本发明专利技术为前列腺癌的诊断提供了一种新的分子标志物miR-628-3P，并将该分子标志物应用于制备诊断前列腺癌的诊断试剂盒中，miR-628-3P在前列腺癌患者血清中的含量比在正常人血清中的含量升高，而在患者接受手术后，其血清中的miR-628-3P含量回落到正常水平，本发明专利技术还提供了一种诊断前列腺癌的诊断试剂盒。使用该分子标志物及含有该分子标志物的诊断试剂盒诊断前列腺癌，操作简单、取材方便、安全无创伤，且具有高特异性、高灵敏性和易于大量筛查的特点，该分子标志物特别适合应用于前列腺癌高危人群的筛选、前列腺癌的鉴定、前列腺癌治疗状况的监测、前列腺癌指导用药的监测、和前列腺癌预后监测等领域用试剂中。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术为前列腺癌的诊断提供了一种新的分子标志物miR-628-3P，并将该分子标志物应用于制备诊断前列腺癌的诊断试剂盒中，miR-628-3P在前列腺癌患者血清中的含量比在正常人血清中的含量升高，而在患者接受手术后，其血清中的miR-628-3P含量回落到正常水平，本专利技术还提供了一种诊断前列腺癌的诊断试剂盒。使用该分子标志物及含有该分子标志物的诊断试剂盒诊断前列腺癌，操作简单、取材方便、安全无创伤，且具有高特异性、高灵敏性和易于大量筛查的特点，该分子标志物特别适合应用于前列腺癌高危人群的筛选、前列腺癌的鉴定、前列腺癌治疗状况的监测、前列腺癌指导用药的监测、和前列腺癌预后监测等领域用试剂中。【专利说明】前列腺癌分子标志物m i R-628-3P及其应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种前列腺癌分子标志物miR-628-3P及其在制备诊断前列腺癌试剂中的应用，尤其涉及前列腺癌分子标志物miR-628-3P在前列腺癌高危人群的筛选、前列腺癌的鉴定、前列腺癌治疗状况的监测、前列腺癌指导用药的监测、和前列腺癌预后监测等领域用试剂中的应用。
技术介绍
MicroRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链微小RNA分子，其在细胞内具有多种重要的调节作用。每个miRNA可以有多个靶基因，而几个miRNA也可以调节同一个基因。这种复杂的调节网络既可以通过一个miRNA来调控多个基因的表达，也可以通过几个miRNA的组合来精细调控某个基因的表达。据推测，miRNA调节着人类三分之一的基因。MicroRNA因其高度的保守性、时空特异性、稳定性以及组织特异性等特点使其优于蛋白质、DNA片段等其他生物标志物而在疾病发病机制研究、早期诊断、个体化治疗和预后等方面发挥越来越重要的作用。前列腺癌患者主要是老年男性，一般在50岁以后发病，95%发生于60岁以上的老年男性，发生率持续地随年龄增长而增加。在美国，前列腺癌的发病率已经超过肺癌，成为第一位危害男性健康的肿瘤。中国等亚洲前列腺癌的发病率远远低于欧美国家，但近年来呈现上升趋势。前列腺癌早期多无任何症状，即使有所不适，也不足以引起病人的重视。当肿瘤增大压迫尿道时，又往往与前列腺增生相混淆。在我国约80%的病人首先发现远处转移病灶，然后才发现前列腺癌。此时，病变已属晚期，预后不良。目前，前列腺癌的临床诊断方式主要有以下几种:直肠指检、血清前列腺特异性抗原(PSA)检测、直肠超声波检测、活组织病理检查等。直肠指检是最简单、最经济实用的方法，主要是通过医生的食指触摸前列腺，用以发现很多无症状的前列腺癌患者，有可能获得早期诊断及根治的机会。但上述方法均存`在一定的局限性。如直肠指检的局限性是:(1)当患者的前列腺肿块不大时，容易漏诊；(2)有的患者前列腺癌肿大不明显，但已属晚期，不易根治；(3)对患者有一定的不适和危害，当患者直肠有疾患时不能使用此检测；(4)当医生经验不足时有漏诊或误诊可能。正常情况下血液中的PSA不高(不高于4ng/ml)，当处于前列腺癌及其他前列腺疾病患病状态时PSA升高，成为目前筛查前列腺癌最敏感的瘤标，但其也存在一定局限性:(1)需要取血检测，对患者有一定的损伤；(2)PSA增高也常见于非前列腺癌疾病，如前列腺炎症、前列腺肥大等，因此不易确诊；(3) PSA增高确诊前列腺癌时，往往患者已属中、后期，达不到早期诊断的目的。前列腺超声波检测操作简便直观、无损伤，通过显示肿块的大小、数目、位置、密度、边缘、形态、有无钙化以及钙化的形态、大小、数目、分步以及周围的晕环、皮肤改变等提供定位及定性征象并判断病变的性质:其局限性是:(1)对致密性的小癌灶容易漏诊；(2)有时不能提供明确的定性诊断；(3)因其不能显示肿瘤的内部结构及周围组织所以诊断符合率很低；(4)对一些缺乏典型征象的实性良恶性肿块有较高的误诊率。活组织病理检查因其创伤性、复杂性不能作为初筛的手段，但它是前列腺癌确诊的金标准，一般与其他方法技术连用。近年来的研究表明，前列腺癌和miRNA密切相关，它们可能参与肿瘤的发生、发展和转移，所以对肿瘤的发病机制、早期诊断、个体化治疗、转移的检测和预后等可能有相应的作用。与前列腺癌相关的miRNA种类较多且作用不一，已有研究表明在前列腺癌患者中上调的 miRNA 包括 miR-375，miR_148a，miR-200c, miR-106a, mir-128, miR-218, miR_20a，和 miR-30b 等；下调的 miRNA 包括 miR-143, miR-145, miR-199a_5p，miR-223, miR_27a，miR-152和miR-424等。虽然已在该领域进行了一些研究，但现有的miRNA标志物的准确性、灵敏性方面均有不足，在临床和研究中仍然存在寻找更加准确和灵敏的前列腺癌miRNA标志物的需求。
技术实现思路
为了克服上述现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种与前列腺癌相关的新的前列腺癌分子标志物，并提供了该分子标志物在制备诊断前列腺癌试剂中的应用。该前列腺癌的分子标志物为miR-628_3P,其核苷酸序列为5’ -UCUAGUAAGAGUGGCAGUCGA -3’ (SEQ ID NO:1)。在研究过程中专利技术人发现，miR-628_3P 在前列腺癌患者血清中的含量比正常人血清中的含量高，而当前列腺癌患者在接收手术后，其血清中的miR-628-3P的含量就回落到与正常人血清中的含量一样的正常水平。由此可见，患者在患病期间增加的miR-628-3P与前列腺癌的肿瘤存在着密切的相关性。在上述发现的基础上，本专利技术提供了一种前列腺癌分子标志物，以及该分子标志物在制备诊断前列腺癌试剂中的应用。本专利技术为了解决其技术问题所采用的技术方案是:—种前列腺癌分子标志物miR-628_3P,其核苷酸序列为SEQ ID N0.1所不的序列，为 5， - UCUAGUAAGAGUGGCAG UCGA -3，。所述的前列腺癌分子标志物miR-628-3P在制备诊断前列腺癌试剂中的应用在于，所述诊断前列腺癌试剂通过检测被试者血清中miR-628-3P的含量，并将该miR-628_3P含量与正常水平miR-628-3P含量相比较来诊断前列腺癌。所述被试者血清中miR-628-3P的含量通过定量PCR方法进行检测。所述前列腺癌分子标志物miR-628_3P用于制备诊断前列腺癌的诊断试剂盒。所述的诊断前列腺癌的诊断试剂盒包括:(I)血清总RNA提取试剂，(2) RNA 加 polyA 试剂，(3) RT-PCR 试剂，(4)定量 PCR 试剂；其中所述定量PCR试剂中包括所述前列腺癌分子标志物miR-628_3P的特异性正向引物(即GSP外源对照-3)，该特异性正向引物的核苷酸序列为SEQ ID N0.7所示的序列，为 5， - UUGAGCAACGCGAACAAAUCA-3，。所述诊断试剂盒中血清总RNA提取试剂中包括核苷酸序列为SEQ ID N0.2的外源对照-1，为 5’ - CAACCTCCTAGAAA GA -3’。所述诊断试剂盒中RNA加polyA试剂中包括核苷酸序列为SEQ ID N0.3的外本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种前列腺癌分子标志物miR?628?3P，其特征在于：所述前列腺癌分子标志物miR?628?3P的核苷酸序列为SEQ?ID?NO.1所示的序列。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：范盘生，夏东元，蒲金贤，
申请(专利权)人：苏州博泰安生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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