本发明专利技术公开了一种愈创木烷型倍半萜类化合物及其制备方法和应用。制法：(1)取热毒宁注射液成品，经HP-20大孔吸附树脂柱色谱分离，依次以水、30％乙醇、90～100％乙醇梯度洗脱，分别收集各洗脱液，浓缩，得到90～100％乙醇洗脱部位；(2)90～100％乙醇洗脱部位，依次经硅胶柱色谱，Sephadex LH-20柱色谱，ODS柱色谱分离，半制备液相HPLC分离，得到本发明专利技术的新化合物。本发明专利技术所述化合物可用于治疗手足口病。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，特别涉及从现有中成药制剂中提取的愈创木烷型倍半 萜类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
热毒宁注射液（国药准字Z20050217)为江苏康缘药业股份有限公司自主研发的 原中药二类新药，其处方为青蒿、金银花、栀子，辅料为聚山梨酯80。热毒宁注射液在外感风 热所致感冒、流感、咳嗽、上呼吸道感染等疾病的临床治疗中应用广泛，其作用迅速、效果显 著。 研究人员在热毒宁注射液中发现了新的化学成分，并且发现此化合物在各个批次 的热毒宁注射液中均稳定存在。经查阅文献可知，这是首次在热毒宁注射液中发现并鉴定 出的新的化学成分，并经过Scifinderscholar检索发现该化合物为新化合物。
技术实现思路
本专利技术从热毒宁注射液中制备提取出一种具有生物活性的愈创木烷型倍半萜类 化合物，并提供了其在制备治疗手足口病药物中的应用。 具体地说，本专利技术提供了一种新的愈创木烷型倍半萜类化合物，其结构如（I)所 示： 本专利技术还提供了上述化合物的制备方法，包括如下步骤： (1)取热毒宁注射液成品，经HP-20大孔吸附树脂色谱柱分离，依次以水、30%乙 醇、90~100 %乙醇梯度洗脱，分别收集各洗脱液，减压浓缩至无醇味，得到水洗脱部位、 30%乙醇洗脱部位、90~100%乙醇洗脱部位； ((2)取步骤（1)的90~100%乙醇洗脱部位，经硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇梯 度洗脱，以氯仿-甲醇体积比为95 : 5的洗脱液洗脱3~5BV，洗脱液合并，标记为馏分A， 馏分A经SephadexLH-20柱色谱分离，氯仿-甲醇等体积、等度洗脱，去除色素带后，收集馏 分，标记为A-2,馏分A-2经0DS柱色谱分离，用甲醇-水梯度洗脱，其中甲醇浓度为50%~ 70%，收集甲醇-水体积比为3 : 2的馏分A-2-2,馏分A-2-2经半制备液相分离，得到本发 明化合物。 上述制备方法中，步骤（2)所述半制备液相色谱，以比例为25 : 75的乙腈-水为 流动相，检测波长为208与220nm，流速4mL/min，柱温为常温。在半制备液相上，本专利技术化 合物的保留时间分别为31. 2min。 专利技术人通过理化性质和现代波谱学手段（UV、IR、MS、⑶、1H-NMR、13C-NMR和 2D-NMR)对分离得到的化合物进行了结构鉴定，证实其为结构如式I所示的愈创木烷型倍 半萜类化合物。 本专利技术的另一个目的在于提供一种图（I)所示化合物在制备治疗手足口病药物 中的应用。专利技术人发现本专利技术化合物对手足口病EV71病毒有一定的抑制作用。 本专利技术的再一个目的在于提供一种药物组合物，包含上述图（I)所示化合物。 本专利技术还提供了一种治疗手足口病的药物组合物，含有治疗有效量的上述图（I) 化合物以及一种或多种药学上可接受的载体。【附图说明】 图 1 为化合物的HR-ESI-Q-T0F-MS 图2为化合物的1H-NMR谱 图3为化合物的13C_NMR谱和DEPT-135谱 图4为化合物的1H」HCOSY谱 图5为化合物的HMBC谱 图6为化合物的N0ESY谱 图7为化合物的⑶谱 图8为化合物的HSQC谱 图9为化合物的结构式【具体实施方式】 为了使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合具体实施例对 本专利技术作进一步的详细说明。 实施例1本专利技术化合物的制备 (1)取热毒宁注射液成品，经HP-20大孔吸附树脂色谱柱分离，依次以水、30%乙 醇、95%乙醇梯度洗脱，分别收集各洗脱液，减压浓缩至无醇味，得到水洗脱部位、30 %乙醇 洗脱部位、95%乙醇洗脱部位； (2)取步骤（1)的90~100 %乙醇洗脱部位，经硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇 梯度洗脱，以氯仿-甲醇体积比为95 : 5的洗脱液洗脱3~5BV，洗脱液合并，标记为馏分A7.8g，馏分A经SephadexLH-20柱色谱分离，氯仿-甲醇等体积、等度洗脱，去除色素带后， 收集馏分，标记为A-25. 4g，馏分A-2经ODS柱色谱分离，用甲醇-水梯度洗脱，其中甲醇浓 度为50%~70%，收集甲醇-水体积比为3 : 2的馏分A-2-285mg，馏分A-2-2经半制备液 相分离，得到本专利技术化合物。 所述半制备液相HPLC分离，是以25 : 75的乙腈-水为流动相，检测波长为208 与220nm，流速4mL/min，在半制备液相上本专利技术化合物的保留时间分别为31. 2min。分离所 得溶液干燥，得到本专利技术化合物4. 9mg。 实施例2本专利技术化合物的结构鉴定 本专利技术化合物为黄色无定性固体，ESI-MS(positive)给出m/z323 + ; ESI-MS(negative)给出 345 ，提示化合物分子量为 300。HR-ESI-Q-T0F-MS给出 m/z299. 1497(计算值为299. 1495)(图1)，确定化合物分子式为C15H2406,计算不饱和 度为5。本专利技术化合物的1H-NMR(600MHz，inra30D)谱（见图2)，显示了高场区4个甲基 信号，其中3个甲基也呈现单峰，表明其与季碳直接相连；1个呈现d峰，表明其与叔碳直接 相连。13C-NMR(100MHz，inCD30D)结合DEPT-135谱（见图3)共显示15个碳信号，包括4 个甲基，3个亚甲基，2个次甲基，以及6个季碳信号。综合以上NMR数据和不饱和度信息，可以推测化合物可能为1个倍半萜类化 合物，结构中含有4个甲氧基、2个环、1个酮羰基和1个双键。根据HSQC谱（见图8)，对化 合物的碳氢信号进行了归属。根据HMBC(见图5)相关峰H-15/C_3,4,5和H-2/C_l，3,5,推出α，β-不饱和环 戊酮的结构片段。1H-1!!COSY实验中（见图4)，可见H-8/H-9/H-10，H-10/CH3-14的相关峰， 结合H-6/C-l，4,5,7 的HMBC远程相关；CH3-14/C-1，10,9 和H-8/C-7,9,10 的HMBC远程相 关，构建环庚烷的结构片段。两个单峰甲基CH3-12和CH3-13与C-7和C-11均具有HMBC远 程相关，推测结构中含有片段c。在已经推定的3个结构片段中，我们可以发现1，5,7碳原 子为公用碳，从而将其连接为1个愈创木烷型的倍半萜骨架，结合分子式C15H2406，确定结构 中还存在3个羟基及1个过氧羟基根据1位碳的化学位移为δ94. 0,确定过氧羟基的连接 位置为1当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一个愈创木烷型倍半萜类化合物，其结构如(I)所示： 。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，姚新生，李海波，于洋，王振中，姚志红，戴毅，高昊，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。