一种灯盏花乙素的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种灯盏花乙素的制备方法，其包括：(1)将灯盏花粗品溶解于固定相和流动相的混合物中，得进样液；(2)用固定相填充高速离心分配色谱仪的色谱柱，加入流动相，在流动相与固定相所形成的溶剂体系达到流体静力学平衡后，将进样液进样，收集成盐的灯盏花乙素；(3)将所述成盐的灯盏花乙素与盐酸混合，将固液分离，即得灯盏花乙素。本发明专利技术的制备方法提取效率高，产量大，溶剂消耗低，样品基本无损失、无污染，所提取的灯盏花乙素产物的纯度高达98％以上，并且该制备方法适用于对各种工艺条件制备的灯盏花粗品进行分离纯化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
灯盏花(又名灯盏细辛)是菊科飞蓬属短葶飞蓬(Erigeron breuiscapus (Vant.)Hand.-Mazz.)的全草，具有微寒解毒、活血化瘀、祛风除湿、通经活络、消炎止痛等功效。现代药理表明灯盏花具有降低脑血管阻力，改善脑血循环、抗血小板凝集和增加脑血流量作用，临床上对治疗心脑血管疾病，对中风偏瘫、肾衰、冠心病等具有很好的疗效。灯盏花乙素为其主要的有效成分。以前报导的灯盏花乙素的分离提取方法主要是采用柱色谱法，包括C18反相柱、大孔树脂柱。但是所有的这些柱色谱在使用时都需要采用固体填料，易产生不可逆吸附，具有样品易损失、易污染、低效率、速度慢和分离步骤繁琐等缺点。
技术实现思路
本专利技术所解决的技术问题在于克服了现有的灯盏花乙素的提取方法繁琐，并且效率低、速度慢、样品易受到损失和污染的缺陷，提供，该制备方法不仅提取效率高，产量大，溶剂消耗低，样品基本无损失、无污染，所提取的灯盏花乙素产物的纯度高达98%以上，并且该制备方法适用于对各种工艺条件制备的灯盏花粗品进行分离纯化。本专利技术通过以下技术方案解决上述技术问题。本专利技术提供了，其包括下述步骤:(I)将灯盏花粗品溶解于固定相和流动相的混合物中，得进样液；(2)用固定相填充高速离心分配色谱仪的色谱柱，加入流动相，在流动相与固定相所形成的溶剂体系达到流体静力学平衡后，将所述进样液进样，收集成盐的灯盏花乙素；(3)将所述成盐的灯盏花乙素与盐酸混合，将固液分离，即得灯盏花乙素；其中，所述固定相和流动相由下述方法制得:将各组分混合均匀，静置分层后，将上、下相溶液分开，分别进行超声振荡，排出气泡，上相溶液即为固定相，下相溶液即为流动相；所述的各组分为体积比为(1-5): (0-4): (1-4): (2-6)的组分A、组分B、组分C和组分D ；所述组分A为乙酸乙酯；所述组分B为丙酮、四氢呋喃、甲乙酮和正丁醇中的一种或多种；所述组分C为乙腈、甲醇和乙醇中的一种或多种；所述组分D为碱溶液和/或强碱弱酸盐的水溶液，所述碱包括氢氧化钠和/或氢氧化钾，所述强碱弱酸盐包括碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢二钠和磷酸氢二钾中的一种或多种，所述组分D的pH值大于7小于等于10。本专利技术中，所述组分A、组分B、组分C和组分D的体积比较佳地为(2-4): (0.05-0.5): (1.2-2.0): 3，更佳地为(3-4): (0.1-0.2): (1.2-1.8): 3。所述碱溶液较佳地为0.0004-0.005被％的氢氧化钠溶液，更佳地为0.0005wt%的氢氧化钠溶液。所述强碱弱酸盐的水溶液较佳地为1.0-3.0wt%的磷酸氢二钠水溶液和/或1.0-3.0￥丨％磷酸氢二钾水溶液，更佳地为2.0wt%的磷酸氢二钠水溶液或2.0wt%的磷酸氢二钾水溶液。在所述固定相和流动相的制备过程中，所述静置分层的时间可为本领域常规的静置分层时间，较佳地为2-12h，更佳地为4-12h。步骤(I)中，所述的灯盏花粗品可为本领域常规使用的灯盏花粗品。所述灯盏花粗品较佳地为滇虹药业集团玉溪生物制药有限公司生产的灯盏花粗品。所述灯盏花粗品中，灯盏花乙素的含量较佳地为20-80wt%，更佳地为50-80wt%。步骤(I)中，所述进样液中，所述灯盏花粗品的浓度较佳地为5_25mg/mL。所述固定相和流动相的混合物中，所述固定相和流动相的体积比较佳地为0.7:1.5-1.5:0.7，更佳地为1:1。步骤(2)中，所述的高速离心分配色谱仪可为本领域常规使用的高速离心分配色谱仪，较佳地为法国Rousselet Robatel Kromaton公司生产的型号为FCPC A200的高速离心分配色谱仪。所述高速离心分配色谱仪的使用参数条件可为本领域常规的参数条件。步骤(2)中，所述流体静力学平衡为本领域常规意义上的平衡状态，在高速离心分配色谱法中，当在加入流动相时，所排出的溶剂开始出现分层现象，即溶剂体系已达到流体静力学平衡。步骤(2)中，所述加入流动相时,流速较佳地为2.0-4.0mL/min,更佳地为3mL/min0步骤⑵中，所述的高速离心分配色谱仪的转速较佳地为1200-1800rpm/min,更佳地为 1400rpm/min。步骤(2)中，所述进样的流速较佳地为2.0-4.0mL/min,更佳地为3mL/min。步骤(2)中，所述的收集较佳地在检测波长335nm处进行。步骤(3)中，所述盐酸的用量可为本领域的常规用量，只要能将所述成盐的灯盏花乙素完全转变为灯盏花乙素即可。步骤(3)中，所述固液分离的方法和条件为本领域常规的方法和条件。在所述的固液分离后，较佳地进行洗涤的操作。所述洗涤的洗涤液较佳地为水。在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。本专利技术的积极进步效果在于:本专利技术的制备方法提取效率高，产量大，溶剂消耗低，样品基本无损失、无污染，所提取的灯盏花乙素产物的纯度高达98%以上，并且该制备方法适用于对各种工艺条件制备的灯盏花粗品进行分离纯化。【具体实施方式】下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。下述实施例中，所采用的高速离心分配色谱仪为法国Rousselet RobatelKromaton公司生产的型号为FCPC A200的高速离心分配色谱仪，其柱容量为200mL，配有进样阀、Kromaton四元泵、HD-21-2紫外检测器和N2000工作站。下述实施例中，灯盏花粗品为滇虹药业集团玉溪生物制药有限公司生产的灯盏花粗品。该灯盏花粗品中，灯盏花乙素的含量一般在50-80wt %。实施例1本实施例中，固定相和流动相由下述方法制得:将乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和0.0005wt% KNaOH溶液以3:0.1:1.5:3的体积比混合均匀，静置分层4h后，将上、下相溶液分开，分别进行超声振荡，排出气泡，上相溶液即为固定相，下相溶液即为流动相。，其包括下述步骤:(I)将灯盏花粗品50mg溶解于5mL固定相和5mL流动相的混合物中，得进样液；(2)用固定相填充高速离心分配色谱仪的色谱柱，在1400rpm的转速条件下，以3.0mL/min的速度泵入流动相，在流动相与固定相所形成的溶剂体系达到流体静力学平衡后，将进样液进样，于335nm检测波长处收集成盐的灯盏花乙素；(3)将成盐的灯盏花乙素与当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种灯盏花乙素的制备方法，其包括下述步骤：(1)将灯盏花粗品溶解于固定相和流动相的混合物中，得进样液；(2)用固定相填充高速离心分配色谱仪的色谱柱，加入流动相，在流动相与固定相所形成的溶剂体系达到流体静力学平衡后，将所述进样液进样，收集成盐的灯盏花乙素；(3)将所述成盐的灯盏花乙素与盐酸混合，将固液分离，即得灯盏花乙素；其中，所述固定相和流动相由下述方法制得：将各组分混合均匀，静置分层后，将上、下相溶液分开，分别进行超声振荡，排出气泡，上相溶液即为固定相，下相溶液即为流动相；所述的各组分为体积比为(1‑5):(0‑4):(1‑4):(2‑6)的组分A、组分B、组分C和组分D；所述组分A为乙酸乙酯；所述组分B为丙酮、四氢呋喃、甲乙酮和正丁醇中的一种或多种；所述组分C为乙腈、甲醇和乙醇中的一种或多种；所述组分D为碱溶液和/或强碱弱酸盐的水溶液，所述碱包括氢氧化钠和/或氢氧化钾，所述强碱弱酸盐包括碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸氢二钠和磷酸氢二钾中的一种或多种，所述组分D的pH值大于7小于等于10。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨义芳，冯博闻，刘欣，谢欣辛，
申请(专利权)人：上海医药工业研究院，中国医药工业研究总院，
类型：发明
国别省市：上海;31