用于治疗真菌感染的含胆固醇的脂质体两性霉素的制剂制造技术

用于治疗真菌感染的新制剂，所述制剂包含在盐水悬浮液中含有胆固醇的纳米脂质体两性霉素B。

【技术实现步骤摘要】
本分案申请是基于申请号为201080001964.8，申请日为2010年3月4日，专利技术名称为“用于治疗真菌感染的含胆固醇的脂质体两性霉素的制剂”的原始中国专利申请的分案申请。
：本专利技术涉及基于纳米脂质体(nanosomal)系统的新药物递送系统。在本研究中，用冷冻电子显微镜术(cryoEM)研究了在盐水中含有胆固醇的纳米脂质体两性霉素B的样品。分析了未超声处理以及超声处理(sonication)之后的新鲜样品和两年的样品。cryoEM图像的分析包括尺寸分布和整体形态学，例如层性质(lamellarity)(单层与多层)和聚集。
技术介绍
:在免疫缺陷和具有免疫能力的患者中，由不同属的酵母真菌和皮肤真菌导致的全身性和局部真菌病上升的发病率仍是重要和未能充分解决的医学问题。导致的死亡率和令人担忧的增加的发病率引起重大关注。对于迄今所有已发现的药物，存在有限的治疗谱、不良的功效、适合的制剂的限制、药物不良反应和威胁生命的毒性的问题，并且经常存在上述问题的某些或全部的组合。多烯氨基糖苷类抗生素显示出最有希望的广谱和功效。但是，大部分这些化合物的毒性妨碍了它们用作治疗剂。两性霉素B是唯一仍广泛用于临床的多烯大环内酯，尽管事实上，例如脱氧胆酸钠胶束悬浮液、脂质体、脂质络合物和脂质胶体分散体的多种制剂均不同程度地具有威胁生命的肾毒性。两性霉素B制剂的目的是去除肾毒性、使制剂稳定、确保低剂量的有效性和甚至在高剂量避免毒性和药物不良反应。存在大量的描述两性霉素B制剂的已授权/提交的专利和出版物。除了下文描述的4种制剂，没有其它制剂是可应用的，因为它们不能够使这类其它制剂充分成为肾脏/安全的。在所有已知的两性霉素B制剂中，组分选自磷脂/脂质和稳定剂的大量选择。由于已知两性霉素B在盐水中沉淀，没有制剂浸于盐水中。1.常规两性霉素B：在5％葡萄糖中的两性霉素B-脱氧胆酸盐胶体悬浮液，功效33％肾毒性67％两性霉素B不溶于水性介质。在20世纪50年代末期，如下最低限度地克服了该问题：通过将两性霉素B溶解在脱氧胆酸盐中，配制成5％的葡萄糖水溶液中的胶束悬浮液。两性霉素B在NaCl中沉淀，因此在脱氧胆酸盐中的两性霉素B既不在NaCl中制备，也不在盐水中稀释。此外，将该悬浮液冻干以使制剂稳定。2.在5％葡萄糖中稀释的脂质体两性霉素B功效77％肾毒性20％脂质体两性霉素B由在作为缓冲液的4.5％蔗糖和琥珀酸二钠六水合物中的氢化大豆磷脂酰胆碱、双硬脂酰基磷脂酰甘油、胆固醇和α生育酚的组合组成，所述脂质体两性霉素B是经过对磷脂、甾醇、膜稳定糖和它们的不同比例的大量组合进行选择得到的。尽管使用膜稳定蔗糖，还是将该制剂冻干以克服不稳定性。已报道该脂质体两性霉素B制剂在盐水中沉淀，因此严禁在盐水中稀释或接触盐水。美国专利4766046描述：由于两性霉素B脂质体的尺寸和不稳定性，还不能制备和储存在若干周的保存时期内没有显著(几倍)尺寸增加的小-直径(diamater)两性霉素B脂质体。因此，由于不同的体内脂质体摄取和药物释放以及涉及脂质体尺寸的毒性性质，难以控制和评价储存的两性霉素B脂质体的治疗指数。当脂质体尺寸大于1-2微米时，尺寸不稳定性问题特别严重，因为包含胆固醇的两性霉素B脂质体实质上比更小、原始尺寸的脂质体更具毒性。迄今，仅仅通过在制备后不久给予特定尺寸的脂质体，才解决尺寸稳定性问题。在通常的临床环境中，这当然是不切实际的药物递送方法。3.在5％葡萄糖中稀释的两性霉素B脂质络合物功效34％肾毒性63％该制剂由两性霉素B、合成的磷脂即二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱和二肉豆蔻酰磷脂酰甘油组成。在给药之前将水性悬浮液稀释于5％葡萄糖中。相对于常规两性霉素B，其功效和毒性性质均无改善。4.稀释于5％葡萄糖中的两性霉素B胶体分散剂功效46％肾毒性40％将氨丁三醇、无水乙二胺四乙酸(edentate)二钠和HCl乳糖一水合物与两性霉素B和胆固醇基硫酸钠冻干。存在于两性霉素B脂质制剂中的葡萄糖显著地减少局部应用制剂的有益效果。暗示葡萄糖的抑制原理涉及由葡萄糖引起的高黏度或由葡萄糖引起的胶体颗粒的脂质/水界面上的变化(CroweJH等人1988Biochim.BiophysActa.947:367-384)。甚至最好的脂质体两性霉素B的治疗成功率(success)是77％，其不如(subpar)本专利技术。因此，在本专利技术中构思用盐水代替葡萄糖，其具有降低两性霉素B肾毒性的附加优势。根据众所周知的和记载的事实，盐水导致两性霉素B1-4的沉淀，独特地设计脂质组合物和脂质与药物的比率以确保在纳米脂质体中的两性霉素B被固定，以预防纳米脂质体药物的沉淀。专利技术目的:本专利技术的目的是，提供在盐水悬浮液中被稳定的含有胆固醇的纳米脂质体新制剂，其具有降低的肾毒性。本专利技术的另一个目的是，提供在盐水悬浮液中被稳定的、含有胆固醇的纳米脂质体的新制剂，其具有增强的抗真菌活性。仍然是本专利技术的另一个目的是，提供在盐水悬浮液中被稳定的含有胆固醇的纳米脂质体的制剂，其非常稳定。本专利技术的另一个目的是，提供在盐水悬浮液中被稳定的含有胆固醇的纳米脂质体的新制剂，其毒性更低。仍然是本专利技术的另一个目的是，提供在盐水悬浮液中被稳定的含有胆固醇的纳米脂质体的新制剂，其中由于两性霉素B的高抗感染活性，所使用的两性霉素B的剂量是非常小的。另外本专利技术的另一个目的是，提供不同用途的新制剂，所述用途目的在于为了更高的抗感染活性优化更低的两性霉素B的剂量，以及进一步将肾/毒性最小化和例如静脉内、眼的和局部等多种用途的稳定的制剂。专利技术概述:根据本专利技术提供了用于治疗真菌感染的新制剂，所述新制剂包含:在悬浮液中含有胆固醇的纳米脂质体两性霉素B纳米脂质体。根据本专利技术，也提供了用于制备在盐水悬浮液中被稳定的含有胆固醇的纳米脂质体的新制剂的方法。专利技术详述:在溶液中，浓度是单位体积溶剂中溶质分子的数量，所述溶剂在注射、灌注或其它液体剂型的情况下通常是含水的，而在包括混悬剂(例如胶体混悬剂)的颗粒制剂中，通过承载药物的颗粒的数量确定药物的有效浓度。这种载体是用于注射、口服或吸入、透皮等的脂质、蛋白质或其它生物可降解的载体和主要用于局部制剂的非生物可降解载体的不同纳米或微米尺寸的集合。在本专利技术中，纳米脂质体具有优化的脂质与药物的高比率，以增加每单位量药物含有药物的纳米脂质体的数量，并通过给药之前补充纳米化(nanofication)由此实现功效最优化。颗粒尺寸的脂质与药物的比率的优化基于本专利技术的新概念，该新概念为通过在制备后和给药前增加制剂中API载体颗粒的数量，以增加活性药物的有效浓度。这通过降低更多含有脂质的制剂的颗粒尺寸而实现。在制剂中，因为优化的脂质与药物的更高比率，存在更大数目的颗粒/mg药物。更多颗粒导致药物在体内更好/更高的分布。由于在悬浮液中存在更有效的药物浓度，存在更多数量的遍及身体均匀地分布的分子。这将减少所需要的治疗剂量。由于例如两性霉素B的API在更高剂量下具有毒性，通过降低API的需要，将自动减少对动物/患者的毒性并因此导致更安全的药物制剂。在颗粒制剂中的API包囊于载体颗粒的多个层中。疏水/亲脂药物维持插入在脂质纳米脂质体的脂质双层中，因此甚至当这类纳米脂质体分裂或破碎时所述药物不本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗真菌感染的制剂，所述制剂包含:纳米脂质体两性霉素B，其中含有胆固醇的纳米脂质体悬浮在生理盐水中，且纳米脂质体颗粒的直径为20‑200nm。

【技术特征摘要】
2009.10.16 IN 1258/KOL/091.用于治疗真菌感染的制剂，所述制剂包含:纳米脂质体两性霉素B，其中含有胆固醇的纳米脂质体悬浮在生理盐水中，且纳米脂质体颗粒的直径为20-200nm。2....

【专利技术属性】
技术研发人员：L·沃玛，J·N·沃玛，
申请(专利权)人：莱富凯尔创新私人有限公司，
类型：发明
国别省市：印度;IN