编码纤维素酶的基因制造技术

技术编号:10938486 阅读:132 留言:0更新日期:2015-01-21 18:55
本发明专利技术提供了编码热稳定纤维素酶并指导其升高表达的多核苷酸序列,以及热稳定纤维素酶在水力压裂方法和返排液处理中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】编码纤维素酶的基因 相关申请 本申请依据35U.S.C. § 119(e)要求于2012年3月30日提交的美国临时申请 61/618, 610和2012年9月21日提交的美国临时申请61/704, 368的优先权,所述每一份临 时申请均通过援引全文纳入本文。
提供了编码纤维素酶的多核苷酸序列。具体地,所述多核苷酸序列可以提供特定 的、热稳定的、耐热的、压力稳定的酶如纤维素酶的增加的表达。 序列表 如MPEP § 502. 05中授权并阐述,本申请经由USPTO EFS-WEB服务器电子提交,该 电子提交包括电子提交的序列表;这份序列表的全部内容通过援引纳入本申请的说明书 中。在电子提交的ASCII (.txt)文本文件上该序列表被标示为如下:

【技术保护点】
SEQ ID NO:1的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.03.30 US 61/618,610;2012.09.21 US 61/704,3681. SEQ ID NO :1的核苷酸序列。2. 权利要求1所述的核苷酸序列,其中所述序列编码蛋白质。3. 编码来源于海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的纤维素酶的核苷酸序列,其包含 至少一个选自 T6C、T9C、T15G、A22C、G24T、A33C、A39C、A40C、A42C、A54C、A57C、T66C、G81A、 A84C、A6C、G6C、A9C、G9C、A15G、C15G、T22C、G22C、A24T、C24T、T33C、G33C、T39C、G39C、T40C、 G40C、T42C、G42C、T54C、G54C、T57C、G57C、A66C、G66C、C81A、T81A、T84C、G84C 或它们的任 何组合的突变。 4.SEQ ID N0:3的核苷酸序列,其包含至少一个选自T6C、T9C、T15G、A22C、G24T、A33C、 A39C、A40C、A42C、A54C、A57C、T66C、G81A、A84C、A6C、G6C、A9C、G9C、A15G、C15G、T22C、G22C、 A24T、C24T、T33C、G33C、T39C、G39C、T40C、G40C、T42C、G42C、T54C、G54C、T57C、G57C、A66C、 G66C、C81A、T81A、T84C、G84C或它们的任何组合的突变。5. 权利要求3或4所述的核苷酸序列,其中至少一个突变是沉默的。6. 权利要求3或4所述的核苷酸序列,其中至少一个突变导致所述核苷酸序列具有下 述至少一个突变:其指导所述纤维素酶以高于缺少至少一个突变且在其他方面没有不同于 权利要求3或4的所述核苷酸序列的水平表达。7. 来自海栖热袍菌的核苷酸序列,其具有至少一个突变并且具有与海栖热袍菌野生型 基因组序列相比升高的由所述核苷酸序列编码的蛋白质的表达水平。8. 权利要求7所述的核苷酸序列,其中所述突变是沉默的。9. 编码SEQ ID N0:2的多肽的第一核苷酸序列,其中所述核苷酸序列已经针对编码SEQ ID N0:2的第二序列进行了突变,使得所述蛋白质的表达水平相对于由所述第二核苷酸序 列编码的所述蛋白质的表达水平升高。10. 编码与 SED ID N0:2 至少 50%、60%、70%、80%、90%、95%、97%、98%、99% 或100%同一'I生的蛋白质或其片段的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列包含至少一个选自 T6C、T9C、T15G、A22C、G24T、A33C、A39C、A40C、A42C、A54C、A57C、T66C、G81A、A84C、A6C、G6C、 A9C、G9C、A15G、C15G、T22C、G22C、A24T、C24T、T33C、G33C、T39C、G39C、T40C、G40C、T42C、 G42C、T54C、G54C、T57C、G57C、A66C、G66C、C81A、T81A、T84C、G84C 或它们的任何组合的突 变。11. 权利要求1、2、3、4、5、6、7、8、9或10所述的核苷酸序列,其编码具有纤维素酶活性 的多肽。12. 细菌表达系统,其包含权利要求11所述的核苷酸序列。13. 权利要求12所述的细菌表达系统,其中所述细菌表达系统是革兰氏阴性细菌表达 系统。14. 权利要求13所述的革兰氏阴性细菌表达系统,其中所述革兰氏阴性细菌是假单胞 菌(Pseudomonas)、大肠杆菌(E.coli)、青枯菌(Ralstonia)或柄杆菌(Caulobacter)表达 系统。15. 权利要求14所述的革兰氏阴性细菌表达系统,其中所述假单胞菌表达系统是荧光 假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)表达系统。16. 权利要求12所述的表达系统,其中所述纤维素酶以至少1. 0g/L、2. 0g/L、3. 0g/ L、4.0g/L、5.0g/L、6.0g/L、7. 0g/L、8. 0g/L、9. 0g/L、10. 0g/L、ll. 0g/L、12. 0g/L、13. 0g/ L、14.0g/L、15.0g/L、16.0g/L、17.0g/L、18. 0g/L、19. 0g/L、20. 0g/L、21. 0g/L、22. Og/L、 23.0g/L、24.0g/L、25.0、g/L、26.0g/L、27. 0g/L、28. 0g/L、29. 0g/L、30. 0g/L、31. Og/L、 32. 0g/L、33. 0g/L、34. Og/L 或 35. Og/L 产生。 17. SEQ ID N0:2所述的多肽,其中所述氨基酸序列不包含信号序列、前蛋白序列、启动 子序列或它们的任何组合。 18. SEQ ID N0:2的多肽,其中所述序列还包括异源序列。19. 权利要求18所述的多肽,其中所述异源序列选自由以下组成的组:信号序列、标 签、表位、启动子序列、N端延伸、C端延...

【专利技术属性】
技术研发人员:谭叙秋K·E·巴雷特R·S·李
申请(专利权)人:维莱尼姆公司
类型:发明
国别省市:美国;US

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1