本发明专利技术涉及包含从选自由腔昆布、育叶网翼藻、网地藻、铜藻、展枝马尾藻及铁钉菜组成的组中的一种褐藻类提取及分离的多酚分馏物的诱导多能干细胞重编程用培养基组合物。并且，本发明专利技术涉及利用上述培养基组合物的诱导多能干细胞制备方法。若利用本发明专利技术的培养基组合物，则可通过利用间充质干细胞安全又容易且有效地制备诱导多能干细胞，制备的多能干细胞可分化成多种细胞，因此，可用作细胞治疗剂。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及制备包含从褐藻类提取的褐藻多酚(phlorotannin)分馏物的间充质干细胞的多能干细胞人工培养基组合物和利用其的诱导多能干细胞的方法。
技术介绍
干细胞(stem cell)作为可被分化成构成生物组织的多种细胞的细胞，是可从胎儿及成体的各个组织获得的被分化之前步骤的未分化细胞的总称。上述干细胞可通过多种方法分类。其中，最为普遍的方法中的一种基于分离干细胞的个体，上述干细胞可分为从胚胎(embry o)分离的胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES cell)和从成体分离的成体干细胞(adult stem cell)。其他普遍的分类基于干细胞的分化能力，上述干细胞可分为多能(pluripotency)、多分化能(multipotency)及单分化能(unipotency)干细胞。多能干细胞为具有均可被分化成构成生物体的三种胚层(germ layer)的多功能性的干细胞，通常，多功能干细胞为胚胎干细胞。成体干细胞可分为多分化能或单分化能干细胞。具有代表性的成体干细胞为间充质干细胞(MSCs，mesenchymal stem cells)和造血干细胞(HSCs，hematopoietic stem cells)。间充质干细胞分化成软骨细胞(chondroblast)、骨细胞(osteoblast)、脂肪细胞(adipocyte)、肌肉细胞(myocyte)、神经细胞(neurion)，造血干细胞分化成红细胞、白细胞、血小板等主要血液内的血细胞。成体干细胞可从骨髓、血液、大脑、皮肤等获得，因此存在很少的伦理问题，但是，与胚胎细胞相比，成体干细胞具有限定的分化能力(multipotency)。相反，多能干细胞均可被分化成构成生物体的三种胚层，由此，多能干细胞是指具有均可分化成人体的所有细胞或脏器组织的多功能性的干细胞，通常，多功能干细胞为胚胎细胞。胚胎细胞为具有可被分化成构成一个个体的所有组织的细胞的潜能的多功能干细胞，但是，在细胞制备过程中，存在胚胎的破坏等严重的伦理问题。为了解决上述问题，进行了用于通过使源自成体的细胞逆分化来制备与胚胎细胞类似的适当多功能细胞的多种方法。人类胚胎干细胞源自可变为人类生命体的胚胎，因此存在多种伦理问题，但是，与成体干细胞相比，人类胚胎干细胞具有优秀的细胞增殖及分化能力。成体干细胞可从骨髓、血液、大脑、皮肤等获得，因此存在很少的伦理问题，但是，与胚胎干细胞相比，成体干细胞具有限定的分化能力。作为代表性方法，具有细胞融合法(fusion with ES cell)、体细胞核移植法(somatic cell nuclear transfer)、特定因子注入法(reprog ramming by gene factor)等。细胞融合法因诱导的细胞还具有两对基因，由此在细胞的稳定性方面存在问题，体细胞核移植法存在需要大量卵子且效率极低的问题。而且，特定因子注入法是为了通过插入特定基因来诱导逆分化而利用包含致癌基因的病毒的方法，上述方法存在高的致癌危险，且因低效率和方法方面上的难度，而在细胞治疗剂开发可能性方面存在问题。为了成功且大量获得多能干细胞，在培养分离的源自脐带的单核细胞的步骤中的培养组合物极为重要，且需要进行通过高效率的诱导方法，以更多的量制备多能干细胞的研究。另一方面，在韩国公开专利第2009-0043115号中公开了利用褐藻类的腔昆布治疗或预防过敏性疾病的组合物，在韩国公开专利第2012-0126148号中公开了氧化染色用染毛剂组合物。本专利技术人利用腔昆布提取物成功开发了诱导多能干细胞逆分化用培养基组合物(韩国公开专利第2015-0050823号)。但是，尚未指出腔昆布提取物中的哪个成分具有诱导多能干细胞逆分化效果。通过上述
技术介绍
说明的事项仅是为了进一步理解本专利技术的背景，上述
技术介绍
相当于本专利技术所属
的普通技术人员所知道的现有技术。
技术实现思路
技术问题本专利技术人员为了安全性和生产效率高的细胞治疗剂开发的实用化，而寻找以高效率诱导多能干细胞的方法。结果，在向细胞培养基添加从作为安全的天然物质的褐藻类提取及分离的一部分化合物的情况下，确认了可利用间充质干细胞安全且高效地制备诱导多能干细胞，由此完成了本专利技术。因此，本专利技术的目的在于，提供用于将包含褐藻多酚分馏物的间充质干细胞(mesenchymal stem cell)重编程为诱导多能干细胞(ind uced pluripotency stem cell)的培养基组合物。本专利技术的再一目的在于，提供包括在包含褐藻多酚分馏物的培养基中，将间充质干细胞重编程为诱导多能干细胞的步骤的诱导多能干细胞的制备方法。本专利技术的另一目的在于，提供包含通过上述制备方法制备的诱导多能干细胞的细胞治疗用组合物。本专利技术的其他目的及优点通过以下专利技术的详细说明、专利技术要求保护范围及附图变得更加明确。解决问题的方案上述问题可通过包含褐藻多酚分馏物并用于将间充质干细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基组合物实现。优选地，上述褐藻多酚分馏物可以为由以下化学式1表示的二鹅掌菜酚化合物或其盐类物质。化学式1优选地，上述褐藻多酚分馏物可从选自由腔昆布(Ecklonia cava)、育叶网翼藻(Dictyopteris prolifera Okamura)、网地藻(Dictyota dich otoma Lamouroux)、铜藻(Sargassum horneri C.Agardh)、展枝马尾藻(Sargassum patens C.Agardh)及铁钉菜(Ishige okamurae Yendo)组成的褐藻类组中的一种褐藻类提取及分离或人工合成。并且，优选地，上述褐藻多酚分馏物可从腔昆布提取或分离。并且，优选地，上述褐藻多酚分馏物包含在选自由达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM，Dulbecco′s Modified Eagles Medium)、最小必需培养基(MEM，Minimal Essential Medium)、伊格尔基本培养基(BME，Basal Medium Eagle)、RPMI 1640、F-10、F-12、达尔伯克改良伊格尔培养基-F12(DMEM-F12)、α-最小必需培养基(α-MEM，α-Minimal Essential Medium)、G-最小必需培养基(G-MEM，Glasgo w′s Minimal Essential Medium)、依斯考夫改良达尔伯克培养基(IMD M，Iscove′s Modified Dulbecco′s Medium)、MacCoy′s 5A培养基、新型二代羊水培养基(AminoMaxⅡcomplete Medium)及间充质干细胞无血清培养基(MesenCult-XF Medium)组成的组中的培养基。优选地，以培养基组合物为基准，可包含10至500μg/ml的上述褐藻多酚分馏物。并且，优选地，上述培养基组合物可还包含1至10v/v％的能量水。并且，本专利技术的问题通过包括向细胞培养基添加褐藻多酚分馏物的步骤；以及在上述培养基，将间充质干细胞重编程为诱导多能干细胞的步骤的诱导多能干细胞的制备方法实现。优选地，上述褐藻多酚分馏物可以为由以下化学式1表示的二鹅掌菜酚化合本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于将间充质干细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基组合物，其特征在于，包含褐藻多酚分馏物。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.05.23 KR 10-2014-0062526;2015.05.21 KR 10-2011.一种用于将间充质干细胞重编程为诱导多能干细胞的培养基组合物，其特征在于，包含褐藻多酚分馏物。2.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，上述褐藻多酚分馏物为由以下化学式1表示的二鹅掌菜酚化合物或其盐类物质：化学式13.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，上述褐藻多酚分馏物从选自由腔昆布、育叶网翼藻、网地藻、铜藻、展枝马尾藻及铁钉菜组成的褐藻类组中的一种褐藻类提取及分离或人工合成。4.根据权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，上述褐藻多酚分馏物包含在选自由达尔伯克改良伊格尔培养基、最小必需培养基、伊格尔基本培养基、RPMI 1640、F-10、F-12、达尔伯克改良伊格尔培养基-F12、α-最小必需培养基、G-...
【专利技术属性】
技术研发人员：李尚燃，郑元珠，金浩彬，吴珉善，李桂浩，
申请(专利权)人：株式会社美合康生，
类型：发明
国别省市：韩国;KR
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