用于治疗溶血性疾病的旁路途径特异性抗体制造技术

本发明专利技术提供了一种在有需要的受试对象中治疗溶血性紊乱的方法，该方法包括向所述的受试对象给药治疗有效量的抗体，该抗体与旁路途径C3转化酶的成分结合，并选择性地抑制专门由该旁路途径产生的C3a,C5a,C3b,C5b和C5b-9而不抑制经典途径产生C3a,C5a,C3b,C5b和C5b-9的任何能力。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】用于治疗溶血性疾病的旁路途径特异性抗体 相关申请 本申请要求2012年10月4日提交的美国临时专利申请系列的优先权，该文献的 内容以引用方式全文并入本文。
技术介绍
补体系统可以通过3个不同的酶级联活化，它们称为"经典途径"、"凝集素/MBL" 和"旁路途径"（分别为CP、MBL和AP)。本专利技术不讨论MBL。经典途径负责帮助宿主抵抗抗 原，从而防止细胞被感染。凝集素途径为经典途径的变体。在补体活化的引发剂为经典途 径（"AP放大环"）的情况下，目前认为旁路途径形成了总补体活性的80-95%。在发现补 体成分呈现升高状态的多种疾病迹象中旁路途径本身被活化。 存在3种"旁路途径特异性蛋白质"：因子B、D和P，它们在以下过程中起主要作 用：a)旁路途径的起始和传播；和b)通过旁路途径放大环的经典途径的传播。蛋白质C3 和C3b (补体系统中重要的参与者）对于所有经典和旁路补体途径而言都是普通的。尽管 C3可以为一种类型，但是由于每种C3转化酶不同，所以产生3种不同类型的C3b。AP C3转 化酶由PC3bBb组成，而经典的C3转化酶由不同的蛋白质构成。因此，很难相信切割都将是 一致的，从而产生相似的C3b分子。结果，由旁路途径产生的C3b不同于通过经典途径产生 的 C3b〇 经典途径（CP)由抗原-抗体复合物起始。CP过程涉及多种蛋白质，例如C1Q, Clr/ Cls，C4和C2。CP C3转化酶由C3bC4b2a组成。该复合物可以将C3切割成C3b和C3a。该 C3b由经典途径转化酶衍生得到，并且通常是多种病原体和细菌的调理作用所必需的。抑制 该C3b是不理想的。C3b包被的细胞通过各种细胞上存在的补体受体而除去。 2种补体途径均独立地产生C3a, C3b, C5a, C5b, C5b-9和sC5b-9作为补体活化副产 物。 在由旁路途径活化而引发的经典途径过程中，经典途径C3转化酶还将C3切割成 C3b，其可以独立于旁路途径工作，并且在Ca 2+/Mg2+离子存在下，在1 %正常人类血清中完全 放大经典途径。经典途径C5转化酶可以切割C5,从而生成C5a和C5b。随后，C5b插入至 细胞的脂质双层中，从而起始C5b-9或sC5b-9的形成。 在旁路途径活化中，补体系统产生的C3b可以与备解素和因子B结合，从而形成复 合物"PC3bB"。然后，在该复合物内，因子D将因子B切割成Bb和Ba。该切割使得Ba由复 合物中释放，并形成AP转化酶PC3bBb。PC3bBb将C3切割成C3a和C3b，由此为了旁路途 径的利益而使旁路途径的放大环延续。然后，PC3bBb可以将C5切割成C5b和C5a。接着， C5b分子可以插入至细胞的脂质双层中，并形成用于MAC沉积的核。 此外，经典途径还可以起始一部分旁路途径（称为放大环）的传播。在放大环内， C3b与解备素和因子B结合，从而形成复合物"PC3bB"。然后，在复合物内因子D将因子B 切割成Bb和Ba。这种切割使得Ba由复合物中释放，并形成AP转化酶PC3bBb。PC3bBb将 C3切割成C3a和C3b，从而延续放大环。 因此，C3b为补体系统的成分和副产物，而与补体途径活化的类型无关。在AP放 大的过程中，当PC3bBb(AP C3转化酶）生成越来越多的量的C3b时，放大环被建立，这样旁 路途径的活化可以继续。此外，经典途径还可以生成C3b，其可以与因子B结合，并由此参与 旁路途径（即使引发剂是CP介导的）。这允许更多的C3b沉积在靶物上，这将导致AP活化 的放大环增强。 将新形成的C3b加入至现有的AP C3转化酶PC3bBb中会生成AP C5转化酶。将 新形成的C3b加入至现有的CP C3转化酶中会生成CP C5转化酶。2种C5转化酶都具有 切割C5而产生C5b和C5a的能力。补体活化结果所产生的终末复合物被称为MAC复合物 (也称为C5b-9或sC5b-9)，其负责受试对象中细胞的溶解。C3a和C5a都是有力的过敏毒 素，其造成血小板、嗜中性粒细胞和单核细胞的活化。结果，释放炎性细胞，例如弹性蛋白 酶，TNF-a，IL-1，VEGF和过氧化物。C5b-9/sC5b-9的形成造成造成在"其他疾病"中可见 的组织损伤和组织损害/组织损伤。 经典补体途径的活化提供了对抗潜在病原体的宝贵的首要防御，并可以生成C3a/ C3b，C5a/C5b和C5b-9/sC5b-9。因此，经典途径的加重可以产生大量的补体副产物。如别 处所述，C3a和C5a为有力的过敏毒素，C3b介导调理作用，而C5b负责所需的病原体的杀 灭。在此，C3a和C5a都生成有利的应答，并被产生用于杀灭入侵者。需要该途径用于宿主 的防御，因此必须不被抑制。 在Mg++离子中，但不具有钙离子，旁路途径的活化仅保证AP活化。在疾病状态下， 该途径独立于经典途径被活化。无需该途径用于宿主的防御，因此可以完全被抑制。 专利技术概述 本专利技术所述的实施方案涉及抗体，其用于防止造成血管外溶血的C3b和造成血管 内溶液的C5b-9的形成。本专利技术进一步涉及治疗遭受紊乱的受试对象的方法，其中所述的 紊乱涉及红细胞和血小板通过血管内和血管外途径溶血。此外，本专利技术还涵盖了对抗补体 攻击的嗜中性粒细胞、单核细胞、血小板和T淋巴细胞的保护。这由所要求的一类抗体来完 成，其中所述的抗体阻断了 C3b在细胞上和C5b-9在细胞上的形成和沉积，其中所述的细胞 为GPI锚定蛋白缺陷的。 本申请概括了一组补体抑制剂单克隆抗体，该抗体防止形成旁路途径衍生的C3b 和C5b-9的形成。尤其在本申请中，将这些抗体成为一类。尽管在旁路途径内这些抗体结 合不同的靶物，但是它们具有独特的特征，它们都抑制旁路途径生成的C3b (称为"C3b"）， 但不抑制经典途径生成的C3b。 在攻击下除去细胞导致血细胞减少症，这取决于细胞类型一中性粒细胞减少症， 单核细胞减少症，血小板减少症，淋巴细胞减少症和白细胞减少症。因此，由所要求的一 类单克隆抗体抑制AP活化可以防止受试对象（人类）的血细胞减少症。血细胞减少症通 常可见于血液学紊乱中，例如阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH)，特发性血小板减少性紫 癜（ITP)，血栓性血小板减少性紫癜（TTP)，溶血性尿毒症综合征（HUS)，弥散性血管内凝 血〇)IC)，抗磷脂综合征（APS)，输血后紫癜，新生儿同种免疫性血小板减少症（NAITP)。 所要求的一类抗体能够防止血细胞减少症、细胞活化、细胞功能紊乱、炎症、血管外溶血、血 管内溶液和组织损害。 经典和旁路途径在活化时均产生C3b分子。尽管2种C3b命名是相同的，但是是 不同的。在PNH中，旁路途径而非经典途径产生的C3b分子与红细胞，嗜中性粒细胞，单 核细胞，血小板和T淋巴细胞结合。这种结合导致此类细胞通过血管外溶血而被清除。通 过血管外溶血除去导致血细胞减少症，以及胆红素和LDH水平增加。C5b-9(也称为MAC)沉 积在细胞膜上，并导致诸如红细胞和血细胞之类的无核细胞溶解。之前已经报告C3b沉积 和C5b-9沉积的清除证据。红细胞溶解导致LDH水平增加，网织红细胞计数增加以及红细 胞中血红蛋白水平降低。 在PNH中，我们发现C3b和C5b-9与无本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在有需要的受试对象中治疗溶血性紊乱的方法，该方法包括向所述的受试对象给药治疗有效量的抗体，该抗体与旁路途径C3转化酶的成分结合，并选择性地抑制专门由该旁路途径产生的C3a,C5a,C3b,C5b和C5b‑9而不抑制经典途径产生C3a,C5a,C3b,C5b和C5b‑9的任何能力。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·班赛尔，
申请(专利权)人：诺沃姆德治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国;US