一种分子标志物在口腔鳞状细胞癌诊断和治疗中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种分子标志物在口腔鳞状细胞癌诊断和治疗中的应用，所述生物标记物为GDPD2，通过qPCR实验发现，GDPD2基因在口腔鳞状细胞癌组织和细胞中表达下调，GDPD2基因过表达可以抑制细胞的增殖和降低癌细胞的侵袭率。本发明专利技术提供了GDPD2的促进剂在口腔鳞状细胞癌诊治中的应用，同时本发明专利技术还公开了一种抑制细胞增殖的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种分子标志物在口腔鳞状细胞癌诊断和治疗中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种分子标志物在口腔鳞状细胞癌诊断和治疗中的应用，具体的该分子标志物为GDPD2。
技术介绍
口腔鳞癌是口腔部位及周边最为常见的恶性肿瘤，其发病率占到口腔部位肿瘤总发病率的80％以上，是值得引起人们高度关注和重视的恶性疾病之一。虽然在欧美等发达国家口腔鳞癌的发病率有所下降，但在全世界范围内发病率仍然呈现上升趋势。近年来随着医疗水平的不断提高，许多恶性肿瘤的治疗方面取得了不小的进步，通过治疗提高了患者的5年生存率。但在口腔鳞癌的治疗方面，由于此疾病的发生早期不易被患者察觉等特殊性，致使该疾病的治疗滞后，癌症晚期的治疗难度加大。因而有必要加大对口腔鳞癌治疗的关注度，寻找出口腔鳞癌的更好的治疗方法。口腔鳞癌的治疗方面，常规的治疗方法包括手术治疗、放射治疗、化学治疗、免疫治疗等。这些治疗方法虽然在一定程度上会抑制肿瘤的发生发展，但又存在较大的治疗弊端。例如放疗、化疗会不可避免的引起严重副反应而手术治疗存在操作不易进行等特点，单纯手术治疗无法根治肿瘤等方面的缺陷。免疫治疗的疗效并不明显。而基因治疗和分子靶向治疗为近年来新兴的肿瘤治疗手段，由于其副反应小、疗效确切等方面的优势得到了科研工作者的青睐。分子靶向治疗是指在细胞分子水平上，调控肿瘤相关基因、干预肿瘤异常的信号通路或阻断能量通路，寻找可干预的分子靶点对口腔鳞癌的靶向治疗具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种用于口腔鳞状细胞癌诊断和治疗的生物标志物。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了GDPD2基因或其表达产物的用途，用于制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品。进一步，所述产品包括通过通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法检测GDPD2基因和/或其表达产物的变化。进一步，所述核酸扩增技术选自聚合酶链式反应、逆转录聚合酶链式反应、转录介导的扩增、连接酶链式反应、链置换扩增和基于核酸序列的扩增。本专利技术提供了一种诊断口腔鳞状细胞癌的产品，所述产品能够通过检测样本中GDPD2基因基因和/或其表达产物的变化来诊断口腔鳞状细胞癌。进一步，所述产品包括芯片、试剂盒或制剂。进一步，所述产品包括芯片、试剂盒或制剂。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测GDPD2基因转录水平的针对GDPD2基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的GDPD2蛋白的特异性抗体或配体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测GDPD2基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括GDPD2蛋白的特异性抗体或配体。本专利技术所述的基因芯片或基因检测试剂盒可用于检测包括GDPD2基因在内的多个基因(例如，与口腔鳞状细胞癌相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白芯片或蛋白免疫检测试剂盒可用于检测包括GDPD2蛋白在内的多个蛋白质(例如与口腔鳞状细胞癌相关的多个蛋白质)的表达水平。将口腔鳞状细胞癌的多个标志物同时进行检测，可大大提高口腔鳞状细胞癌诊断的准确率。本专利技术提供了GDPD2基因在制备治疗口腔鳞状细胞癌的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括GDPD2基因和/或其表达产物的促进剂。进一步，所述促进剂包括GDPD2基因表达产物、促进型miRNA、促进型转录调控因子、或促进型靶向小分子化合物本专利技术提供了一种抑制细胞增殖的方法，所述方法为向培养体系中加入GDPD2基因、蛋白或其促进剂。本专利技术提供了一种组合药物，所述组合药物包括上述的药物组合物、和含抗肿瘤剂的药物组合物。进一步，抗肿瘤剂的药物组合物包括但不限于免疫治疗剂如西妥昔单克隆抗体，化学治疗剂或化学放射性治疗剂如卡波铂或者是一种相关类别的铂类药物、紫杉烷或者是一种类别的紫衫烷，或者是两者。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了分子标志物GDPD2与口腔鳞状细胞癌发生发展相关，通过检测受试者GDPD2的变化，可用于口腔鳞癌的诊断。本专利技术提供了一种治疗口腔鳞状细胞癌的分子手段，通过改变口腔鳞癌的分子靶标的表达从而干预或者抑制口腔鳞状细胞癌。附图说明图1显示利用QPCR检测GDPD2基因在口腔鳞状细胞癌组织中的表达情况；图2显示利用QPCR检测GDPD2基因在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达情况；图3显示利用QPCR检测GDPD2基因在口腔鳞状细胞癌中的转染情况；图4显示MTT法检测GDPD2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖活性的影响；图5显示利用transwell小室检测GDPD2基因对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭的影响。具体的实施方式本专利技术经过广泛而深入的研究，通过大量筛选，首次发现了在口腔鳞状细胞癌中GDPD2呈现特异性低表达。实验证明，通过特异提高GDPD2的表达平或表达产物的活性，能够有效地抑制口腔鳞状细胞癌的生长和侵袭，从而达到抑制口腔鳞状细胞癌的效果。在此基础上完成本专利技术。GDPD2蛋白是一种甘油磷酸二酯磷酸二酯酶，用于水解甘油磷酸肌醇产生1-磷酸肌醇和甘油。该蛋白在成骨分化和生长中起着重要的作用。可用于本专利技术的GDPD2多核苷酸或蛋白(多肽)序列包括各种来源和物种的GDPD2，并且包括野生型、突变型的GDPD2，或其活性片段。在本专利技术的一些实施方案中，所述GDPD2来源于人类，一种代表性的人GDPD2的编码序列或氨基酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。编码GDPD2的成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。本专利技术还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本专利技术有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码多肽的功能。本专利技术还涉及与上述的序列杂交的核酸片段，包括正义和反义的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码GDPD2蛋白的多核苷酸。本专利技术的人GDPD2核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据已公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的本文档来自技高网...

【技术保护点】
GDPD2基因或其表达产物的用途，其特征在于，用于制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品。

【技术特征摘要】
1.GDPD2基因或其表达产物的用途，其特征在于，用于制备诊断口腔鳞状细胞癌的产品。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法检测GDPD2基因和/或其表达产物的变化。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述核酸扩增技术选自聚合酶链式反应、逆转录聚合酶链式反应、转录介导的扩增、连接酶链式反应、链置换扩增和基于核酸序列的扩增。4.一种诊断口腔鳞状细胞癌的产品，其特征在于，所述产品能够通过检测样本中GDPD2基因和/或其表达产物的变化来诊断口腔鳞状细胞癌。5.根据权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，任静，程城，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11