激肽释放酶7小分子抑制剂及其制备方法、用途技术

本发明专利技术公开了一种激肽释放酶7小分子抑制剂，其结构由式(I)表示。本发明专利技术还提供了该激肽释放酶7小分子抑制剂的制备方法。该激肽释放酶7小分子抑制剂可用于抑制激肽释放酶7的活性，制备治疗特应性皮炎的药物。也可以用于组成治疗特应性皮炎的药物组合物的有效成分，该药物组合物可以为外用膏剂或外用喷雾制剂。该抑制剂作为小分子抑制剂能有效抑制激肽释放酶7，具有应用于制备特应性皮炎的治疗药物的前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物化学领域，特别是指一种激肽释放酶7小分子抑制剂及其制备方法、用途。
技术介绍
特应性皮炎(AD)是一种广泛传播的慢性炎症性皮肤病，特点是干燥、鳞状皮肤、炎症、皮肤渗透性增加，AD病人的皮肤对环境中常见的而对正常人无害的因素也会很敏感从而易于受到表面感染。在过去的30年间工业化国家的特应性皮炎的发病率增长了2到3倍，据估计儿童的特应性皮炎患病率达到了15-30％，成人的特应性皮炎患病率达到了2-10％。由于发病机制的复杂性，对AD的发病机制了解得不多，但皮肤屏障功能紊乱已经被证实是AD发展过程中的关键因素之一。皮肤屏障的稳定依赖于颗粒层的角质形成细胞分化为角质细胞和皮肤表层角质细胞脱落(即脱屑)之间的平衡，皮肤的脱屑过程包括由(激肽释放酶)KLKs参与的桥粒的降解，由于桥粒是角质细胞的粘连蛋白，桥粒的降解则会导致角质细胞脱落而致皮肤脱屑。证据显示，局部或暂时性的KLKs活性控制的失调，是AD病人皮肤屏障稳定缺失的主要原因之一。KLKs(Kallikreins，激肽释放酶)是具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶特异性的丝氨酸蛋白酶，其编码基因定位于19q13.4，编码15个分泌型丝氨酸蛋白酶KLK1-KLK15。已经证明，KLKs存在于正常人的角质层细胞中，目前发现，至少有8种KLK(KLK5，KLK6，KLK7，KLK8，KLK10，KLK11，KLK13和KLK14)存在于人的角质层和汗液中。其中，KLK7占总量的40％。KLK7可能是皮肤损伤的一个关键酶，而且在AD病人中它可能参与一个系统性炎症反应，在AD的角质层KLK7升高最为突出，这提示KLK7在AD的发病机制上可能是至关重要的，因此，抑制KLK7的活性对于AD的治疗显得最为重要。LEKTI(Lympho-epithelialKazal-type-relatedinhibitor,淋巴上皮组织Kazal型相关蛋白抑制剂)是由SPINK5基因编码的丝氨酸蛋白酶抑制剂家族的成员，LEKTI前体包含一个信号肽和彼此隔开的15个丝氨酸蛋白酶抑制域(D1-D15)，表达后迅速被弗林蛋白酶水解为几个蛋白片段，其中包含D6-D9抑制域的LEKTI能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、KLK5和KLK7等酶的活性。LEKTI的内源靶至少包括KLK5、KLK7和KLK14，它们共同参与皮肤的脱屑过程。在AD病人，LEKTI表达水平严重降低，导致了KLK7活性的异常升高。尽管LEKTI是表皮内KLK7的天然抑制剂，但作为治疗AD的外用药，其不能透过皮肤角质层，同时由于其大分子蛋白质的特性也会导致其降解速度过快，因而将LEKTI作为外用药作用非常有限。并且，到目前为止，还没有一种有效的KLK7小分子抑制剂应用于临床。因此，如果能得到作为皮肤外用药的KLK7的小分子抑制剂，将有助于AD的治疗。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提出一种激肽释放酶7小分子抑制剂及其制备方法、用途，其作为小分子抑制剂能有效抑制KLK7，具有应用于制备特应性皮炎的治疗药物的前景。本专利技术通过以KLK7作为靶分子，根据KLK7的晶体结构，以及药效团模型进行分析与筛选，合成出具有KLK7抑制作用的小分子化合物，经实验验证，该化合物具有显著的抑制KLK7作用。基于上述目的本专利技术提供的激肽释放酶7小分子抑制剂的化合物结构由式(I)表示：基于相同的专利技术构思，本专利技术还提供了激肽释放酶7小分子抑制剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1)化合物(Ⅱ)溶解于70％-98％(质量分数)H2SO4中，滴加70％-98％(质量分数)H2SO4与50％-98％(质量分数)HNO3形成的混酸，控温30℃以下，反应4-6小时，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，过滤得化合物(Ⅲ)粗品，过柱分离得化合物(Ⅲ)；步骤2)向反应瓶中加入水，铁粉，5％-37％(质量分数)盐酸，控温80-100℃，分批加入化合物(Ⅲ)，反应2-3小时，以碳酸钠中和，过柱分离得化合物(Ⅳ)；步骤3)向反应瓶中加入化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺，再滴加丁二酰氯，室温反应1-3小时，过柱分离得化合物(Ⅴ)；步骤4)向反应瓶中加入化合物(Ⅴ)，四氢呋喃，在0℃下加入硼氢化钠，加毕，室温下反应4-5小时，过柱分离得化合物(Ⅵ)；步骤5)向反应瓶中加入化合物(Ⅵ)和85％(质量分数)磷酸，在140-180℃反应1-3小时，加入1％-20％(质量分数)氢氧化钠溶液游离出化合物(Ⅶ)，过柱分离得化合物(Ⅶ)；步骤6)中间体化合物(Ⅷ)的合成：向反应瓶中加入2,4-二甲基苯胺、乙醚、三乙胺，再滴加4-氯代丁酰氯，室温反应1-3小时，过柱分离得化合物(Ⅷ)；步骤7)反应瓶中加入化合物(Ⅶ)、化合物(Ⅷ)、甲苯、碳酸钾，回流反应3-4小时，过柱分离得化合物(I)。优选地，在步骤1)中，所述的混酸中H2SO4(折100％)与HNO3(折100％)的摩尔比为1:1。可选地，在步骤2)中，所述水(不含盐酸中的水)、铁粉、HCl(折100％)的摩尔比为20～30:2～5:0.1～0.5。可选地，在步骤3)中，所述化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺、丁二酰氯的摩尔比为0.5～2:3～6:1.5～3.5:0.5～2。可选地，在步骤4)中，所述化合物(Ⅴ)、硼氢化钠、四氢呋喃的摩尔比为1:0.1～1.0:50～300(摩尔比)，过柱分离得化合物(Ⅵ)。可选地，在步骤5)中，所述化合物(Ⅵ)、磷酸(折100％)的摩尔比是0.5～2:1～3。可选地，在步骤6)中，2,4-二甲基苯胺、乙醚、三乙胺、4-氯代丁酰氯的摩尔比为0.5～2:3～5:1～3:0.5～2。可选地，在步骤7)中，所述化合物(Ⅶ)、化合物(Ⅷ)、碳酸钾、甲苯的摩尔比为0.5～2:1～1.5:0.5～2:8～12。基于相同的专利技术构思，本专利技术还提供了上述激肽释放酶7小分子抑制剂的应用，即将所述激肽释放酶7小分子抑制剂用于抑制激肽释放酶7的活性，制备治疗特应性皮炎的药物。基于相同的专利技术构思，本专利技术还提供了一种治疗特应性皮炎的药物组合物，其中含有所述的激肽释放酶7小分子抑制剂作为有效成分。优选地，上述药物组合物为外用膏剂或外用喷雾制剂。从上面所述可以看出，本专利技术提供的激肽释放酶7小分子抑制剂及其制备方法、用途，该抑制剂为小分子抑制剂，避免了传统KLK7的天然抑制剂作为治疗AD的外用药时由于分子大而不能透过皮肤角质层、吸收慢降解快等问题，该小分子抑制剂合成方法简单，操作方便，吸收快，有效抑制KLK7，具有应用于临床特应性皮炎的治疗药物的制备前景。附图说明图1为本专利技术的实施例所涉及的激肽释放酶7小分子抑制剂的IC50曲线拟合图；图2为本专利技术的实施例所涉及的激肽释放酶7小分子抑制剂的核磁图。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本专利技术进一步详细说明。实施例1：激肽释放酶7小分子抑制剂的制备1.0mol化合物(Ⅱ)溶解于2.0mol浓H2SO4中，滴加1.0mol浓H2SO4与1.0mol浓HNO3形成的混酸，控温30℃以下，反应4小时，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，过滤得化合物(Ⅲ)粗品，过柱分离得化合物(Ⅲ)。向反应瓶中加入25mol水，3.0mol铁粉，0.3molHCl(氯化氢折100本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种激肽释放酶7小分子抑制剂，其特征在于，该小分子抑制剂的结构如式(Ⅰ)所示：

【技术特征摘要】
2015.11.04 CN 2015107413137;2015.11.04 CN 201510741.一种激肽释放酶7小分子抑制剂，其特征在于，该小分子抑制剂的结构如式(Ⅰ)所示：2.一种如权利要求1所述的激肽释放酶7小分子抑制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)化合物(Ⅱ)溶解于H2SO4中，滴加H2SO4与HNO3形成的混酸，控温30℃以下，反应4-6小时，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，过滤得化合物(Ⅲ)粗品，过柱分离得化合物(Ⅲ)；步骤2)向反应瓶中加入水，铁粉，HCl溶液，控温80-100℃，分批加入化合物(Ⅲ)，反应2-3小时，以碳酸钠中和，过柱分离得化合物(Ⅳ)；步骤3)向反应瓶中加入化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺，再滴加丁二酰氯，室温反应1-3小时，过柱分离得化合物(Ⅴ)；步骤4)向反应瓶中加入化合物(Ⅴ)，四氢呋喃，在0℃下加入硼氢化钠，加毕，室温下反应4-5小时，过柱分离得化合物(Ⅵ)；步骤5)向反应瓶中加入化合物(Ⅵ)和磷酸，在140-180℃反应1-3小时，加入氢氧化钠溶液游离出化合物(Ⅶ)，过柱分离得化合物(Ⅶ)；步骤6)中间体化合物(Ⅷ)的合成：向反应瓶中加入2,4-二甲基苯胺、乙醚、三乙胺，再滴加4-氯代丁酰氯，室温反应1-3小时，过柱分离得化合物(Ⅷ)；步骤7)反应瓶中加入化合物(Ⅶ)、化合物(Ⅷ)、甲苯、碳酸钾，回流反应3-4小时，过柱分离得化合物(I)。3.根据权利要求2所述的激肽释放酶7小分子抑制剂的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王芳宇，谭潇，王德平，严加林，何丽芳，周冬升，李玉林，
申请(专利权)人：衡阳师范学院，
类型：发明
国别省市：湖南;43