结合158P1D7蛋白的抗体药物偶联物(ADC)制造技术

本文描述了结合158P1D7蛋白及其变体的抗体药物偶联物(ADC)。158P1D7在正常成人组织中显示组织特异性表达，并在表1所列癌中异常表达。因此，本发明专利技术的ADC提供一种治疗癌症的治疗组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合158P1D7蛋白的抗体药物偶联物(ADC)相关申请的交叉引用本申请要求2012年8月23日提交的美国临时专利申请号61/692,448的优先权。其内容通过引用全文纳入本文。联邦资助研究下完成的专利技术的权利声明无。以ASCII文本文件提交序列表下述以ASCII文本文件提交的内容通过引入全文纳入本文：序列表的计算机可读形式(CRF)(文件名：511582005088SeqList.txt，记录日期：2013年8月21日，大小：40,154字节)。
本专利技术涉及结合158P1D7蛋白的抗体、结合片段及其抗体药物偶联物(ADC)。本专利技术进一步涉及用于治疗表达158P1D7的癌症的预后、预防和治疗方法以及组合物。技术背景癌症是仅次于冠状动脉疾病的导致人类死亡的第二主要病因。全球每年有上百万人死于癌症。根据美国癌症协会(AmericanCancerSociety)所报道，仅在美国，癌症引起的死亡每年超过五十万人，并且每年新增确诊病例超过一百二十万。虽然由心脏病引起的死亡已显著下降，但由癌症引起的死亡总体呈上升趋势。预计到下世纪早期，癌症将成为主要死因。全球有数种癌症明显成为主要杀手。特别是肺癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌和膀胱癌代表了癌症死亡的主要原因。这些癌症以及几乎所有其它癌症共有一个常见致死特性。癌的转移性疾病是致命的，很少有例外。此外，即使那些患者最初在原发性癌中存活下来，但一般经验表明他们的生活发生极大改变。许多癌症患者经历由于顾虑到可能会复发或治疗失败导致的严重焦虑。许多患者在治疗后经历身体虚弱。此外，许多癌症患者会经历复发。前列腺癌在全球男性最常见癌症中位居第四。在北美和北欧，前列腺癌无疑是男性中最常见的癌症并且是男性癌症死亡的第二主要原因。仅在美国，每年超过30,000男性死于该疾病，仅次于肺癌。虽然这些数据惊人，但仍没有对转移性前列腺癌的有效治疗。前列腺手术切除、放疗治疗、激素去除治疗、手术阉割和化疗仍为主要治疗方法。不幸的是，这些治疗对许多人没有功效并且经常与不良后果相关联。在诊断前沿，缺乏可确切检测早期局部肿瘤的前列腺癌标记物仍然极大限制该疾病的诊断和处理。虽然血清前列腺特异性抗原(PSA)试验已经是很有用的工具，但广泛认为其在几个重要方面上缺乏特异性和总体实用性。通过小鼠中产生可再现不同疾病分期的前列腺癌异种移植，改善了在前列腺癌其它特异性标记物鉴定方面的进展。LAPC(洛杉矶前列腺癌)异种移植物是一种已在重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠中存活传代的前列腺癌异种移植物，并显示模拟从雄激素依赖性转为雄激素非依赖性的能力(Klein等,1997,Nat.Med.3:402)。近来鉴定的前列癌标记物包括PCTA-1(Su等,1996,Proc.Natl.Acad.Sci.USA93:7252)、前列腺特异性膜抗原(PSMA)(Pinto等,ClinCancerRes1996年9月2日(9):1445-51)、STEAP(Hubert,等,ProcNatlAcadSciUSA.1999年12月7日；96(25):14523-8)和前列腺干细胞抗原(PSCA)(Reiter等,1998,Proc.Natl.Acad.Sci.USA95:1735)。虽然先前所鉴定的标记物(例如PSA)促进了对诊断和治疗前列腺癌的努力，但仍需要鉴定其它的前列腺癌和相关癌症的标记物和治疗靶标来进一步改善诊断和治疗。美国在2000年出现了估计130,200例结直肠癌，其中包括93,800例结肠癌和36,400例直肠癌。结直肠癌是男性和女性中第三大常见癌症。发生率在1992年至1996年期间显著下降(每年-2.1％)。研究显示，这些下降是由于增加筛查和息肉切除，其防止息肉发展为浸润性癌。2000年估计出现56,300例死亡(47,700例结肠癌，8,600例直肠癌)，占所有美国癌症死亡人数的约11％。目前，外科手术是最常见的结直肠癌治疗形式，而且对尚未扩散的癌症经常是治愈性的。癌已使肠壁严重穿孔或已经扩散至淋巴结的患者大多数在术前或术后接受化疗或化疗加放疗。结肠造口术(做腹部开口来清除机体排泄物)有时为结肠癌所需，但直肠癌很少有此需要。仍然需要针对结直肠癌的有效的诊断和治疗方法。在美国所有新增癌症病例中，膀胱癌在男性中约为5％(第五大最常见肿瘤)且在女性中约为3％(第八大最常见肿瘤)。发病率正缓慢上升，与年长人群的增长相一致。1998年估计有54,500例，其中包括男性39,500例和女性15,000例。在美国按年龄调整的发病率就男性而言为每100,000人中32例，女性为每100,000人中8例。历史上的男性/女性3:1比例可能发生下降，该下降与女性吸烟行为有关。1998年估计有11,000例膀胱癌引起的死亡(男性7,800例和女性3,900例)。膀胱癌的发生率和死亡率随年龄大幅上升，而且随着人口老龄化该问题将日益严重。大多数膀胱癌在膀胱中复发。控制膀胱癌的方法是联用经尿道切除膀胱(TUR)和膀胱内化疗或免疫治疗。膀胱癌的多病灶和复发特性表明TUR的局限。大多数肌肉浸润性癌症不能仅通过TUR治愈。根治性膀胱切除术和尿流改道术是去除癌的最有效方法但对泌尿和性功能具有不可否认的影响。仍然非常需要有益于膀胱癌患者的治疗方法。2000年估计有164,100例新增肺癌和支气管癌，占所有美国癌症诊断的14％。肺癌和支气管癌的发病率在男性中显著下降，从1984年的每100,000人中86.5例的高点下降之1996年的70.0例。二十世纪90年代，女性中的上升率开始变慢。1996年，女性中的发生率是每100,000人中42.3例。2000年肺癌和支气管癌导致估计156,900人死亡，在所有癌症死亡中占28％。1992年至1996年期间，肺癌在男性中的死亡率显著下降(每年-1.7％)而在女性中的死亡率仍然显著上升(每年0.9％)。1987年以来，每年死于肺癌的女性多于死于乳腺癌的女性，而乳腺癌是40年来女性癌症死亡的主要原因。肺癌发生率和死亡率下降最可能的原因是过去30年里吸烟率下降；然而女性中吸烟行为的减少滞后于男性。重要的是，虽然成人烟草使用下降已减慢，但年轻人的烟草使用再次上升。通过癌症的类型和分期来决定对肺癌和支气管癌的治疗选择，该治疗选择包括外科手术、放疗和化疗。对于许多局部癌，通常将外科手术作为治疗选择。因为该疾病常在发现时已有扩散，经常需要将放疗和化疗与外科手术联用。小细胞肺癌的治疗选择是单独使用化疗或联用化疗和放疗；该方案中，较大比例的患者得到缓解，其在一些情况下会长时间持续。然而持续需要肺癌和支气管癌的有效治疗以及诊断方法。2000年期间美国女性中预期发生估计182,800例乳腺癌新增浸润性病例。另外，2000年预期诊断大约1,400例男性乳腺癌新增病例。在二十世纪80年代每年约4％的上升之后，女性的乳腺癌发生率在二十世纪90年代稳定至每100,000人中约110.6例。仅在美国，2000本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗体药物偶联物，其包含与单甲基澳瑞他汀E(MMAE)偶联的抗体或抗原结合片段，所述抗体或片段包含由SEQ ID NO:7中第1位Q至第120位S范围的氨基酸序列组成的重链可变区和由SEQ ID NO:8中第1位D至第113位R范围的氨基酸序列组成的轻链可变区。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.08.23 US 61/692,4481.一种抗体药物偶联物，其包含结合158P1D7蛋白的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段通过接头与单甲基澳瑞他汀E(MMAE)的一个或多个单元偶联，所述抗体或其抗原片段包含由SEQIDNO:7中第1位至第120位范围的氨基酸序列组成的重链可变区和由SEQIDNO:8中第1位至第113位范围的氨基酸序列组成的轻链可变区。


2.如权利要求1所述的抗体药物偶联物，所述抗体包含由SEQIDNO:7中第1位至第466位范围的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:8中第1位至第219位范围的氨基酸序列组成的轻链。


3.一种抗体药物偶联物，其包含结合158P1D7蛋白的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段通过接头与单甲基澳瑞他汀E(MMAE)的一个或多个单元偶联，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区由以美国典型培养物保藏中心(ATCC)登录号PTA-13102保藏的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞所生产抗体的重链可变区的氨基酸序列组成，所述轻链可变区由以ATCC登录号PTA-13102保藏的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞所生产抗体的轻链可变区的氨基酸序列组成。


4.如权利要求3所述的抗体药物偶联物，所述抗体包含重链和轻链，所述重链由ATCC登录号PTA-13102保藏的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞所生产抗体的重链氨基酸序列组成，所述轻链由ATCC登录号PTA-13102保藏的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞所生产抗体的轻链氨基酸序列组成。


5.如权利要求1或3所述的抗体药物偶联物，所述抗原结合片段是Fab、F(ab′)2、Fv、Fd、dAb或scFv。


6.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，所述抗体是全人抗体。


7.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中所述抗体或其抗原结合片段是重组生产的。


8.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中该抗体药物偶联物包含每个抗体或其抗原结合片段1-10个MMAE单元。


9.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中该抗体药物偶联物包含每个抗体或其抗原结合片段2-5个MMAE单元。


10.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中该接头包含缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)。


11.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，所述抗体药物偶联物具有以下结构：



其中，L代表抗-158P1D7抗体或其抗原结合片段，p的范围为1到10。


12.如权利要求11所述的抗体药物偶联物，其中p的范围为2-5。


13.如权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中所述抗体或其抗原结合片段通过式-Aa-Ww-Yy的接头单元连接至MMAE，其中-A-是延伸单元，a是0或1；-W-是氨基酸单元，w是0-12的整数；且-Y-是自分解型间隔单元，y是0、1或2。


14.如权利要求13所述的抗体药物偶联物，其中所述延伸单元具有以下式I的结构；所述氨基酸单元是Val-Cit；且所述间隔单元是具有以下式II的结构的PAB基团：





15.如权利要求14所述的抗体药物偶联物，其中所述延伸单元与抗体或其抗原结合片段的硫原子形成键；且所述间隔单元通过氨基甲酸酯基团连接至MMAE。


16.一种药物组合物，其以人用单位剂量形式包含治疗有效量的权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物和药学上可接受的赋形剂。


17.如权利要求16所述的药物组合物，所述药物组合物用于治疗成胶质细胞瘤、肺癌、膀胱癌或乳腺癌。


18.如权利要求16所述的药物组合物，所述药物组合物与放疗或化疗剂联合给予。


19.如权利要求16所述的药物组合物，其进一步包含化疗剂。


20.权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗对象的膀胱癌。


21.权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗对象的膀胱癌，所述对象还接受放疗。


22.权利要求1-4中任一项所述的抗体药物偶联物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗对象的膀胱癌，所述对象还接受化疗剂。


23.一种抗158P1D7抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区中各互补决定区(CDR)由SEQIDNO:7中所示重链可变区中据Kabat编号系统确定的CDR氨基酸序列组成，所述轻链可变区中各CDR由SEQIDNO:8中所示轻链可变区中据Kabat编号系统确定的各CDR氨基酸序列组成。


24.如权利要求23所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·K·莫里森，Z·安，K·J·M·莫里森，J·斯尼德，X·贾，
申请(专利权)人：艾更斯司股份有限公司，西雅图基因公司，
类型：发明
国别省市：美国;US