合成紫杉烷衍生物的中间体制造技术

具有抗癌活性的新的紫杉烷衍生物，其制备方法，以及制备在１３－位被异丝氨酸残基取代的１４β－羟基－１，１４碳酸酯浆果赤霉素Ⅲ和Ⅴ衍生物的方法。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本申请是申请日为2000年7月3日的中国专利申请No.200410034672.0的分案申请。本专利技术涉及可用作化疗剂的新的紫杉烷(taxane)，含有它的药物组合物，以及制备在13-位被异丝氨酸残基取代的14-β-羟基-1，14-碳酸浆果赤霉素III和V衍生物的方法。紫杉烷类药物是最近开发的最重要的抗癌类药物之一。紫杉醇及其类似物Docetaxel在治疗几种肿瘤中的显著活性已使得人们把研究集中于具有抗微管活性的物质上。然而，紫杉烷类药物的特征是具有特别的作用机制，因为它们促进微管装配并抑制微管蛋白解聚。目前使用的紫杉烷类药物的主要缺点是(a)不溶于水，使得必须使用可能会引起过敏反应的特殊载体，(b)具有毒性，这限制了剂量，(c)发展出抗药机制。已有人提出，细胞对紫杉烷类药物的抗药性与MDR(“多药抗性”)表型有关，MDR表型是由P-糖蛋白载体、微管蛋白改变、以及细胞程序死亡调节蛋白表达的改变介导的。为了找到具有更高溶解度和更好耐受性的新的活性分子，已合成了14β-羟基-10-去乙酰基浆果赤霉素III和V紫杉烷衍生物。US 5705508公开了在13-位被异丝氨酸残基取代的某些14-羟基浆果赤霉素III衍生物及其制备方法。现在已经发现，式(I)化合物，即14β-羟基-1，14-碳酸浆果赤霉素V衍生物 具有显著的细胞毒性和抗癌活性，并且能够克服表达MDR表型的细胞系的抗药性。所述化合物与在上述美国专利中描述的衍生物的不同之处在于，在本专利技术化合物中，7-位的羟基是α构型。在US 5705508中称为SB-T-101131的衍生物13-(N-Boc-β-异丁基异丝氨酰基)-14β-羟基浆果赤霉素III 1，14-碳酸酯可用作制备化合物(I)的原料。对于这种情况，将所述浆果赤霉素III衍生物在甲醇或THF中用DBU(二氮杂二环7-十一碳烯)处理，或者简单地把浆果赤霉素III在与二氯甲烷或氯代溶剂的溶液中在脂族醇例如甲醇、乙醇或丙醇存在下用碱性allumine处理1小时-14天。在中性或弱碱性pH条件下将在C-7具有β构型的化合物转化成更稳定的α异构体(浆果赤霉素V衍生物)。或者，化合物(I)可用还能制得相应的C-7β差向异构体的方法制得。所述方法(A)包括下述步骤a)将14β-羟基-10-去乙酰基浆果赤霉素III或V转化成在7-位三乙基甲硅烷基化的衍生物；b)由步骤(a)产物制备1，14碳酸酯衍生物；c)将10-羟基选择性地乙酰化；d)将步骤(c)产物与(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧基苯基)-4-异丁基-1-噁唑烷-5-甲酸反应；e)将三乙基甲硅烷基和二甲氧基亚苄基保护基从步骤(d)产物上裂解下来。依据方法(A)的优选实施方案，在步骤(a)中使用三乙基氯硅烷作为甲硅烷基化剂，在步骤(b)中，1，14碳酸酯衍生物是使用在甲苯中的光气在3∶1二氯甲烷/吡啶溶液中于氮气氛下制得的。在接下来的步骤(c)中，在无水THF中用LiHMDS将14β-羟基-10-去乙酰浆果赤霉素III或V 7-Tes-1，14-碳酸酯成盐，由此获得了10-羟基衍生物锂盐，然后用乙酰氯将其乙酰化。14β-羟基-7-Tes-1，14-碳酸浆果赤霉素III或V与(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧基苯基)-4-异丁基-1-噁唑烷-5-甲酸之间的缩合反应(步骤(d))是在无水非极性有机溶剂中在碱和缩合剂例如二环己基碳二亚胺(DCC)存在下进行的。最后，在步骤(e)中，三乙基甲硅烷基是在乙腈/吡啶溶液中于氮气氛下用氟化吡啶鎓除去的，而二甲氧基亚苄基是在二氯甲烷溶剂中通过加入甲醇/HCl、然后加入NaHCO3来除去的。上述方法的步骤顺序可颠倒，由此以相差不大的产率获得终产物。所述另一方法(B)包括下述步骤a′)将14β-羟基-10-去乙酰浆果赤霉素III或V的C-10羟基选择性地乙酰化；b′)由步骤(a′)产物制备1，14碳酸酯衍生物；c′)将C-7的羟基甲硅烷基化；d′)将步骤(c′)产物与(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧基苯基)-4-异丁基-1-噁唑烷-5-甲酸反应；e′)将三乙基甲硅烷基和二甲氧基亚苄基保护基从步骤(d′)产物上裂解下来。后一方法包括多项优点，例如不用色谱纯化仅通过结晶就可能获得所需的合成子(synton)(1，14-碳酸酯-7-Tes-浆果赤霉素III或V)。依据优选的实施方案，步骤(a′)的选择性乙酰化是在铈、钪、镱盐优选CeCl3.7H2O存在下用乙酸酐进行的，剩余步骤是如上所述进行的。本专利技术还包括作为制备14β-羟基-1，14-碳酸酯浆果赤霉素III或V的方法的中间体产物的下述化合物14β-羟基浆果赤霉素III或V，14β-羟基浆果赤霉素III或V 1，14-碳酸酯，14β-羟基-7-Tes-10-去乙酰基浆果赤霉素III或V，14β-羟基-7-Tes-浆果赤霉素III或V，14β-羟基-7-Tes-浆果赤霉素III或V 1，14-碳酸酯。本专利技术另一方面涉及依据下述方案制备(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧基苯基)-4-异丁基-1-噁唑烷-5-甲酸的方法反应流程 所述方法包括下述步骤a)用Boc保护亮氨醇的氨基；b)将N-Boc-L-亮氨醇转化成N-Boc-L-亮氨醛；c)制备步骤(b)产物的氰醇；d)将所述氰醇腈转化成相应的羧酸；e)形成羧酸甲酯；f)纯化(2R，3S)-3-(N-Boc)氨基-2-羟基-5-甲基己酸甲酯；g)将步骤(f)产物与2，4-二甲氧基苯甲醛缩二甲醇缩合；h)将(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧基苯基)-4-异丁基-1-噁唑烷-5-甲酸甲酯转化成相应的羧酸。依据优选的实施方案，在步骤(a)中，将亮氨醇与Boc-酸酐反应，然后在DMSO/CH2Cl2溶剂中于-60℃以下温度使用草酰氯将其氧化成醛，用三乙胺中和所形成的酸，或者用次氯酸钠在-2--5℃将其氧化。步骤(c)的氰醇是通过用氰离子取代中间体1-羟基-2-(N-Boc)氨基-4-甲基戊磺酸盐的磺酸根而制得的。然后在步骤(d)中通过在浓盐酸中回流将所述氰醇水解成相应的羧酸。在步骤(e)中，通过在乙醚溶液中与重氮甲烷反应将(2R/S，3S)-3-(N-Boc)氨基-2-羟基-5-甲基己酸转化成相应的甲酯。在步骤(f)中，通过从环己烷或己烷/甲苯混合物中结晶来纯化非对映异构体(2R，3S)。步骤(g)是在用于除去所形成的甲醇的对甲苯磺酸吡啶鎓存在下在THF中进行的；该反应完成后，用碳酸氢盐将对甲苯磺酸吡啶鎓中和。在步骤(h)中，在甲醇/水混合物中用碳酸钾将酯水解。然后将该反应混合物酸化，并用二氯甲烷提取终产物。本专利技术还包括用于合成在13-位被N-Boc-β-异丁基丝氨酰残基取代的浆果赤霉素III和V衍生物的中间体的(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧基苯基)-4-异丁基-1-噁唑烷-5-甲酸。本专利技术新的紫杉烷表现出强的对抗乳腺、肺、卵巢、结肠、前列腺、肾、胰腺的癌细胞的抗癌活性，和抗对已知抗癌药物例如阿霉素、长春碱和铂衍生物有抗药性的细胞的抗癌活性。由此，本专利技术涉及药物制剂，其中包含有效量的本专利技术化合物和可药用载体以及赋形剂。更具体地说，可将本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
下述合成中间体：１４β－羟基浆果赤霉素Ⅲ或Ⅴ，１４β－羟基浆果赤霉素Ⅲ或Ⅴ１，１４－碳酸酯，１４－β－羟基－７－Ｔｅｓ－１０－去乙酰基浆果赤霉素Ⅲ或Ⅴ，１４－β－羟基－７－Ｔｅｓ－浆果赤霉素Ⅴ，１４－β－羟基－７－Ｔｅｓ－浆果赤霉素Ⅲ或Ⅴ１，１４－碳酸酯，（４Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－Ｂｏｃ－２－（２，４－二甲氧基苯基）－４－异丁基－１－噁唑烷－５－甲酸。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：E博姆巴德利，B加贝塔，A庞特罗里，
申请(专利权)人：因迪纳有限公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]