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一种中肋骨条藻的检测方法技术

技术编号:15516007 阅读:106 留言:0更新日期:2017-06-04 07:11
本发明专利技术提供一种中肋骨条藻的检测方法,设计了三对LAMP引物FIP、BIP、LF、LB、F3和B3,其中FIP为5’端生物素标记引物,LF为5’端异硫氰酸荧光素FITC标记探针,配制含三对引物和样品模板的LAMP反应体系步骤,对LAMP反应体系进行扩增,然后用LFD试纸条检测,并随后进行了灵敏度和特异性评价。本发明专利技术具有比现有传统技术PCR检测中肋骨条藻的方法更高的特异性、灵敏度、实用性及便捷性,可以在实际野外现场应用,有利于检测和控制中肋骨条藻的爆发,提前做好预防。运用本发明专利技术的方法对有害藻类中肋骨条藻的检测,能有效的预防有害藻类中肋骨条藻发生大规模赤潮,这对保护我国海洋及水产养殖具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种中肋骨条藻的检测方法
本专利技术属于有害藻类检测
,具体涉及一种有害藻类中肋骨条藻Skeletonemacostatum的检测方法。
技术介绍
中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)是在我国普遍出现的近岸性硅藻,是我国常见的赤潮种,由中肋骨条藻引起的赤潮在我国曾发生过多次,在我国东海近海中肋骨条藻一般从初春到夏末均能形成生长高峰和爆发赤潮。检测中肋骨条藻的传统分子手段消耗大量的人力物力,难以快速的进行中肋骨条藻的鉴定。现阶段,用于检测中肋骨条藻的方法主要通过显微镜观察其形态学特征。但由于中肋骨条藻个体微小,很难进行样品处理及观察,这需要实验人员具备丰富的经验。因此,需要找到一种更快,更方便,更适合中肋骨条藻的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种快速检测有害藻类中肋骨条藻的检测方法,以实现对中肋骨条藻进行安全、特异、快速、灵敏、简单的现场快速检测,从而弥补现有传统检测技术的不足。本专利技术首先提供一种检测中肋骨条藻的环介导等温扩增引物组,包含有以下的引物:F3引物SC-F3:5′-TGGGGGAAACGTTTAGTGG-3′(SEQIDNO:1)、B本文档来自技高网...
一种中肋骨条藻的检测方法

【技术保护点】
一种LAMP引物组,其特征在于,所述的引物组包含有:F3,序列为TGGGGGAAACGTTTAGTGG、B3,序列为CCCGAAGGTTCCTACCACT、FIP,序列为CGAGCACAGAGTGACTGACCTCTTCGGAGTGAGTGCCCAC、BIP,序列为TACCCCGTCTTGAAACACGGACACGCATATCAGTTTGCCACT、LF,序列为GCCCGATCCAGGATATGAAGA、LB,序列为GGAGTCTAACATATGTGCAAGTACG。

【技术特征摘要】
1.一种LAMP引物组,其特征在于,所述的引物组包含有:F3,序列为TGGGGGAAACGTTTAGTGG、B3,序列为CCCGAAGGTTCCTACCACT、FIP,序列为CGAGCACAGAGTGACTGACCTCTTCGGAGTGAGTGCCCAC、BIP,序列为TACCCCGTCTTGAAACACGGACACGCATATCAGTTTGCCACT、LF,序列为GCCCGATCCAGGATATGAAGA、LB,序列为GGAGTCTAACATATGTGCAAGTACG。2.如权利要求1所述的引物组,其特征在于,所述的FIP的序列为CGAGCACAGAGTGACTGACCTCTTCGGAGTGAGTGCCCAC。3.如权利要求1所述的引物组,其特征在于,所述的BIP的序列为TACCCCGTCTTGAAACACGGACACGCATATCAGTTTGCCACT。4.如权利要求1或2所述的引物组,其特征在于,所述的FIP的5′端用生物素标记。5.如权利要求1或3所述的引物组,其特征在于,所述的LF的5′端用FITC标记。6.权利要求1所述的引物组在检测中肋骨条藻中的应...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱鹏黄海龙严小军高威芳
申请(专利权)人:宁波大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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