一种灯盏乙素苷元脂质体制剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于纳米药物输送技术领域，具体涉及一种含难溶性中草药有效成分灯盏乙素苷元的脂质体及其制备方法。本发明专利技术利用灯盏乙素苷元较好的亲脂性（logD为2.54(chemspider)），可以以分子形式通过磷脂双分子层，进入内水相，并在内水相较高的pH条件下，电离为灯盏乙素苷元离子。由于磷脂膜对离子基本无通透性，因此可以利用脂质体内外水相的pH梯度，达到稳定包封的灯盏乙素苷元的目的。同时，将灯盏乙素苷元包裹于脂质体内水相，也有利于提高其在储存过程中的化学稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于纳米药物输送
，具体涉及一种含难溶性中草药有效成分灯盏乙素苷元的脂质体及其制备方法。
技术介绍
灯盏花，又名灯盏细辛、地顶草、双葵花，是菊科植物短葶飞蓬的干燥全草，主要分布于我国西南地区。灯盏花性寒、微苦、甘温辛，具有消炎止痛、祛风除湿、活血化瘀、通经活络的功效，可用于治疗心脑血管疾病。最早收录于《滇南本草》。灯盏花作为一种常见中草药之一在民间广为流传，常见其在苗药、藏药、壮药、白药等的处方中，其还可以用于风湿疼痛，瘫痪等疾病的治疗。1977年收纳于《中国药典》一部，目前，已上市的灯盏花注射液主要用于心脑血管系统疾病的治疗。灯盏乙素为灯盏花的主要有效成分，为多羟基黄酮苷类化合物。研究表明：灯盏乙素在体内主要以灯盏乙素苷元的形式吸收。灯盏乙素苷元具有扩张血管、抗凝血、以及对肝、肾功能的保护作用等；有研究表明灯盏乙素苷元可以跨过血脑屏障，在脑组织中具有较高的浓度，有利于其对心脑血管疾病的治疗。但是，灯盏乙素苷元存在以下几点问题：1.灯盏乙素苷元的水溶性极低(约1μg/ml)；2.灯盏乙素苷元稳定性较差；溶液的pH值、温度、体内各种酶等因素对灯盏乙素苷元的稳定性均有显著的影响；3.灯盏乙素苷元蛋白结合率较高，体内半衰期较短。因此，需要寻找一种适于灯盏乙素苷元的药物输送方式。由于灯盏乙素苷元自身水溶性极低且化学稳定性差，目前尚未有灯盏乙素苷元制剂的研究报道。而现有的研究和专利申请主要集中在通过化学修饰，制备灯盏乙素苷元衍生物或前药。
技术实现思路
为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种灯盏乙素苷元脂质体制剂及其制备与应用。为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供一种灯盏乙素苷元脂质体制剂，包括：灯盏乙素苷元和脂质体载体，所述脂质体具有呈双分子层结构的脂质体膜。优选地，所述灯盏乙素苷元脂质体制剂还包括：位于脂质体膜内的内水相和位于脂质体膜外的外水相，所述灯盏乙素苷元被包封于所述内水相中。优选地，所述内水相包括：醋酸盐水溶液，所述外水相包括生理等渗溶液。优选地，所述醋酸盐选自醋酸钠或醋酸钙。优选地，所述醋酸盐水溶液中醋酸盐的浓度是50mM～500mM。更优选是150mM～500mM。优选地，所述醋酸盐水溶液的pH值范围是5.0～9.0。更优选是6.0～8.0。优选地，所述内水相中还包括环糊精。所述环糊精优选为β-环糊精，更优选为羟丙基-β-环糊精。优选地，所述内水相中环糊精的浓度范围大于等于10％(w/w)。更优选大于等于20％(w/w)。优选地，所述内水相中环糊精的浓度范围小于等于40％(w/w)。优选地，所述外水相的pH范围是5.0～8.0。更优选是6.0～7.0。优选地，所述生理等渗溶液选自：5％(w/v)葡萄糖水溶液、10％(w/v)蔗糖水溶液或0.9％(w/v)氯化钠水溶液。本专利技术第二方面，提供了前述灯盏乙素苷元脂质体的制备方法，包括：(1)制备内水相和外水相均含有醋酸盐水溶液的空白脂质体；(2)制备内水相含有醋酸盐水溶液、外水相含有生理等渗溶液的空白脂质体；(3)将步骤(2)所得空白脂质体与灯盏乙素苷元溶液混合，孵育，去除游离灯盏乙素苷元，获得灯盏乙素苷元脂质体制剂。优选地，所述醋酸盐是醋酸钠或醋酸钙。优选地，所述醋酸盐水溶液中醋酸盐的浓度是50mM～500mM。更优选是150mM～500mM。优选地，所述醋酸盐水溶液的pH值范围可以是5.0～9.0。更优选是6.0～8.0。优选地，所述内水相中还还含有环糊精。所述环糊精优选是β-环糊精。更优选是羟丙基-β-环糊精。优选地，所述内水相中环糊精的浓度范围大于等于10％(w/w)。更优选大于等于20％(w/w)。优选地，所述内水相中环糊精的浓度范围小于等于40％(w/w)。优选地，所述外水相的pH范围可以是5.0～8.0。更优选是6.0～7.0。优选地，所述生理等渗溶液选自：5％(w/v)葡萄糖水溶液、10％(w/v)蔗糖水溶液或0.9％(w/v)氯化钠水溶液。优选地，所述灯盏乙素苷元溶液中，灯盏乙素苷元的浓度大于等于0.1mg/ml。优选地，所述灯盏乙素苷元溶液包括灯盏乙素苷元和用于增加灯盏乙素苷元溶解度的助溶剂和/或弱碱性盐。优选地，所述助溶剂选自聚乙二醇、丙二醇或环糊精。优选地，所述聚乙二醇的分子量是300～400。优选地，所述环糊精选自甲基-β-环糊精，羟乙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精，烯丙基-β-环糊精中的任一种或多种的组合。优选地，所述弱碱性盐选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾或碳酸钾中的任一种或多种的组合。本专利技术的第三方面，提供一种由前述制备方法获得的灯盏乙素苷元脂质体制剂。本专利技术的第四方面，提供了前述灯盏乙素苷元脂质体制剂用于制备药物的用途，所述药物用于治疗缺血性脑血管疾病、脑栓塞、或脑出血恢复期瘫痪。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：(1)本专利技术提供的灯盏乙素苷元脂质体制剂显著提高药物浓度，使得药物浓度高达1.5mg/ml，可临床应用。本专利技术利用内外水相的pH与醋酸盐梯度，促进灯盏乙素苷元进入内水相，灯盏乙素苷元以分子、离子等形式在内水相中形成稳定的晶型或无定型结构，实现灯盏乙素苷元的稳定包封(包封率均在80％以上)。(2)本专利技术利用脂质体长循环、缓控释的特点，延长灯盏乙素苷元在体内的半衰期至19.41±3.68hr(终末半衰期)，实现维持灯盏乙素苷元血药浓度稳定的目标。(3)本专利技术利用脂质体具有的相对封闭、稳定的内水相，实现制剂中灯盏乙素苷元的长期稳定储存。根据稳定性实验研究，本专利技术所提供的灯盏乙素苷元脂质体具有良好形态与包封率，包封率高达80％以上。附图说明图1：灯盏乙素苷元甲醇溶液标准曲线。图2：内水相中HPCD的含量对灯盏乙素苷元脂质体在白蛋白溶液中释放速率的影响。图3：不同内水相灯盏乙素苷元脂质体储存稳定性。图4：灯盏乙素苷元原料药(a，引用于唐浩的硕士论文)与自制灯盏乙素苷元脂质体(b)静脉给药后灯盏乙素苷元血药浓度-时间曲线图；纵坐标单位为ng/ml，横坐标单位为小时。具体实施方式灯盏乙素苷元脂质体制剂本专利技术的灯盏乙素苷元脂质体制剂，包括：灯盏乙素苷元和脂质体载体。所述脂质体具有呈双分子层结构的脂质体膜。所述脂质体膜类似于生物膜。所述脂质体的载体材料含有磷脂和胆固醇。本专利技术对于脂质体的载体材料及含量并无特别的限制，只要能够形成稳定的、无泄漏的呈双分子层结构的脂质体膜即可。一般情况下，只要磷脂和胆固醇的摩尔比例范围在(80～50)：(20～50)(磷脂：胆固醇)时，即可形成稳定的、无泄漏的呈双分子层结构的脂质体膜。这些均在本领域技术人员所能知晓的知识范围内。本专利技术实施例中列举了：所述磷脂选用氢化豆磷脂(HSPC)和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)。但是，并不仅限于此。所述灯盏乙素苷元脂质体制剂还包括：位于脂质体膜内的内水相和位于脂质体膜外的外水相。所述灯盏乙素苷元被包封于所述内水相中。脂质体膜内的内水相和膜外的外水相之间存在醋酸盐梯度。所述存在醋酸盐梯度是指存在醋酸盐离子浓度与pH的差异。所述内水相包括醋酸盐水溶液，所述外水相包括生理等渗溶液。所述醋酸盐可以是醋酸钠或醋酸钙。所述醋酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种灯盏乙素苷元脂质体制剂，包括：灯盏乙素苷元和脂质体载体，所述脂质体具有呈双分子层结构的脂质体膜。

【技术特征摘要】
1.一种灯盏乙素苷元脂质体制剂，包括：灯盏乙素苷元和脂质体载体，所述脂质体具有呈双分子层结构的脂质体膜。2.根据权利要求1所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述灯盏乙素苷元脂质体制剂还包括：位于脂质体膜内的内水相和位于脂质体膜外的外水相，所述灯盏乙素苷元被包封于所述内水相中。3.根据权利要求2所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述内水相包括：醋酸盐水溶液，所述外水相包括生理等渗溶液。4.根据权利要求3所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述醋酸盐选自醋酸钠或醋酸钙。5.根据权利要求3所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述醋酸盐水溶液中醋酸盐的浓度大于等于50mM；优选大于等于150mM；更优选大于300mM。6.根据权利要求3所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述醋酸盐水溶液的pH值范围是5.0～9.0。7.根据权利要求3所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述内水相中还包括环糊精。8.根据权利要求7所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述环糊精为β-环糊精，更优选为羟丙基-β-环糊精。9.根据权利要求7所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述内水相中环糊精的浓度范围大于等于10％(w/w)；更优选大于等于20％(w/w)。10.根据权利要求2所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述外水相的pH范围是5.0～8.0。11.根据权利要求3所述的灯盏乙素苷元脂质体制剂，其特征在于，所述生理等渗溶液选自：5％(...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏晓慧，金玲玲，徐宇虹，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31