本发明专利技术属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种猪瘟活疫苗稀释液，其每1000ml pH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：5‑10g、穿心莲提取物：1‑5g、人参皂苷Rh2：0.1‑2g和姜黄素：2‑6g。本发明专利技术猪瘟活疫苗用稀释液不仅生产方便，成本低，使用方便安全，还可以提高淋巴细胞转化率，降低不同批次疫苗间的差异，提高疫苗免疫的整体效果。
Diluent for live swine fever vaccine
The invention belongs to the field of veterinary biological products, in particular to a swine fever vaccine diluent, containing phosphate buffer per 1000ml pH=7: polysaccharides: 5 10g, 1 5g: Andrographis paniculata extract and ginsenoside Rh2:0.1 2G and curcumin: 2 6g. The invention of swine fever vaccine by dilution not only convenient production, low cost, safe and convenient to use, but also can improve the lymphocyte transformation rate, reduce the differences between different batches of vaccine, to improve the overall effect of the vaccine immune.
【技术实现步骤摘要】
一种猪瘟活疫苗用稀释液
本专利技术属于兽用生物制品
，具体涉及一种猪瘟活疫苗用稀释液。
技术介绍
猪瘟是由猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus，CSFV)引起的一种高度接触性传染病，以出血和发热为主要特征，可呈急性或慢性，是一种对猪危害性极大的传染病。不同年龄、性别和品种的猪均能感染该病，死亡率高达80-90％。猪瘟被世界动物卫生组织划分为A类疾病，我国将其划分为一类疾病，目前，疫苗接种是世界许多国家和地区控制猪瘟的重要手段。猪瘟活疫苗在使用时需要用疫苗稀释剂进行稀释，目前通常选用注射用水或生理盐水，但这样稀释出的疫苗，免疫效价整齐度不高，不同批次疫苗间的差异较大，且接种发病猪后存在应激反应和过敏反应，大大降低了猪瘟活疫苗的免疫效果。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种猪瘟活疫苗用稀释液，该稀释液可有效减少不同批次疫苗间的差异，提高疫苗抗体效价整齐度，减少接种发病猪的应激反应和过敏反应。为解决上述技术问题，本专利技术每1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：5-10g、穿心莲提取物：1-5g、人参皂苷Rh2：0.1-2g和姜黄素：2-6g。进一步的，本专利技术中每1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：5-8g、穿心莲提取物：2-4g、人参皂苷Rh2：0.5-1.5g和姜黄素：3-5g。进一步的，本专利技术中每1000mlPH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：6g、穿心莲提取物：3g、人参皂苷Rh2：1g和姜黄素：4g。其中，本专利技术所述姬松茸多糖的制备包括以下步骤：（1）粉碎姬松茸，得姬松茸粉末，按料液比：1:70-90g/ml向姬松茸粉末中加入蒸馏水并调节pH至7.0；（2）微波提取：设定微波功率为500-700W，提取8-12min，收集提取液；（3）重复步骤（2），收集提取液；（4）将步骤（2）和（3）中所得滤液混合，利用旋转蒸发仪浓缩至1/4体积，加入80%的乙醇，于4℃静置12h，离心收集沉淀；（5）步骤（4）中所得沉淀依次经无水乙醇和丙酮洗涤后，真空干燥，即可得姬松茸多糖。其中，本专利技术所述穿心莲提取物的制备包括以下步骤：向称取穿心莲粗粉中加入8-12体积的70%-80%乙醇，以600-800W的功率超声提取50-70min，过滤，减压除去溶剂后，置于60℃下减压干燥至恒重，即可得穿心莲粗提取物。其中，本专利技术所述pH=7的磷酸盐缓冲液的制备方法如下：a．称取下列原料组分：氯化钠6-10g、氯化钾0.05-0.5g、磷酸氢二钠1-1.2g、磷酸二氢钾0.05-0.5g、氯化钙0.05-0.2g和六水氯化镁0.05-0.2g，混合均匀备用；b．向步骤a中所得原料组分的混合物中加入1000ml的双蒸水，充分溶解后，在116℃条件下高压灭菌30min，即得pH=7的磷酸盐缓冲液。进一步的，所述步骤（2）中的微波提取过程为间歇式微波提取，即提取2min后暂停1min，同时补加损失的水分使提取液体积保持相对恒定。本专利技术中人参皂苷Rh2和姜黄素由百灵威科技有限公司生产销售。本专利技术的有益效果：中药免疫增强剂主要为补益类药物，可以通过激活一种或多种免疫活性细胞，增强机体的免疫功能，使低下的免疫功能上调至正常水平。还可以作为辅助药物与一些疫苗合用，增强免疫应答，提高免疫效应。本专利技术所提供的稀释液中添加有姬松茸多糖、穿心莲提取物、人参皂苷Rh2和姜黄素，均为中药免疫增强剂，通过各组分科学合理的配比，可有效激活机体免疫活性细胞，增强免疫性能。本专利技术不仅可以降低疫苗批间差异性，提高整体免疫水平，还可以提高疫苗的免疫效果，延长疫苗保护期。此外，本专利技术易生产，成本低廉，且使用方便。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步具体说明。本专利技术中所述实施例仅用于说明解释本专利技术而不对本专利技术的范围构成限制。实施例1:1、制备姬松茸多糖，包括以下步骤：（1）粉碎姬松茸，得姬松茸粉末，按料液比：1:70g/ml向姬松茸粉末中加入蒸馏水并调节PH至7.0；（2）微波提取：设定微波功率为500W，提取8min，收集提取液，该微波提取过程为间歇式微波提取，即提取2min后暂停1min，同时补加损失的水分使提取液体积保持相对恒定；（3）重复步骤（2），收集提取液；（4）将步骤（2）和（3）中所得滤液混合，利用旋转蒸发仪浓缩至1/4体积，加入80%的乙醇，于4℃静置12h，离心收集沉淀；（5）步骤（4）中所得沉淀依次经无水乙醇和丙酮洗涤后，真空干燥，即可得姬松茸多糖。2、制备穿心莲提取物，包括以下步骤：向称取穿心莲粗粉中加入8体积的80%乙醇，以600的功率超声提取50min，过滤，减压除去溶剂后，置于60℃下减压干燥至恒重，即可得穿心莲粗提取物。3、配制pH=7的磷酸盐缓冲液：a．称取下列原料组分：氯化钠6g、氯化钾0.05g、磷酸氢二钠1g、磷酸二氢钾0.05g、氯化钙0.05g和六水氯化镁0.05g，混合均匀备用；b．向步骤a中所得原料组分的混合物中加入1000ml的双蒸水，充分溶解后，在116℃条件下高压灭菌30min，即得pH=7的磷酸盐缓冲液。4、制备稀释液A．称取原料组分：姬松茸多糖：5g、穿心莲提取物：1g、人参皂苷Rh2：0.1g和姜黄素：2g。B．将步骤A中所称取的原料组分依次加入1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中，振荡水化，过滤除菌，即得猪瘟活疫苗用稀释液。实施例2：1、制备姬松茸多糖，包括以下步骤：（1）粉碎姬松茸，得姬松茸粉末，按料液比：1:80g/ml向姬松茸粉末中加入蒸馏水调节PH至7.0；（2）微波提取：设定微波功率为700W，提取10min，收集提取液，该微波提取过程为间歇式微波提取，即提取2min后暂停1min，同时补加损失的水分使提取液体积保持相对恒定；（3）重复步骤（2），收集提取液；（4）将步骤（2）和（3）中所得滤液混合，利用旋转蒸发仪浓缩至1/4体积，加入80%的乙醇，于4℃静置12h，离心收集沉淀；（5）步骤（4）中所得沉淀依次经无水乙醇和丙酮洗涤后，真空干燥，即可得姬松茸多糖。2、制备穿心莲提取物，包括以下步骤：向称取穿心莲粗粉中加入12体积的70%乙醇，以800W的功率超声提取70min，过滤，减压除去溶剂后，置于60℃下减压干燥至恒重，即可得穿心莲粗提取物。3、配制pH=7的磷酸盐缓冲液：a．称取下列原料组分：氯化钠10g、氯化钾0.5g、磷酸氢二钠1.2g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.2g和六水氯化镁0.2g，混合均匀备用；b．向步骤a中所得原料组分的混合物中加入1000ml的双蒸水，充分溶解后，在116℃条件下高压灭菌30min，即得pH=7的磷酸盐缓冲液。4、制备稀释液A．称取原料组分：姬松茸多糖：10g、穿心莲提取物：5g、人参皂苷Rh2：2g和姜黄素：6g。B．将步骤A中所称取的原料组分依次加入1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中，振荡水化，过滤除菌，即得猪瘟活疫苗用稀释液。实施例3：1、制备姬松茸多糖，包括以下步骤：（1）粉碎姬松茸，得姬松茸粉末，按料液比1:90g/ml向姬松茸粉末中加入蒸馏水并调节PH至7.0；（2）微波提取：设定微波功率为600W，提取12min，收集提取液，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种猪瘟活疫苗用稀释液，其特征在于每1000ml pH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：5‑10g、穿心莲提取物：1‑5g、人参皂苷Rh2：0.1‑2g和姜黄素：2‑6g。
【技术特征摘要】
1.一种猪瘟活疫苗用稀释液，其特征在于每1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：5-10g、穿心莲提取物：1-5g、人参皂苷Rh2：0.1-2g和姜黄素：2-6g。2.根据权利要求1所述的一种猪瘟活疫苗用稀释液，其特征在于每1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：5-8g、穿心莲提取物：2-4g、人参皂苷Rh2:0.5-1.5g和姜黄素：3-5g。3.根据权利要求1所述的一种猪瘟活疫苗用稀释液，其特征在于每1000mlpH=7的磷酸盐缓冲液中包含：姬松茸多糖：6g、穿心莲提取物：3g、人参皂苷Rh2：1g和姜黄素：4g。4.根据权利要求1或2或3所述的一种猪瘟活疫苗用稀释液，其特征在于所述姬松茸多糖的制备包括以下步骤：（1）粉碎姬松茸，得姬松茸粉末，按料液比：1:70-90g/ml向姬松茸粉末中加入蒸馏水并调节pH至7.0；（2）微波提取：设定微波功率为500-700W，提取8-12min，收集提取液；（3）重复步骤（2），收集提取液；（4）将步骤（2）和（3）中所得滤液混合，利用旋转蒸发仪浓缩至1/4体积，加入80%的乙醇，于4℃静置12h，离...
【专利技术属性】
技术研发人员：沈建军，张秀文，李阳，
申请(专利权)人：浙江美保龙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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