一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统技术方案

本发明专利技术涉及一种激发液系统，通过在基础的激发液中添加一定浓度的组分，通过减少空白发光值，提高信号强度从而提高吖啶酯发光的信噪比，来满足诊断试剂临床检测的要求。本发明专利技术所需要的试剂简单，容易获得，通过大量实验表明其空白值很低，信噪比很高，适用范围广，具有很好的推广价值。

【技术实现步骤摘要】
一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统
本专利技术属于免疫分析范畴。具体涉及一种在磁化学发光技术中应用的激发液系统。
技术介绍
近年来，临床医学分析技术更新的速度可谓日新月异，放射免疫技术，酶联免疫技术，时间分辨技术，金标技术以及化学发光技术突飞猛进，近十年来，磁微粒化学发光技术以其自动化程度高，反应迅速，逐渐成为国内临床检测领域的主角，以吖啶磺酰胺为示踪物的化学发光免疫分析系统成为技术平台中重要的检测手段。吖啶磺酰胺(NSP-SA-NHS，SA)是一种化学发光免疫分析标记物质，该物质在含过氧化物的稀碱性溶液中能发出光子，从而建立起吖啶酯化学发光免疫分析系统。吖啶酯应用于化学发光检测的发光原理是：在碱性H2O2溶液中，分子受到过氧化氢离子进攻时，生成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N-甲基吖啶酮，当其回到基态时发出最大发射波长为430nm的光子。吖啶酯应用于化学发光检测具有许多优越性，表现为：①背景发光低，信噪比高；②发光反应干扰因素少；③光释放快速集中、发光效率高、发光强度大；④易于与蛋白质联结且联结后光子产率不减少；⑤标记物稳定(在2-8℃下可保存数月之久)。在吖啶酯发光过程中起激发作用的激发液系统是整个系统环节中关键的一个组分。现在，市场上的各试剂公司都有自己独特的激发液系统，质量千差万别，各不公开，本公司自行研制吖啶酯发光过程中的激发液系统，通过酸碱组分中各化学试剂适合的配比条件，最终完成了本专利技术。为了解决这样的问题，本专利技术通过添加一些化学试剂起到提高吖啶酯发光信噪比作用的激发液。本专利技术要解决的问题是：在以吖啶酯化学发光免疫分析中，通过减少空白对照发光值，提高信号强度从而提高吖啶酯发光的信噪比，来满足诊断试剂临床检测的要求。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是提供一种提吖啶酯发光信噪比的激发液系统。本专利技术的技术优势在于：(1)试剂简单容易获得。尤其主体溶液为氢氧化钾，硝酸和过氧化氢。(2)适用范围广，本专利技术激发液系统中已采用的多种化学试剂有替代选项，组分的信噪比较高，具有推广和应用价值。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术中激发液系统，质量千差万别，且信噪比较高的情况，提供一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统。本专利技术提供了一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统，包括预激发液和激发液，所述激发液系统包括：氢氧化钾、硝酸、过氧化氢尿素加合物、三丁基十六烷基溴化鏻、TRITONX-100，生理盐水。本专利技术所述的信噪比是指检测一定浓度吖啶酯的有效发光强度与空白发光强度的比值。优选的，所述预激发液组分包括：0.04Mol/L硝酸；0.106Mol/L过氧化氢尿素加合物。优选的，所述激发液组分包括：0.7Mol/L的氢氧化钾；0.0079Mol/L三丁基十六烷基溴化鏻；0.021Mol/LTRITONX-100，生理盐水。优选的，所述的激发液系统采用高压灭菌的去离子水或纯化水配制。优选的，所述生理盐水为质量百分比浓度为0.9％的医用氯化钠注射液。优选的，所述硝酸用0.04Mol/L盐酸代替。优选的，所述三丁基十六烷基溴化鏻用十二烷基三丁基溴化鏻或三丁基正十四烷基氯化膦代替。本专利技术进一步提供了一种检测试剂盒，所述试剂盒包含上述激发液系统。本专利技术进一步公开了所述的激发液系统在制备检测试剂盒中的应用。本专利技术进一步公开了所述的激发液系统在提高提高吖啶酯发光信噪比方面的应用。本专利技术进一步提供了上述激发液的用途，用于提高吖啶磺酰胺(SA)发光信号的信噪比。本专利技术激发液中所用化学试剂的纯度均为分析纯。附图说明图1过氧化氢尿素加合物浓度-SA/空白比值关系图图2三丁基十六烷基溴化鏻浓度-(S1～S5)/空白均值图图3本专利技术激发液系统测定吖啶磺酰胺(NSP-SA-NHS，SA)的时间动力学曲线具体实施方式下面结合附图对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。实施例1预激发液中过氧化氢尿素加合物浓度的选择预激发液：配制不同浓度的过氧化氢尿素加合物到0.04Mol/L硝酸溶液中。激发液：0.8Mol/L氢氧化钾溶液。吖啶磺酰胺(SA)：1×10-9Mol/L加样量：20微升。测定方式：100微升预激发液+100微升激发液，直接测量，空白和SA样本平行测定10孔。表1过氧化氢尿素加合物变化趋势结果表表中数据显示，过氧化氢尿素加合物浓度在0.106Mol/L附近时吖啶酯样本SA的发光值出现了一个峰值(此时SA/空白值最高，达到5071)，但随着过氧化氢尿素加合物的浓度进一步增加，发光值反而下降。所以过氧化氢尿素加合物的浓度选择峰值附近的浓度。因此，综合上述数据，我们选择过氧化氢尿素加合物浓度为0.106Mol/L。实施例2激发液中三丁基十六烷基溴化鏻浓度的选择激发液：在0.7Mol/L的氢氧化钾，添加0～0.0315Mol/L的三丁基十六烷基溴化鏻作为激发液，测定吖啶磺酰胺(SA)发光强度，选择合适的浓度。预激发液：0.04Mol/L硝酸，0.106Mol/L过氧化氢尿素加合物。S5-S1：不同浓度吖啶磺酰胺(SA)样本，浓度为：1×10-9Mol/L～1×10-13Mol/LS0为生理盐水。加样量：20微升。测定方式：100微升预激发液+100微升激发液，直接测量。表20.7Mol/L氢氧化钾浓度下不同浓度三丁基十六烷基溴化鏻的变化趋势结果从表2的测定结果可以看出，0.7Mol/L氢氧化钾浓度下三丁基十六烷基溴化鏻浓度为0.0079Mol/L时吖啶酯样本的发光值均最高，由S1-5/空白计算的比值及Sn/空白均值都明显高于其他浓度，说明此时激发液的信噪比最佳，所以选择0.0079Mol/L为三丁基十六烷基溴化鏻的添加浓度。实施例3激发液系统水质的选择激发液：0.7Mol/L的氢氧化钾，0.0079Mol/L三丁基十六烷基溴化鏻，0.021Mol/LTritonX-100。预激发液：0.04Mol/L硝酸，0.106Mol/L过氧化氢尿素加合物。配制分别采用下列不同水质：生理盐水：医用氯化钠注射液A——双蒸水B——双蒸水加0.9％氯化钠溶液C——纯水机制水不同浓度吖啶酯(SA)样本S5-S1：浓度为：1×10-9Mol/L～1×10-13Mol/LS0为生理盐水。加样量：20微升。测定方式：100微升预激发液+100微升激发液，直接测量。表3不同水质激发液的差异结果表从表3的测定结果可以看出，通过比较发现，生理盐水配制的激发液S1-5/空白比值及Sn/空白均值本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统，包括预激发液和激发液，其特征在于所述激发液系统包括：氢氧化钾、硝酸、过氧化氢尿素加合物、三丁基十六烷基溴化鏻、TRITONX-100，生理盐水。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高吖啶酯发光信噪比的激发液系统，包括预激发液和激发液，其特征在于所述激发液系统包括：氢氧化钾、硝酸、过氧化氢尿素加合物、三丁基十六烷基溴化鏻、TRITONX-100，生理盐水。


2.如权利要求1所述激发液系统，其特征在于所述预激发液组分包括：0.04Mol/L硝酸；0.106Mol/L过氧化氢尿素加合物。


3.如权利要求1所述激发液系统，其特征在于所述激发液组分包括：0.7Mol/L的氢氧化钾；0.0079Mol/L三丁基十六烷基溴化鏻；0.021Mol/LTRITONX-100，生理盐水。


4.如权利要求1-3任一权利要求所述的激发液系统，其特征在于，采用高压灭菌的去离子水或纯化水配制。


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【专利技术属性】
技术研发人员：白云鹏，吕东川，曾玲，
申请(专利权)人：北京北方生物技术研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11