一种与糖尿病相关的分子标志物制造技术

本发明专利技术公开了一种与糖尿病相关的分子标志物，I型糖尿病患者血液中的KRT23基因呈高表达，通过检测患者血液中KRT23基因的表达水平可以判断患者是否患有I型糖尿病或患I型糖尿病的概率。本发明专利技术提供了一种特异、灵敏的实现I型糖尿病早期诊断的手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地涉及一种与糖尿病相关的分子标志物。
技术介绍
糖尿病是一种由胰岛素分泌缺陷和/或胰岛素作用障碍所致的常见、多发病，其患病率随着人民生活水平的提高、人口老龄化和生活方式的改变迅速增加。据世界卫生组织(WHO)估计，全球目前有超过1.5亿糖尿病患者，到2025年这一数字将增加一倍。我国现有糖尿病患者3千万，居世界第2位。糖尿病已成为发达国家中继心血管病和肿瘤之后的第三大非传染性疾病，对社会和经济带来沉重的负担，是严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。根据WHO和国际糖尿病联盟(IDF)专家组的建议，糖尿病可分为I型、II型、其他特殊类型及妊娠糖尿病四种。研究表明，I型糖尿病占糖尿病总发病人数的7％～10％，且近年来该病的发病率呈逐年上升趋势。糖尿病患者常伴有各种并发症或伴随症，糖尿病使前列腺癌以外的所有部位癌症的发生风险增加30％。在美国，亚洲受试者已知比非亚洲受试者有更高的患癌风险，特别是患肝癌和胃癌。这些癌症发展的倾向可能与外界致癌物质和由高血糖，高血脂和肾衰竭引起的异常代谢环境之间的相互作用有关。此外，糖尿病患者或有患糖尿病风险的个体有极高的患心血管疾病的风险，原因是代谢环境的变化包括氧化应激、轻度炎症、血管钙化和贫血，增加了血管损伤的风险。糖尿病的病因和发病机制较为复杂，至今尚未完全明了。目前认为I型糖尿病是一种在遗传与环境相互作用下，以T细胞介导的特异性胰岛β细胞自身免疫性破坏为主要发病机制的一种疾病。I型糖尿病具有多基因遗传背景，易感性十分复杂，疾病的发生是多种基因相互作用、相互影响的结果。近年来，随着对I型糖尿病相关基因的研究日趋深入，尽管已报道了一些与I型糖尿病的发生发展相关的基因，但是临床上并没有有效的基因标志物来诊断糖尿病，因此发现一种特异性的I型糖尿病标志物应用于临床诊断具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种与I型糖尿病相关的分子标志物-KRT23基因。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测KRT23基因表达水平的产品在制备诊断I型糖尿病工具中的应用。进一步，上面所提到的诊断产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测KRT23基因及其表达产物的表达水平以诊断I型糖尿病的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断I型糖尿病的产品至少包括一对特异扩增KRT23基因的引物；所述用实时定量PCR诊断I型糖尿病的产品至少包括一对特异扩增KRT23基因的引物；所述用免疫检测诊断I型糖尿病的产品包括：与KRT23蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断I型糖尿病的产品包括：与KRT23基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断I型糖尿病的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与KRT23蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与KRT23基因的核酸序列杂交的探针。进一步，所述用实时定量PCR诊断I型糖尿病的产品至少包括的一对特异扩增FAN1基因的引物序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。进一步，所述诊断产品包括芯片和/或试剂盒；其中所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒。所述基因检测试剂盒包括SYBRGreen聚合酶链式反应体系、用于扩增KRT23基因和管家基因的引物对；所述SYBRGreen聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBRGreen荧光染料。本专利技术提供了一种诊断I型糖尿病的工具，所述工具能够通过检测KRT23基因的表达水平来诊断I型糖尿病。进一步，上面所述工具包括芯片、或试剂盒。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测KRT23基因转录水平的针对KRT23基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的KRT23蛋白的特异性抗体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测KRT23基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括KRT23蛋白的特异性抗体。其中，所述基因检测试剂盒可用于检测包括KRT23基因在内的多个基因(例如，与I型糖尿病相关的多个基因)的表达水平；所述蛋白免疫检测试剂盒可用于检测包括KRT23蛋白在内的多个蛋白质(例如与I型糖尿病相关的多个蛋白质)的表达水平；所述基因芯片可用于检测包括KRT23基因在内的多个基因(例如，与I型糖尿病相关的多个基因)的表达水平；所述蛋白质芯片可用于检测包括KRT23蛋白在内的多个蛋白质(例如与I型糖尿病相关的多个蛋白质)的表达水平；通过将多个与I型糖尿病的标志物同时检测，可大大提高I型糖尿病诊断的准确率。所述固相载体包括无机载体和有机载体，所述无机载体包括但不限于有硅载体、玻璃载体、陶瓷载体等；所述有机载体包括聚丙烯薄膜、尼龙膜等。进一步，上面所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测KRT23基因表达水平过程中所需的试剂。优选地，所述试剂包括针对KRT23基因的引物和/或探针。进一步，所述扩增KRT23基因的引物对序列包括正向引物SEQIDNO.3和反向引物SEQIDNO.4。用于诊断I型糖尿病的样本来源包括但不限于血液、组织、尿液、唾液、脊髓液等。在本专利技术的具体实施方案中，用于诊断I型糖尿病的样本来源是血液。本专利技术中与KRT23基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。本专利技术中所述KRT23蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述KRT23蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰，例如，嵌合抗体、scFv、Fab、F(ab’)2、Fv等。只要所述片本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测KRT23基因表达水平的产品在制备诊断I型糖尿病工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测KRT23基因表达水平的产品在制备诊断I型糖尿病工具中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过RT-PCR、
实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测KRT23基因的表达水平以诊断
I型糖尿病的产品。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用RT-PCR诊断I型糖尿病
的产品至少包括一对特异扩增KRT23基因的引物；所述用实时定量PCR诊断I型
糖尿病的产品至少包括一对特异扩增KRT23基因的引物；所述用免疫检测诊断I
型糖尿病的产品包括：与KRT23蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断I
型糖尿病的产品包括：与KRT23基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断I
型糖尿病的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与KRT23蛋白
特异性结合的抗体，基因芯片包括与KRT23基因的核酸序列杂交的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断I型
糖尿病的产品至少包括的一对特异扩增FA...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖枫，杨承刚，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11