a plurality of reagent bottles based on the box body, located on the inside of the box body, a plurality of reagent bottles were filled with tissue decomposition liquid and cell cultures and cell digestion. The present invention provides low energy laser induced mesenchymal stem cell kit angiogenesis can separate mesenchymal stem cells from the tissue, and then cultured and induced by low energy laser to mesenchymal stem cells, vascular proliferation, separation of high purity, good effect, good effect, differentiation high efficiency, and can effectively prevent the problem of excessive blood vessels during the induction of vascular endothelial cells, can be used to promote wound skin rich vascularization, which is beneficial to promote the repair of skin wounds.

【技术实现步骤摘要】
一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒
本专利技术属于细胞
，尤其涉及一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒。
技术介绍
皮肤作为人体最大的器官，具有感觉、调节体温、分泌与排泄、防止水分蒸发等多种作用，作为人体与外界环境的屏障以维持内环境的稳定，同时也是免疫系统的重要组成部分。外伤导致的皮肤大面积缺损常常导致非常严重的肢体残疾，甚至死亡。血管的生成是皮肤缺损治疗过程中重要的一步，对皮肤创面相关功能的恢复至为关键。多种细胞可经体外诱导分化产生血管内皮细胞，由间充质干细胞定向诱导分化而成的血管内皮细胞已显示出广泛的治疗前景，现有的诱导分化方法一般是采用细胞诱导剂进行诱导分化或将间充质干细胞与bEND.3细胞等共同培养，如CN201610160912.4提供了一种毛囊干细胞诱导分化为血管内皮细胞的培养方法，通过分离、培养、纯化、诱导分化等步骤将毛囊干细胞诱导分化为血管内皮细胞。但是该方法诱导分化的效率较低，效果也不够理想，并且不能避免诱导分化过程中出现血管化过度导致产生血管瘤等问题。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒，包括盒体、位于盒体内部的基于红光激光的低能量激光康复治疗仪和若干试剂瓶，若干所述试剂瓶内分别盛装有组织分解液、细胞培养液和细胞消化液，所述细胞培养液主要是将α-MEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、乙基麦芽酚用注射用水溶解而成，每L所述注射用水溶解所述α-MEM培养基30-50g、所述胎牛血清3-8g、所述青霉素1-3×105U、所述链霉素0.1-0.3g、所述乙基麦芽酚1-3g。本专利技术提供的试剂盒可以对间充质干细胞进行分离、培养和诱导分化，使间充质干细胞血管化，培养过程增值效果明显，诱导分化过程安全高效。进一步的，所述细胞培养液还含有羟乙基环糊精、木糖醇和天门冬氨酸，每L所述注射用水溶解所述羟乙基环糊精3-8g、所述木糖醇1-3g、所述天门冬氨酸0.1-0.5g。在细胞培养液中加入羟乙基环糊精、木糖醇和天门冬氨酸可以进一步提高细胞培养液培养脂肪间充质干细胞的增殖速度，减少或改变其中任何一个成分，脂肪间充质干细胞的增殖速度变慢。进一步的，所述细胞培养液还含有麦芽糖醇、丙酸钙、甘氨酸钠，每L所述注射用水溶解所述麦芽糖醇1-3g、所述丙酸钙0.2-0.8g、所述甘氨酸钠0.2-0.5g。在细胞培养液中加入麦芽糖醇、丙酸钙和甘氨酸钠可以提高细胞培养液防止细菌感染的能力，有效抑制细胞培养液中细菌的滋生和繁殖，保障细胞培养液的使用安全。进一步的，所述细胞培养液还含有磷酸淀粉钠、二硫代甘醇酸、海藻酸钠，每L所述注射用水溶解所述磷酸淀粉钠0.5-1.5g、所述二硫代甘醇酸0.5-1.5g、所述海藻酸钠0.05-0.2g。在细胞培养液中增加磷酸淀粉钠、二硫代甘醇酸和海藻酸钠可以有效提高细胞培养液的稳定性，避免细胞培养液沉淀、分层和变色等问题，减少其中一个成分，或变化其中一个成分，细胞培养液的稳定性会减弱。进一步的，所述组织分解液为含1％胶原酶I型的PBS缓冲。进一步的，所述细胞消化液为含0.25％胰酶的PBS缓冲液。进一步的，所述基于红光激光的低能量激光康复治疗仪包括激光组件、壳体以及设在所述壳体内的控制器和电源，所述激光组件包括外壳、设于所述外壳内的激光器和激光头，所述外壳的一端设有供所述激光头伸出的通孔，所述外壳内还设有电机、与所述电机的输出轴相连的齿轮以及中空的伸缩杆，所述外壳外表面设有控制所述电机运动的开关，所述激光头通过设置在所述伸缩杆内的激光线与所述激光器相连，所述伸缩杆的一端与所述激光头连接，所述伸缩杆的底部设有与所述齿轮啮合的齿条。进一步的，所述激光器产生的激光波长为600-800nm。优选的，所述激光组件位于所述壳体内，所述壳体上设有供激光头伸出的通孔。将激光组件设于壳体内，可以进一步简化结构，方便使用。优选的，所述激光器为半导体激光器。半导体激光器又称激光二极管，是用半导体材料作为工作物质的激光器，具有体积小、重量轻、运转可靠、耗电少、效率高等优点。进一步的，所述壳体表面设置有与所述控制器连接的控制面板，所述控制面板上还设置有开关键、时间调节设备、电流调节旋钮、显示屏和报警指示灯，所述开关键用于控制所述激光器的开启和关闭，所述时间调节设备用于调节激光器工作时间的长短，所述电流调节旋钮用于调节电流的大小，所述显示屏用于显示激光器的工作电流，所述报警指示灯用于在所述治疗仪工作状态不正常时发出警报信号。进一步的，所述时间调节设备为时间调节旋钮或时长倍数调节旋钮，所述时间调节旋钮用于调节所述激光器工作的具体时长，所述时长倍数调节旋钮用于在预先设置好所述激光器照射的单位时长的基础上，通过调节所述激光器照射的时长倍数来调节所述激光器的一次照射的总时长。进一步的，所述外壳上套设有两端开口的套筒，所述外壳外表面环设有若干卡槽，所述套筒远离所述激光头一端的内表面至少设有一个凹槽，所述凹槽内设有一端与所述凹槽底部连接的弹簧以及与所述弹簧另一端连接的卡球，所述套筒邻近所述激光头的一端设有至少一对对称排列的吸附装置，所述吸附装置由弹性吸附盘和设置在所述弹性吸附盘顶端并与所述弹性吸附盘相通的弹性吸附球组成。进一步的，所述激光头上设置有遮光罩，所述遮光罩包括环绕所述激光头的筒状罩体和通过螺纹结构与所述筒状罩体连接的敞口罩体，所述敞口罩体由多个环形褶道逐一连接而成。进一步的，所述激光头与所述伸缩杆通过可沿任意角度旋转的连接装置连接，所述治疗仪还包括图像扫描装置以及分别与所述图像扫描装置和所述控制器连接的处理器。进一步的，所述激光器表面设置有防静电层，防止静电对所述激光器造成损伤。进一步的，所述激光组件上设置有固定装置，所述固定装置包括至少两根绑带，所述绑带一端与所述外壳连接，另一端为自由端。在激光组件上设置固定装置可以在使用过程中将激光组件固定在某个物体上或是固定在使用者身体上，避免使用者必须一直手持激光器，方便使用。进一步的，所述固定装置还包括至少三根一端与所述外壳连接的支腿，所述支腿与所述外壳的连接处设置有角度调整装置。增加支腿可以更加方便地对激光器进行固定，在支腿与激光器的连接处设置角度调整装置可以根据使用需要调整支腿的支撑角度，方便使用。进一步的，所述支腿远离所述外壳的一端设置有硅胶头。进一步的，所述支腿为可伸缩结构，可以根据使用需要伸长或缩短支腿。本专利技术还提供一种诱导间充质干细胞血管化的方法，包括：先将采取的组织放入所述组织分解液中分离获取间充质干细胞；然后将分离得到的间充质干细胞加入所述细胞培养液中进行培养扩增；再将培养所得到的第三代间充质干细胞加入细胞培养液中，采用低能量激光照射间充质干细胞，放入温度为37℃、CO2体积分数为5％、饱和湿度的的培养箱中培养2-6天即可完成间充质干细胞的血管化；所述采用低能量激光照射间充质干细胞包括：采用波长为600-800nm、功率密度为40-80mw/cm2的低能量激光照射间充质干细胞1-3次，每次50-100s。本专利技术提供的诱导间充质干细胞血管化的方法诱导充质干细胞血管化的效果好、效率高，诱导分化过程安全可靠。优选的，所述采用低能量激光照射间充质干细胞包括：采用波长为600-660nm本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括盒体、位于盒体内部的基于红光激光的低能量激光康复治疗仪和若干试剂瓶，若干所述试剂瓶内分别盛装有组织分解液、细胞培养液和细胞消化液，所述细胞培养液主要是将α‑MEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、乙基麦芽酚用注射用水溶解而成，每L所述注射用水溶解所述α‑MEM培养基30‑50g、所述胎牛血清3‑8g、所述青霉素1‑3×10

【技术特征摘要】
1.一种低能量激光诱导间充质干细胞血管化的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括盒体、位于盒体内部的基于红光激光的低能量激光康复治疗仪和若干试剂瓶，若干所述试剂瓶内分别盛装有组织分解液、细胞培养液和细胞消化液，所述细胞培养液主要是将α-MEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、乙基麦芽酚用注射用水溶解而成，每L所述注射用水溶解所述α-MEM培养基30-50g、所述胎牛血清3-8g、所述青霉素1-3×105U、所述链霉素0.1-0.3g、所述乙基麦芽酚1-3g。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述细胞培养液还含有羟乙基环糊精、木糖醇和天门冬氨酸，每L所述注射用水溶解所述羟乙基环糊精3-8g、所述木糖醇1-3g、所述天门冬氨酸0.1-0.5g。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述细胞培养液还含有麦芽糖醇、丙酸钙、甘氨酸钠，每L所述注射用水溶解所述麦芽糖醇1-3g、所述丙酸钙0.2-0.8g、所述甘氨酸钠0.2-0.5g。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述细胞培养液还含有磷酸淀粉钠、二硫代甘醇酸、海藻酸钠，每L所述注射用水溶解所述磷酸淀粉钠0.5-1.5g、所述二硫代甘醇酸0.5-1.5g、所述海藻酸钠0.05-0.2g。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述基于红光激光的低能量激光康复治疗仪包括激光组件、壳体(1)以及设在所述壳体(1)内的控制器(2)和电源(3)，所述激光组件包括外壳(4)、设于所述外壳(4)内的激光器(5)和激光头(6)，所述外壳(4)的一端设有供所述激光头(6)伸出的通孔，所述外壳(4)内还设有电机(7)、与所述电机(7)的输出轴相连的齿轮(8)以及中空的伸缩杆(9)，所述外壳(4)外表面设有控制所述电机(7)运动的开关(10)，所述激光头(6)通过设置在所述伸缩杆(9)内的激光线与所述激光器(5)相连，所述伸缩杆(9)的一端与所述激光头(6)连接，所述伸缩杆(9)的底...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤苏阳，
申请(专利权)人：徐子雁，
类型：发明
国别省市：北京,11