以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉的方法技术

本发明专利技术提供了一种以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉的方法，其特征在于，包括：将何首乌根洗净，切片，晒干，粉碎，将何首乌粉用水超声提取；将得到的提取液用化学纯的正丁醇在分液容器中萃取，得到含水溶性成分的提取物；将得到的含水溶性成分的提取物用醋酸乙酯溶解，点于层析用硅胶制备板上，晾干，展开，刮取紫色荧光色带，收集，将所得的收集物与乙醇溶液混合，超声溶解，过滤，真空减压回收乙醇，获得二苯乙烯苷纯品；冷冻干燥成白色无定型二苯乙烯苷冻干粉。本发明专利技术工艺流程少，稳定，操作简便，二苯乙烯苷含量明确，纯度高，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从何首乌药材中制备二苯乙烯苷(2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，简称二苯乙烯苷)冻干粉的制备方法，属于天然活性产物制备方法的

技术介绍
何首乌为蓼科植物何首乌(PolygonummultiflorumThunb)的干燥块根，是我国名贵中药材。按其炮制方法不同又有生首乌和制首乌之分。生首乌味苦、甘、涩，性平，具有润肠、解毒和截疟之功；制首乌味苦、甘、涩，性温，具有补肝、肾，益精血，壮筋骨，乌须发之效。何首乌主要含三类有效成分，二苯乙烯苷类，蒽醌类及聚合花青素。二苯乙烯苷是何首乌中主要有效成分，是一类具有显著药理活性的水溶性成分，其主要代表成分二苯乙烯苷，也是何首乌药材质量控制的成分。二苯乙烯苷主要生理功效为：1、抗衰老作用，2、醒脑益智提高记忆力作用，3、保肝作用，4、降血脂作用，5、舒张血管和抑制动脉粥样硬化作用，6、乌发作用。目前已知二苯乙烯苷类有四种结构类似的化合物，提取分离含量为98％以上难度大，现有技术中主要有聚酰胺分离法；高压液相制备分离法；乙醇提取碱调pH有机溶剂萃取再经酸化有机溶剂萃取法等。除高压液相制备分离法外，要获得二苯乙烯苷纯品较为困难。如以二苯乙烯苷四种结构类似的化合物为例，结构和溶解度等相差无几，所以获得操作简单，工艺步骤少，产品收率高，适合工业化生产的工艺流程，确实困难。二苯乙烯苷：分子式：C20H22O9，分子量：406.38结构式为：
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种制备高纯度二苯乙烯苷冻干粉的方法。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉的方法，其特征在于，包括：第一步：将何首乌根洗净，切片，晒干，粉碎为何首乌粉；第二步：将第一步得到的何首乌粉用水超声提取至少一次，过滤合并提取液；第三步：将得到的提取液用化学纯的正丁醇在分液容器中萃取至少一次，分出正丁醇萃取液，在水浴0～70℃下，用旋转蒸发器回收溶剂，得到含水溶性成分的提取物；第四步：将第三步得到的含水溶性成分的提取物用醋酸乙酯溶解，点于层析用硅胶制备板上，晾干，置于层析缸内用展开剂展开，取出，晾干，置波长为254nm的紫外灯下检视，刮取紫色荧光色带，收集，将所得的收集物与乙醇溶液混合，超声溶解，过滤，回收乙醇，获得二苯乙烯苷纯品；第五步：将第四步获得的二苯乙烯苷纯品用水溶解，置于冻干机内，冷冻成固体，抽真空将水分升华干燥成白色无定型二苯乙烯苷冻干粉。优选地，所述的第二步中，何首乌和水的用量比为1g∶10mL(W/V)，超声频率为40kHz-60kHz，超声功率为150w-200w，超声时间为20min-40min。优选地，所述的第三步中，提取液和正丁醇的体积比为1∶1。优选地，所述的第四步中，含水溶性成分的提取物和醋酸乙酯的体积比为1g∶10mL(W/V)。优选地，所述的第四步中的层析用硅胶制备板为GF254硅胶板，所用的展开剂为醋酸乙酯、甲醇和水的混合物，醋酸乙酯、甲醇和水的体积比为30∶2∶1。优选地，所述的第四步中的乙醇溶液的体积浓度为85％，收集物和乙醇溶液的比例为1g∶3mL(W/V)。优选地，所述的第四步中的超声溶解的温度为0-30℃，超声频率为40kHz-60kHz，超声功率为150w-200w，超声时间为5分钟。优选地，所述的第四步还包括：将二苯乙烯苷纯品和二苯乙烯苷对照品分别用醋酸乙酯溶解后，点于同一硅胶GF254板上，在波长为254nm的紫外灯下检视，在同一位置显相同的紫色斑点。优选地，所述的第三步中旋转蒸发器的压力为0.08Mpa。本专利技术利用二苯乙烯苷类和其他成分在溶剂中溶解度不同进行分离提纯。第一步用水除去脂溶性成分，分离获得60％极性较大的二苯乙烯苷成分；第二步正丁醇萃取获得水溶性80％以上的二苯乙烯苷成分；第三步经过硅胶薄层制备板层析分离获得98％以上的二苯乙烯苷成分，因为二苯乙烯苷水溶性较大难结晶，以及该成分对人体有特殊的生理作用，所以第四步极性大的二苯乙烯苷成分通过冷冻干燥，制备为冻干粉供临床制备制剂使用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：经过数次数公斤实验证明，本专利技术工艺流程少，稳定，操作简便，二苯乙烯苷含量明确，纯度高，适合工业化生产。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例1一种以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉的方法，具体步骤为：(1)将新鲜何首乌根5kg，洗净，切片，晒干，置粉碎机中粉碎为粗粉，约4kg；(2)将上述何首乌粉置于塑料桶中加入自来水超声提取，何首乌粉和水的用量比为1g∶10mL(W/V)，超声频率为40kHz，超声功率为150w，超声40分钟，每批次何首乌粉超声2次，过滤，合并提取液；(3)将提取液用化学纯的正丁醇在分液容器中进行萃取，提取液和正丁醇按1∶1的体积比例，共进行2次萃取，分出的正丁醇萃取液在水浴70℃、压力为0.08Mpa的条件下，用旋转蒸发器回收正丁醇，得到含水溶性成分的提取物；(4)将含水溶性成分的提取物用醋酸乙酯溶解，含水溶性成分的提取物和醋酸乙酯的体积比为1g∶10mL(W/V)，点于层析用硅胶制备板上(硅胶GF254板)，分布成带状，晾干，置于层析缸中，用展开剂(醋酸乙酯、甲醇和水的混合物，醋酸乙酯、甲醇和水的体积比为30∶2∶1)展开，取出，晾干，置波长为254nm的紫外灯下检视，刮取紫色荧光色带，收集于玻璃容器内，将所得的收集物与体积浓度为85％的乙醇溶液混合，收集物和乙醇溶液的比例为1g∶3mL(W/V)，超声溶解5分钟，超声频率为40kHz，超声功率为150w，温度50℃，过滤，减压蒸馏回收乙醇，获得二苯乙烯苷纯品，将二苯乙烯苷纯品和二苯乙烯苷对照品(中国食品药品检定研究院110844-201411)分别用醋酸乙酯溶解后，点于同一硅胶GF254板上，在波长为254nm的紫外灯下检视，在同一位置显相同的紫色斑点。(5)将获得的二苯乙烯苷纯品5g用10mL水溶解，置于实验型冻干机内，-20℃冷冻成固体，抽真空至真空度为-0.09MPa以将水分升华干燥成白色无定型二苯乙本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉的方法，其特征在于，包括：第一步：将何首乌根洗净，切片，晒干，粉碎为何首乌粉；第二步：将第一步得到的何首乌粉用水超声提取至少一次，过滤，合并提取液；第三步：将得到的提取液用化学纯的正丁醇在分液容器中萃取至少一次，分出正丁醇萃取液，在水浴0～70℃下，用旋转蒸发器回收溶剂，得到含水溶性成分的提取物；第四步：将第三步得到的含水溶性成分的提取物用醋酸乙酯溶解，点于层析用硅胶制备板上，晾干，置于层析缸内用展开剂展开，取出，晾干，置波长为254nm的紫外灯下检视，刮取紫色荧光色带，收集，将所得的收集物与乙醇溶液混合，超声溶解，过滤，回收乙醇，获得二苯乙烯苷纯品；第五步：将第四步获得的二苯乙烯苷纯品用水溶解，置于冻干机内，冷冻成固体，抽真空将水分升华干燥成白色无定型二苯乙烯苷冻干粉。

【技术特征摘要】
1.一种以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉的方法，其特征
在于，包括：
第一步：将何首乌根洗净，切片，晒干，粉碎为何首乌粉；
第二步：将第一步得到的何首乌粉用水超声提取至少一次，过滤，合并提取
液；
第三步：将得到的提取液用化学纯的正丁醇在分液容器中萃取至少一次，分
出正丁醇萃取液，在水浴0～70℃下，用旋转蒸发器回收溶剂，得到含水溶性成
分的提取物；
第四步：将第三步得到的含水溶性成分的提取物用醋酸乙酯溶解，点于层析
用硅胶制备板上，晾干，置于层析缸内用展开剂展开，取出，晾干，置波长为
254nm的紫外灯下检视，刮取紫色荧光色带，收集，将所得的收集物与乙醇溶液
混合，超声溶解，过滤，回收乙醇，获得二苯乙烯苷纯品；
第五步：将第四步获得的二苯乙烯苷纯品用水溶解，置于冻干机内，冷冻成
固体，抽真空将水分升华干燥成白色无定型二苯乙烯苷冻干粉。
2.如权利要求1所述的以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉
的方法，其特征在于，所述的第二步中，何首乌和水的用量比为1g∶10mL(W/V)，
超声频率为40kHz-60kHz，超声功率为150w-200w，超声时间为20min-40min。
3.如权利要求1所述的以水为溶剂从何首乌药材中制备二苯乙烯苷冻干粉
的方法，其特征在于，所述的第三步中，提取液和正丁醇的体积比为1∶1。
4.如权利要求1所述的以水为溶剂从...

【专利技术属性】
技术研发人员：卞俊，胡卫敏，赵晓光，黄斌，张优琴，唐大海，鲍蕾蕾，侯正松，刘明珠，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四一一医院，
类型：发明
国别省市：上海;31