一种采用生物技术利用毕赤酵母和酿酒酵母为表达载体的酶的生产方法技术

本发明专利技术公开了一种采用生物技术利用毕赤酵母和酿酒酵母为表达载体的酶的生产方法。所述的步骤是：1.克隆基因:从天然的产木质素过氧化物酶、产猛过氧化物酶、产漆酶的天然菌株中克隆过氧化物酶、猛过氧化物酶和漆酶基因；2.获得构建表达载体的启动子，重组序列，信号肤，转录终止子序列和抗性基因序列；3.分别构建含这三种基因表达框架的毕赤酵母表达载体和酿酒酵母表达载体；4.通过电转化方法将以上构建的毕赤酵母表达载体转化毕赤酵母；5.分别发酵以上构建的毕赤酵母工程菌和酿酒酵母工程菌生产重组混合木质素过氧化物酶、猛过氧化物酶和漆酶。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物技术方法，特别涉及，属于生物技术

技术介绍
木质素过氧化物酶(Lignin Peroxidase, LiP),猛过氧化物酶(Manganese Peroxidase, ΜηΡ)和漆酶(Laccase)具有共同降解木质素的作用。植物资源不断再生，十分丰富。植物的基本成分是纤维素、半纤维素和木质素。其中在制造沼气和乙醇业中有用的成分是纤维素，次之是半纤维素。前者基本成分是葡萄糖，而后者的基本成分是戊糖。这些糖都是转化为乙醇和沼气的物质。木质素是一种广泛存在于植物体中的无定形的、分子结构中含有氧代苯丙醇或其衍生物结构单元的芳香性高聚物。它形成纤维支架，具有强化木质纤维的作用。纤维素分子之间被木质素镶嵌，被镶嵌着的纤维素不能被水解。要利用纤维素，必须先将木质素水解。木质素过氧化物酶，猛过氧化物酶和漆酶具有共同水解木质素的功能。木质素降解酶不仅应用于植物原料的生产乙醇和生产沼气行业，还广泛应用于造纸行业和环境保护等行业。有些天然的微生物具有表达木质素过氧化物酶，猛过氧化物酶和漆酶的能力，目前工业生产上是以天然的产菌株进行发酵生产这三种酶。但是，由于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种采用生物技术利用毕赤酵母和酿酒酵母为表达载体的酶的生产方法，其特征在于：所述的方法包括如下步骤：（1）克隆基因:从天然的产木质素过氧化物酶、产猛过氧化物酶、产漆酶的天然菌株中克隆过氧化物酶、猛过氧化物酶和漆酶基因；（2）获得构建表达载体的启动子，重组序列，信号肤，转录终止子序列和抗性基因序列；（3）分别构建含这三种基因表达框架的毕赤酵母表达载体和酿酒酵母表达载体,载体上的启动子是磷酸甘油醛脱氢酶基因的启动子序列,载体上其它元件还有6418抗性基因和氨节青霉素抗性基因序列,引导载体重组于毕赤酵母基因组或酿酒酵母基因组的同源序列,大肠杆菌复制起点；（4）通过电转化方法将以上构建的毕赤酵母表达载...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：哈尔滨达济仁科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23