The invention discloses a method for using stem cells to construct humanized mouse model of chronic hepatitis B, including obtaining human stem cells, stem cell transplantation into the liver injury in rats, the steps of humanized mouse HBV infection, found by inducing severe liver damage and transplantation of human stem cells, liver cells derived from rat liver. Have a high rate of 95% of the 50 chimeric, spleen, blood, liver, bone marrow and other organs in sustainable human immune cells isolated from the rat model, the formation of humanized liver and immune cells. Then the infected mice were infected with various kinds of liver virus, and then the humanized rat model was constructed. The construction of humanized mouse model technology in addition to research on the construction of hepatotropic virus infection model, the technical scheme of the concept can also be used to construct other humanized organ model, this scheme provides humanized models are simple and easy for the study of liver diseases in clinical treatment.
【技术实现步骤摘要】
一种利用干细胞构建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法
本专利技术属于临床医学、实验医学、再生医学与病毒学领域,具体地说,是一种构建人源化鼠模型并用于病毒性肝炎等人类疾病研究的新方法。
技术介绍
嗜肝病毒(甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等),流行范围广,每年上百万人死于病毒性肝炎所致肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌。嗜肝病毒只能在高级灵长类动物中致病,动物实验模型常需使用猿猴类动物,猿猴类实验成本高,操作复杂,实验周期长,因此,建立能感染嗜肝病毒并致病的小动物模型有很大的科学意义和应用价值。但由于小动物无法感染嗜肝病毒,因此嗜肝病毒小动物研究模型建立困难,严重阻碍了病毒性肝炎机制、进展、转归研究,并很大程度上限制了治疗方案的优化。建立人源化鼠模型将为研究病毒性肝炎及其治疗与疾病转归提供良好的研究载体。干细胞(包括人胚胎干细胞、间充质干细胞、诱导多功能干细胞等)具有潜在分化能力,可以分化成多种功能细胞,如骨髓间充质干细胞。我们之前的研究发现人骨髓间充质干细胞(hBMSC)能嵌合暴发性肝功能衰竭猪,这为我们将干细胞移植到肝损伤的鼠肝内,建立新型人源化鼠模型奠定了基础。此人源化鼠对阐明嗜肝性病毒生物学特性、肝炎发病机制、疾病转归、研发和筛选抗嗜肝性病毒新药等提供保障。
技术实现思路
本专利技术正是针对现有嗜肝性病毒研究模型的缺陷,提供了一种利用人干细胞构建人源化鼠模型的技术,本专利技术是通过以下技术方案来实现的:本专利技术公开了一种利用干细胞构建人源化鼠模型的方法,步骤如下:1)、获取人干细胞;2)、将干细胞移植入肝损伤的鼠;3)、HBV感染人源化鼠。作为进一步地改进, ...
【技术保护点】
一种利用干细胞构建人源化鼠模型的方法,其特征在于,所述方法的步骤如下:1)、获取人干细胞;2)、将干细胞移植入肝损伤的鼠;3)、HBV感染人源化鼠。
【技术特征摘要】
2017.03.07 CN 20171013052271.一种利用干细胞构建人源化鼠模型的方法,其特征在于,所述方法的步骤如下:1)、获取人干细胞;2)、将干细胞移植入肝损伤的鼠;3)、HBV感染人源化鼠。2.根据权利要求1所述的利用干细胞构建人源化鼠模型的方法,其特征在于,所述的干细胞是分离培养的人干细胞,或是商品化的分离或冻存的人干细胞或细胞系。3.根据权利要求2所述的利用干细胞构建人源化鼠模型的方法,其特征在于,所述的分离培养的人干细胞的获取步骤如下:a、获得纯化人干细胞;b、干细胞培养,传代;c、培养于20℃-40℃,2%-10%CO2的培养箱中。4.根据权利要求1或2或3所述的利用干细胞构建人源化鼠模型的方法,其特征在于,所述的步骤2)的具体步骤如下:e、获得不同品系的实验鼠;f、通过予以肝损药物,或予以外科部分肝切除术,建立肝损伤鼠模型;g、移植1×104-8人干细胞进入鼠模型。5.根据权利要求4所述的用干细胞构建人源化鼠模型的方法,其特征在于,所述的步骤g后还包括步骤h:分次予...
【专利技术属性】
技术研发人员:李君,李江,孙苏婉,李兰娟,
申请(专利权)人:浙江大学,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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