一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品及其制备方法技术

一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品及其制备方法，属于兽用生物制品技术领域。每1000mlPBS溶液中含有以下组分：黄芪皂苷Ⅲ 2‑8g、芦荟多糖5‑10g、姜黄素2‑6g、脂质体10‑15g、葡萄糖10‑15g和甘露醇10‑15g。本发明专利技术所制备的脂质体稀释液冻干制品可以降低半成品的批间差异。本发明专利技术所制备的脂质体稀释液冻干制品可以促进猪繁殖与呼吸综合征病毒的繁殖，提高病毒含量，增强疫苗的免疫原性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于兽用生物制品
，具体涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品及其制备方法。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS) ，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起猪的一种高度接触性传染病，不同年龄、品种和性别的猪均能感染，该病以母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道症状、免疫抑制、高感染率、高死亡率为特征的一种高致病性疫病。该病已给全球养猪业造成严重的经济损失，为了有效地控制该病，国内外已开发出多种用于预防PRRS 的疫苗。脂质体是一种具有同生物膜性质类似的磷脂双分子层结构载体，而中药脂质体系指将中药的有效成分包封于类脂质双分子层而制成的一种超微型球状药物载体制剂。该药物载体具有靶向、缓释给药的优势，而且脂质体对正常细胞和组织无损害和抑制作用，还可以表现出良好的细胞亲和性和组织相容性。脂质体在体内易降解、无毒性和无免疫原性，其作为一种药物载体不仅可以提高药物治疗指数，还能够降低药物毒性和减少药物毒副作用等优点。黄芪是一味重要的中药，具有益卫固表、利水清肿、托毒生肌、补中益气等功效，民间常用于治疗自汗、盗汗、血痹、浮肿、痛疽不溃或溃久不敛、内份带虚、脾虚泄泻及一切气衰血虚之症。黄芪皂苷为黄芪的主要活性成分之一，黄芪皂苷不仅可以促进淋巴增殖和抗体的增加，还能促进体液和细胞免疫应答反应。多糖是中药活性成分之一，大量研究表明，多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，更重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，具 有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的能力兽用生物制品质量评定最重要的指标之一就是批次间的稳定性，然而在实际生产过程中难以控制半成品的批次间稳定性，究其原因主要是在接种活体生物时的比例不确定，也就是说接种量不稳定导致生产出半成品有较大的差异。本专利技术宗旨在于解决猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖过程中批次间差异大以及病毒含量过低的难题。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品及其制备方法的技术方案。所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于每1000mlPBS溶液中含有以下组分：黄芪皂苷Ⅲ 2-8g、芦荟多糖5-10g、姜黄素2-6g、脂质体10-15g、葡萄糖10-15g和甘露醇10-15g。所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于每1000mlPBS溶液中含有以下组分：黄芪皂苷Ⅲ 4-6g、芦荟多糖6-8g、姜黄素3-5g、脂质体12-14g、葡萄糖12-14g和甘露醇12-14g。所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于所述的脂质体通过以下步骤制得：称取大豆卵磷脂、胆固醇，用氯仿进行溶解，并使其混合均匀，并通过减压法去除溶液中氯仿，制备脂质体膜溶液；取pH值为7.0～8.0的枸缘酸和枸缘酸钾缓冲溶液，将该缓冲溶液加入到脂质体膜溶液中，脱水后用匀浆机制备成脂质体。所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于所述的PBS溶液通过以下步骤制得：取氯化钠6-10g、氯化钾0.05-0.5g、磷酸氢二钠1-1.2g、磷酸二氢钾0.05-0.5g、氯化钙0.05-0.2g、含6个结晶水的氯化镁0.05-0.2g；将以上各成分混合后，溶于1000ml双蒸水中，经116℃，高压灭菌30分钟即得。所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品的制备方法，其特征在于包括以下步骤：取所述重量的组分充分混合后，加入到1000ml pH 7 的PBS溶液中水化，再经过0.22um的滤器进行过滤，分装于冻干瓶中，先在-40℃下预冻4-8h，再放真空冻干机中干燥，即得到猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品。所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品的制备方法，其特征在于所述的PBS溶液通过以下步骤制得：取氯化钠6-10g、氯化钾0.05-0.5g、磷酸氢二钠1-1.2g、磷酸二氢钾0.05-0.5g、氯化钙0.05-0.2g、含6个结晶水的氯化镁0.05-0.2g；将以上各成分混合后，溶于1000ml双蒸水中，经116℃，高压灭菌30分钟即得。本专利技术中黄芪皂苷Ⅲ由成都曼思特生物科技有限公司生产销售，芦荟多糖由兰州沃特莱斯生物科技有限公司生产销售，姜黄素由百灵威科技有限公司生产销售。本专利技术具有以下有益效果：1、本专利技术所制备的脂质体稀释液冻干制品可以降低半成品的批间差异2、本专利技术所制备的脂质体稀释液冻干制品可以促进猪繁殖与呼吸综合征病毒的繁殖，提高病毒含量，增强疫苗的免疫原性。具体实施方式 为了使本专利技术更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按常规实验方法进行。实施例1：PBS溶液的制备取氯化钠6-10g、氯化钾0.05-0.5g、磷酸氢二钠1-1.2g、磷酸二氢钾0.05-0.5g、氯化钙0.05-0.2g、含6个结晶水的氯化镁0.05-0.2g；将以上各成分混合后，溶于1000ml双蒸水中，经116℃，高压灭菌30分钟即得。实施例2：脂质体的制备称取大豆卵磷脂6g、胆固醇2g，用500ml氯仿进行溶解，并使其混合均匀，并通过减压法去除溶液中氯仿，制备脂质体膜溶液；取pH值为7.0～8.0的枸缘酸和枸缘酸钾缓冲溶液200ml，将该缓冲溶液加入到脂质体膜溶液中，脱水后用匀浆机制备成脂质体。实施例3：脂质体的制备称取大豆卵磷脂4g、胆固醇4g，用500ml氯仿进行溶解，并使其混合均匀，并通过减压法去除溶液中氯仿，制备脂质体膜溶液；取pH值为7.0～8.0的枸缘酸和枸缘酸钾缓冲溶液200ml，将该缓冲溶液加入到脂质体膜溶液中，脱水后用匀浆机制备成脂质体。实施例4：一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品的制备取黄芪皂苷Ⅲ2g、芦荟多糖5g、姜黄素2g、脂质体（实施例2制得）10g、葡萄糖10g、甘露醇10g；取所述重量的组分充分混合后，加入到1000ml pH 7 的PBS溶液（实施例1制得）中水化，再经过0.22um的滤器进行过滤，分装于冻干瓶中，先在-40℃下预冻6h，再放真空冻干机中干燥，即得到猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品。实施例5：一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品的制备取黄芪皂苷Ⅲ4g、芦荟多糖6g、姜黄素3g、脂质体（实施例3制得）12g、葡萄糖13g、甘露醇12g；取所述重量的组分充分混合后，加入到1000ml pH 7 的PBS溶液（实施例1制得）中水化，再经过0.22um的滤器进行过滤，分装于冻干瓶中，先在-40℃下预冻4h，再放真空冻干机中干燥，即得到猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品。实施例6：一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品的制备取黄芪皂苷Ⅲ8g、芦荟多糖10g、姜黄素6g、脂质体（实施例3制得）15g、葡萄糖15g、甘露醇15g；取所述重量的组分充分混合后，加入到1000ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于每1000mlPBS溶液中含有以下组分：黄芪皂苷Ⅲ 2‑8g、芦荟多糖5‑10g、姜黄素2‑6g、脂质体10‑15g、葡萄糖10‑15g和甘露醇10‑15g。

【技术特征摘要】
1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于每1000mlPBS溶液中含有以下组分：黄芪皂苷Ⅲ 2-8g、芦荟多糖5-10g、姜黄素2-6g、脂质体10-15g、葡萄糖10-15g和甘露醇10-15g。2.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于每1000mlPBS溶液中含有以下组分：黄芪皂苷Ⅲ 4-6g、芦荟多糖6-8g、姜黄素3-5g、脂质体12-14g、葡萄糖12-14g和甘露醇12-14g。3.如权利要求1或2所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于所述的脂质体通过以下步骤制得：称取大豆卵磷脂、胆固醇，用氯仿进行溶解，并使其混合均匀，并通过减压法去除溶液中氯仿，制备脂质体膜溶液；取pH值为7.0～8.0的枸缘酸和枸缘酸钾缓冲溶液，将该缓冲溶液加入到脂质体膜溶液中，脱水后用匀浆机制备成脂质体。4.如权利要求1或2所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒脂质体稀释液冻干制品，其特征在于所述的PBS溶液通过以下步骤制得：取氯化钠6-10g、氯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈建军，张秀文，李阳，
申请(专利权)人：浙江美保龙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33