诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了一种诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的组合物和方法，所述组合物包含：20-80 μM L-抗坏血酸-2-磷酸酯，2-10 ng/ml TGF β3，50-150 nM地塞米松，10-50 μg/ml维生素C，10-50 μg/ml脯氨酸， 0.5-5 μg/ml吲哚美辛，1×ITS+1premix，0.5-10 μg/ml的氯地孕酮酯。该组合物在用作培养基的诱导剂时，能够提高分化活性和分化定向性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学工程领域，更具体地涉及间充质干细胞向软骨诱导的组合物及诱导方法。
技术介绍
间充质干细胞是一类具有高度自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，具有很强的自我复制能力及多向分化潜能，在一定诱导条件下可定向分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞等，近年来作为种子细胞和细胞载体被广泛应用于软骨组织工程和基因治疗。目前采用间充质干细胞分化成软骨细胞的方法一般是将间充质干细胞培养至传代的间充质干细胞后，再在含有定向诱导为软骨细胞的因子的培养基中进行诱导培养，将间充质干细胞诱导成软骨细胞。但是由于间充质干细胞的定向诱导分化受很多不同信号通路的影响，而且诱导培养间充质干细胞的细胞微环境变化对于间充质干细胞诱导分化及其分子结构有着非常重要的影响。因此。导致现有的间充质干细胞分化成软骨细胞的方法所需周期都较长，通常需要2-4周，并且诱导后II型胶原的表达效率较低。举例而言，关节软骨因损伤而导致退变，甚至发生退行性骨关节炎，随着人口的老龄化骨关节炎的发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的组合物，该组合物包含：20‑80μM L‑抗坏血酸‑2‑磷酸酯，2‑10ng/ml TGFβ3，50‑150nM地塞米松，10‑50μg/ml维生素C，10‑50μg/ml脯氨酸，0.5‑5μg/ml吲哚美辛，1×ITS+1premix，0.5‑10μg/ml下式(I)所示的氯地孕酮酯，所述浓度是指在培养基中的浓度：

【技术特征摘要】
1.一种诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的组合物，该组合物
包含：20-80μML-抗坏血酸-2-磷酸酯，2-10ng/mlTGFβ3，50-150nM
地塞米松，10-50μg/ml维生素C，10-50μg/ml脯氨酸，0.5-5μg/ml
吲哚美辛，1×ITS+1premix，0.5-10μg/ml下式(I)所示的氯地孕酮
酯，所述浓度是指在培养基中的浓度：
2.根据权利1所述的组合物，该组合物包含：50μg/mlL-抗坏血
酸-2-磷酸酯，5ng/mlTGFβ3，100nM地塞米松，25μg/ml维生素C，
20μg/ml脯氨酸，2.5μg/ml吲哚美辛，1×ITS+1premix，1μg/ml式(I)
所示的氯地孕酮酯。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，该组合物还包含10-100
μM的β-甘油磷酸钠。
4.根据权利要求1或2所述的组合物，该组合物还包含50-200
μM雪莲和/或藏红花的提取物。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，该组合物用作培养
基或培养液的成软骨诱导剂。
6.根据权利要求5所述的组合物，所述培养基或培养液包括
DMEM培养液、α-MEM培养液中的任一种。
7.一种诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的方法，该方法包括：
在15ml尖底离心管中使用小球法诱导培养间充质干细胞，并且每隔
约24小时轻轻晃动离心管一次，使细胞球与管底分离，使用的诱导

\t分化培养基为高糖DMEM中加入权利要求1-3所述组成和浓度的组
合物。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，诱导分化培养时间为14-21
天。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其中，所述间充质干细胞
为脐带源间充质干细胞或骨髓间充质干细胞。
10.根据权利要求7或8所述的方法，该方法包括以下步骤：
1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：安沂华，董健伸，
申请(专利权)人：安沂华，
类型：发明
国别省市：北京;11