【技术实现步骤摘要】
201610325808
【技术保护点】
一种定量检测人血清I型胶原氨端肽的化学发光免疫分析试剂盒,其特征在于:该试剂盒内包含有预包被抗I型胶原氨端肽单克隆抗体的96孔板;I型胶原氨端肽抗原校准品;辣根过氧化物酶标记的抗I型胶原氨端肽抗体酶结合物;发光底物鲁米诺发光液;浓缩洗涤液和质控血清。
【技术特征摘要】
1.一种定量检测人血清I型胶原氨端肽的化学发光免疫分析试剂盒,其特征在于:该试剂盒内包含有预包被抗I型胶原氨端肽单克隆抗体的96孔板;I型胶原氨端肽抗原校准品;辣根过氧化物酶标记的抗I型胶原氨端肽抗体酶结合物;发光底物鲁米诺发光液;浓缩洗涤液和质控血清。2.如权利要求1所述一种定量检测人血清I型胶原氨端肽的化学发光免疫分析试剂盒,其特征在于所述抗I型胶原氨端肽单克隆抗体的制备,方法如下:1)将I型胶原氨端肽与佐剂混合腹腔注射BALB/C小鼠3次,每次间隔3周,取小鼠静脉血测免疫效价;取效价高的小鼠尾静脉注射加强免疫一次,三天后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞在聚乙二醇作用下细胞融合,一周后取细胞生长孔上清经ELISA测抗体分泌情况,将阳性分泌孔扩大培养;注射入BALB/C小鼠腹腔内,8-10天收集腹水。离心取腹水上清;2)量取腹水,加入2倍体积0.06M pH4.8乙酸盐缓冲液,每毫升腹水加入正辛酸35μl,室温搅拌30分钟,12000RPM离心30分钟;取上清,调pH7.4,加入45%体积饱和硫酸铵溶液,在4℃下搅拌60分钟,12000RPM离心20分钟,取沉淀溶于0.02M、pH7.4磷酸盐缓冲中,对0.02M、pH7.4磷酸盐缓冲液透析,换液5次;收集透析单...
【专利技术属性】
技术研发人员:李军,赵玉军,曾玲,于爽,白云鹏,申海燕,陈震,姚兰忠,
申请(专利权)人:北京北方生物技术研究所有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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