一株分泌抗平足蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术提供一株分泌抗平足蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，还提供了一种分泌的可特异性识别人平足蛋白（Podoplanin，PDPN）的单克隆抗体，目的是提供一种将该抗体用于多种肿瘤免疫学诊断的应用方法。PDPN蛋白是一个38 kD O‑链接的横跨膜唾液酸糖蛋白，通常用于标记组织中的淋巴管内皮，制备该抗体的抗原为一段优选的、由大肠杆菌表达、具有免疫原性活性的重组蛋白，最终获得的抗体属于IgG2b亚型，对多种肿瘤组织的免疫组织化学检测发现，该抗体可以很好的鉴别肿瘤的发生，可用于这些肿瘤的免疫学诊断。

A monoclonal antibody of anti Podoplanin hybridoma cell line and its application

The present invention provides a monoclonal antibody of anti Podoplanin hybridoma cell line and its application, also provides a secretion could specifically recognize human Podoplanin (Podoplanin, PDPN) monoclonal antibody, the purpose is to provide a variety of methods will be used for the application of antibodies to the diagnosis of the tumor immunity. PDPN protein is a 38 kD O links across the membrane sialic acid glycoprotein, is often used to identify tissue in lymphatic endothelium, preparation of the antibody antigen as a preferred, by E. coli expression and immunogenic activity of the recombinant protein, the antibody obtained belong to IgG2b subtype found, immunohistochemical detection of tumor tissue, the antibody can identify good tumor occurrence, can be used for immunological diagnosis of these tumors.

【技术实现步骤摘要】
一株分泌抗平足蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
本专利技术涉及一种可以识别人平足蛋白的单克隆抗体及可分泌该抗体的杂交瘤细胞系。具体而言，本专利技术提供了一种抗肿瘤细胞表面抗原PDPN的单克隆抗体，该抗体可以用于通过人工或自动化方式，以免疫组织化学染色（IHC）、酶联免疫吸附（ELISA）或免疫印迹（WesternBlot）方式检测细胞中PDPN的表达水平，从而对这些肿瘤进行诊断，属于生物检测领域。
技术介绍
PDPN蛋白又称肾小球上皮细胞整合膜蛋白，1996年由Wetterwald首次发现并报道，而后Breiteneder等发现其还存在于小鼠的肾小球足状突细胞膜表面蛋白，与维持肾小球通透性及足状突细胞突起的形成有关。在Breiteneder等的进一步研究中发现，PDPN特异性表达于淋巴管，而不表达于血管，可作为淋巴管内皮标记物。PDPN蛋白是一种相对分子量为38kDa的Ⅰ型跨膜唾液酸糖蛋白，由162个氨基酸组成，可分为4个部分：第一部分为第1位至第22位氨基酸组成的信号肽片段，第二部分为第23位至第131位氨基酸编码的胞外片段，第三部分为第132位至第152位氨基酸编码的跨膜片段本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株分泌抗平足蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系5B3D4，该细胞系已于2017年1月9日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC NO.13589。

【技术特征摘要】
1.一株分泌抗平足蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系5B3D4，该细胞系已于2017年1月9日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNO.13589。2.一种单克隆抗体，其特征在于：所述抗体由小鼠杂交瘤细胞系5B3D4分泌。3.权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于：其免疫小鼠用的抗原是将具有序列表中SEQIDNo.1的核苷酸序列编码经由大肠杆菌重组表达而获得的重组PDPN抗原蛋白。4.权利要求3所述的单克隆抗体，其特征在于：该PDPN抗原蛋白由具有抗原性的P...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪世华，杨清海，谢成杰，陈惠玲，王荣智，凌素美，曾林茂，肖诗伟，
申请(专利权)人：福州迈新生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35