Fmoc-Arg（Pbf）-OH的合成方法技术

本发明专利技术涉及Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH的合成方法，属于精氨酸的保护技术领域。本发明专利技术的Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH的合成方法首先将精氨酸的羧基酯化，再在氨基上引入Boc基将氨基保护起来，在胍基上引入Pbf基团，脱去Boc基团，皂化，最后在氨基上引入Fmoc基团。采用本发明专利技术的方法合成Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH，只需要使用1.1倍的Pbf‑Cl就可以把Arg全部反应，相比现有技术Pbf‑Cl的用量为精氨酸的2倍时仍然有精氨酸未反应，本发明专利技术的Pbf‑Cl用量大大降低，并且无Arg残余，Pbf‑Cl价格昂贵，因此本发明专利技术的成本也大大降低，有利于工业化推广应用。

Fmoc Arg (Pbf) synthesis method OH

The present invention relates to Fmoc Arg (Pbf) OH synthesis method, which belongs to the technical field of arginine protection. The invention of the Fmoc Arg (Pbf) OH synthesis method will first fine carboxyl esterification of amino acid, and then introduces the Boc based on amino protected amino groups were introduced in Pbf, guanidine, from group Boc, saponification, the introduction of Fmoc groups at the amino end. The method of synthesis of Fmoc Arg (Pbf) OH, only need to use 1.1 times the Pbf Cl will take Arg reaction, compared with the existing technology of Pbf Cl amount of arginine 2 times while arginine no reaction, the invention greatly reduces the amount of Cl Pbf Arg, and no residual, Pbf Cl is expensive, so the cost is greatly reduced, is conducive to the popularization and application of industrialization.

【技术实现步骤摘要】
Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法
本专利技术涉及Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，属于精氨酸的保护

技术介绍
精氨酸是一种可以在体内自然产生的必需氨基酸。在生命科学研究中，为了避免副产物的产生，必须对精氨酸的氨基和胍基进行保护。Fmoc-Arg(Pbf)-OH就是利用Fmoc(9-芴甲氧羰基)保护氨基，用Pbf(2，2，4，6，7-五甲基苯并呋喃-5-磺酰基)保护胍基。洪镛裕等.Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成.[J].化学试剂，2006，28(1)，57～58。公开了一种Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，该方法采用Cbz(苄氧羰基)对氨基进行中间保护，在胍基上引入Pbf后脱去Cbz，再在氨基上引入Fmoc，采用上述方法的Cbz保护在水相反应，Pbf-Cl耗量很高，容易分解，而且反应不彻底，Pbf很贵因而效益不明显，未工业化应用。申请号为200810034390.9的中国专利申请公开了一种精氨酸双保护制备工艺，其先用Boc(叔丁氧羰基)保护氨基后，再在胍基上引入Pbf，再脱去氨基上的Boc，引入Fmoc对精氨酸进行保护。上述方法避免了氢解，产品纯度≥99.0％，总收率最高可达到63.51％。但是采用上述方法Pbf-Cl的用量大，还会有大量精氨酸残余，Pbf-Cl的用量为精氨酸的2倍时，仍然有精氨酸未反应。此外，现有技术中，引入Pbf时，其反应温度必须控制在较低的温度-15℃～+15℃，如果升高反应温度高，反应效果会非常差，Pbf耗量会增加，同时副产物会非常严重，产生大量的瓜氨酸衍生物和鸟氨酸衍生物，纯化难，不具有经济效益。现有技术优选的是在5-10℃引入Pbf，但Pbf耗量仍然很大，效益不好，因此，从2006年开始，申请人就停止使用原有工艺，开始致力于研究开发效益好的新工艺。
技术实现思路
本专利技术提供了一种Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，Pbf-Cl的用量减少，成本低。为解决上述技术问题，本专利技术的Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法包括如下步骤：(1)酯化(2)引入Boc基团(3)引入Pbf(4)脱Boc(5)皂化(6)Fmoc-Arg(Pbf)-OH合成其中，所述R为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、苄基、二苯甲基或三苯甲基中的至少一种。优选的，所述R为甲基或乙基。优选的，所述精氨酸优选精氨酸盐酸盐或者精氨酸碱。优选的，步骤(1)酯化的工艺包括如下步骤：a1.向无水乙醇或无水甲醇中滴加二氯亚砜，反应温度-10～0℃；b1.加入Arg.HCl，升温至0℃～50℃反应24～72小时；c1.反应结束后，减压浓缩得到油状物的Arg.Oet.2HCl或者Arg.OMe.2HCl中间体。优选的，所述无水乙醇或无水甲醇与二氯亚砜的摩尔比为：5～30:1。优选的，步骤(3)所述的引入Pbf的工艺包括如下步骤：a3.取摩尔比Boc-ArgOR.HCl：Pbf-Cl：溶剂：碳酸钾：水＝1:1～2:15～90：3～8:1～20的物料，混匀；b3.反应完成后，抽滤，除去固体不溶物，减压蒸馏除去溶剂，得到Boc-Arg(Pbf)OR；其中，所述溶剂为四氢呋喃，二氧六环，丙酮中的至少一种。优选的，a3步骤温度维持40～45℃。优选的，a3步骤所述Boc-ArgOR.HCl：Pbf-Cl的摩尔比为1:1.1。优选的，步骤(5)所述皂化的工艺包括如下步骤：将步骤(4)得到的H-Arg(Pbf)OR加乙醇溶解，调节pH10～12进行皂化，皂化时间3～4小时，纯化即得H-Arg(Pbf)OH。优选的，步骤5采用氢氧化钠溶液控制pH10～12。有益效果：采用本专利技术的方法合成Fmoc-Arg(Pbf)-OH，只需要使用arg摩尔量1.1倍的Pbf-Cl就可以把arg全部反应，相比现有技术Pbf-Cl的用量为精氨酸的2倍时仍然有精氨酸未反应，本专利技术的Pbf-Cl用量大大降低，并且无arg残余，Pbf-Cl价格昂贵，因此本专利技术的成本也大大降低，此外，Pbf的引入温度高，效益好，有利于工业化推广应用。具体实施方式本专利技术的Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法包括如下步骤：(1)酯化(2)引入Boc基团(3)引入Pbf(4)脱Boc(5)皂化(6)Fmoc-Arg(Pbf)-OH合成其中，所述R为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、苄基、二苯甲基或三苯甲基中的至少一种。优选的，所述R为甲基或乙基.优选的，所述精氨酸优选精氨酸盐酸盐或者精氨酸碱。优选的，步骤(1)所述酯化的工艺包括如下步骤：a1.向无水乙醇或者无水甲醇中滴加二氯亚砜，反应温度-10～0℃；b1.加入Arg.HCl，自然升温，0℃～50℃反应24～72小时；c1.反应结束后，减压浓缩得到油状物的Arg.Oet.2HCl或者Arg.OMe.2HCl中间体。优选的，所述无水乙醇或者无水甲醇与二氯亚砜的摩尔比为:5～30:1。优选的，步骤(3)所述的引入Pbf的工艺包括如下步骤：a3.取摩尔比Boc-ArgOR.HCl：Pbf-Cl：溶剂：碳酸钾：水＝1:1～2:15～90：3～8:1～20的物料，混匀；b3.反应完成后，抽滤，除去固体不溶物，减压蒸馏除去溶剂，得到Boc-Arg(Pbf)OR；其中，所述溶剂为四氢呋喃，二氧六环，丙酮中的至少一种。优选的，a3步骤温度维持40～45℃。优选的，a3步骤所述Boc-ArgOR.HCl：Pbf-Cl的摩尔比为1:1.1。优选的，步骤(5)所述皂化的工艺包括如下步骤：将步骤(4)得到的H-Arg(Pbf)OR加乙醇溶解，调节pH10～12进行皂化，皂化时间3～4小时，纯化即得H-Arg(Pbf)OH。优选的，步骤5采用氢氧化钠溶液控制pH10～12。下面结合实施例对本专利技术的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。实施例1(1)酯化a1.将100L无水乙醇加入预先干燥的300L反应釜内，通冰盐水降温至-5～-10℃，滴加二氯亚砜13L。b1.加入D型的Arg.HCl21.5kg，关闭冰盐水，自然升温至室温反应24小时。c1.升温至35℃反应，TLC点板跟踪反应情况，反应大约48h结束。d1.浓缩：反应结束后，减压浓缩得到油状物的Arg·Oet·2HCl中间体。(2)引入Boc基团a2.在300L反应釜内加入150L水，再加入碳酸氢钠25.2kg，搅拌；逐渐加入Arg·Oet·2HCl油状物；加入四氢呋喃30L；分批加入(Boc)2O，26.2kg搅拌，室温反应；TLC法点板跟踪反应情况，当Arg·Oet·2HCl反应完即开始处理。b2.酸化：反应完成后调节pH3-4，用石油醚/乙酸乙酯(50L:25L)，萃取；c2.加盐饱和，回调PH6-7，用乙酸乙酯提产品，用饱和食盐水洗涤有机相。d2.干燥：向有机相(带产品的乙酸乙酯溶液中)中加入60kg的无水硫酸钠，干燥8小时。e2.提纯浓缩：抽滤掉硫酸钠固体，减压蒸馏乙酸乙酯相。浓缩后得到的Boc-ArgOet.HCl油状物。(3)引入Pbfa3.在300L反应釜中加入步骤2得到的Boc-ArgOet.HCl，Pbf-Cl31.9kg，丙酮200L，碳酸钾41.7kg，搅拌，加少量水，维持本文档来自技高网...

【技术保护点】
Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)酯化

【技术特征摘要】
1.Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)酯化(2)引入Boc基团(3)引入Pbf(4)脱Boc(5)皂化(6)Fmoc-Arg(Pbf)-OH合成其中，所述R为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、苄基、二苯甲基或三苯甲基中的至少一种。2.根据权利要求1所述的Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，其特征在于，所述R为甲基或乙基。3.根据权利要求1或2所述的Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，其特征在于，所述精氨酸为精氨酸盐酸盐或者精氨酸碱。4.根据权利要求2或3所述的Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，其特征在于，步骤(1)酯化的工艺包括如下步骤：a1.向无水乙醇或无水甲醇中滴加二氯亚砜，反应温度-10～0℃；b1.加入Arg.HCl，升温至0℃～50℃反应24～72小时；c1.反应结束后，减压浓缩，得到油状物的Arg.Oet.2HCl或者Arg.OMe.2HCl中间体。5.根据权利要求4所述的Fmoc-Arg(Pbf)-OH的合成方法，其特征在于，所述无水乙醇或无水甲醇与二氯亚砜的摩尔比为：5～30:1。6.根据权利要求1—5任一项所述的Fmoc-...

【专利技术属性】
技术研发人员：付若彬，郑征，彭章勤，陈昌华，仲良，
申请(专利权)人：成都郑源生化科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51