肾病动物模型及其治疗剂制造技术

提供了一种表达ApoL1的非人转基因动物以及一种用于制备它们的方法。还提供了一种用于鉴别能够减轻ApoL1介导的肾病的进展的药剂的方法。此外，提供了一种分离的抗体，其结合ApoL1的人变体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肾病动物模型及其治疗剂交叉引用本申请要求2014年11月10日提交的美国临时申请号62/077,774的优先权权益，其通过引用整体并入本文。序列表本申请含有序列表，其已经以ASCII格式电子地提交，且特此通过引用整体并入。所述ASCII副本(创建于2015年11月10日)被命名为P32407WO_PCTSequenceListing.txt且具有52,874字节的大小。
本专利技术涉及肾病的非人转基因动物模型和用于鉴别治疗剂的方法。
技术介绍
载脂蛋白L1(ApoL1)是包括信号肽的6-基因家族中的唯一成员，且与载脂蛋白A1一起，归入高密度脂蛋白(HDL)颗粒的一个特别致密亚种(HDL3)中(Duchateau等人，1997)。ApoL1是针对非洲锥虫布鲁斯锥虫布鲁斯亚种(Trypanosomabruceibrucei)(其为非洲昏睡病的成因)的人先天性免疫应答的主要组分。锥虫的一个亚种，布鲁斯锥虫罗德西亚亚种(T.b.rhodesiense)对野生型ApoL1(也被称作G0)具有抗性。但是，ApoL1的两个独特等位基因(被称作G1和G2)(它们在非洲染色体中常见，但是在欧洲染色体中不存在)赋予对抗布鲁斯锥虫罗德西亚亚种感染的保护(参见US7,585,511、US2012/0128682)。G1和G2等位基因也会增加发生肾病的风险，且变体与例如局灶性节段性肾小球硬化(focalsegmentalglomerulosclerosis，FSGS)、高血压有关的肾病(Hypertensionassociatednephropathy，HTN)和HIV有关的肾病(HIVassociatednephropathy，HIVAN)相关(参见US2012/0195902、US2012/0003644)。与高加索人相比，在非洲裔美国人中，FSGS更早发生，且更快4-5倍地发展成末期肾病(ESRD)(Hsu等人，2003；Kopp等人，2011；Parsa等人，2013)。ApoL1变体与高7倍几率的“高血压属性的”ESRD(不论糖尿病状态)(Freedman等人，2010；Freedman等人，2011；Parsa等人，2013)、高17倍几率的特发性FSGS(Kopp等人，2011)，和高29倍几率的HIV相关的肾病(Kopp等人，2011)相关。所述遗传关联是关于常见病的最强曾经报道之一，并为非裔美籍人相对于高加索人的更高肾病率提供了解释。这些疾病造成许多痛苦，并且在美国导致数百亿美元的支出。目前不可得到用于保护过滤器屏障功能和防止肾病的靶向疗法。因此，非常有利的和合乎需要的是，具有用于治疗这样的疾病的治疗剂。此外，适合用在将药剂鉴别为潜在治疗剂的方法中的肾病动物模型将是有价值的。
技术实现思路
本专利技术提供了一种表达ApoL1的非人转基因动物以及一种用于制备它们的方法。还提供了一种用于鉴别能够减轻ApoL1介导的肾病的进展的药剂的方法。此外，提供了一种分离的抗体，其结合ApoL1的人变体。在一个方面，本专利技术提供了一种表达人ApoL1的非人转基因动物。在某些实施方案中，所述非人转基因动物表达i)ApoL1的G0变体(SEQIDNO：01)，ii)ApoL1的G1变体(SEQIDNO：02)，iii)ApoL1的G2变体(SEQIDNO：03)，iv)ApoL1的G0变体和ApoL1的G1变体，v)ApoL1的G0变体和ApoL1的G2变体，vi)ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体，或vii)ApoL1的G0变体，ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体。在某些实施方案中，所述动物是啮齿动物。在某些实施方案中，所述啮齿动物是小鼠。在某些实施方案中，所述非人转基因动物患有肾病。在某些实施方案中，所述肾病是HIV相关的肾病。在某些实施方案中，所述肾病是多柔比星诱导的肾病。在另一个方面，本专利技术提供了从如本文中所述的非人转基因动物衍生出的细胞或组织。在另一个方面，本专利技术提供了一种确定药剂是否能够降低人ApoL1的血清浓度的方法，所述方法包括以下步骤：测量非人转基因动物中的人ApoL1的血清浓度，将所述药剂施用给所述非人转基因动物，和测量所述非人转基因动物中的人ApoL1的血清浓度，其中所述非人转基因动物中的人ApoL1的血清浓度的下降指示，所述药剂能够降低人ApoL1的血清浓度。在某些实施方案中，所述非人转基因动物是表达人ApoL1的非人转基因动物。在某些实施方案中，所述非人转基因动物表达i)ApoL1的G0变体(SEQIDNO：01)，ii)ApoL1的G1变体(SEQIDNO：02)，iii)ApoL1的G2变体(SEQIDNO：03)，iv)ApoL1的G0变体和ApoL1的G1变体，v)ApoL1的G0变体和ApoL1的G2变体，vi)ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体，或vii)ApoL1的G0变体，ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体。在某些实施方案中，所述动物是啮齿动物。在某些实施方案中，所述啮齿动物是小鼠。在某些实施方案中，所述非人转基因动物患有肾病。在某些实施方案中，所述肾病是HIV相关的肾病。在某些实施方案中，所述肾病是多柔比星诱导的肾病。在另一个方面，本专利技术提供了一种鉴别能够减轻肾病进展的药剂的方法，所述方法包括以下步骤：在非人转基因动物中诱导肾病，将所述药剂施用给所述非人转基因动物，和基于所述非人转基因动物的肾的病理学表型评估肾病的进展(如在实施例中所述)，其中与未施用所述药剂的非人转基因动物相比更低发展的肾病将所述药剂鉴别为能够减轻肾病进展。在某些实施方案中，所述非人转基因动物是表达人ApoL1的非人转基因动物。在某些实施方案中，所述非人转基因动物表达i)ApoL1的G0变体(SEQIDNO：01)，ii)ApoL1的G1变体(SEQIDNO：02)，iii)ApoL1的G2变体(SEQIDNO：03)，iv)ApoL1的G0变体和ApoL1的G1变体，v)ApoL1的G0变体和ApoL1的G2变体，vi)ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体，或vii)ApoL1的G0变体，ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体。在某些实施方案中，所述动物是啮齿动物。在某些实施方案中，所述啮齿动物是小鼠。在某些实施方案中，通过施用多柔比星诱导所述肾病。在某些实施方案中，通过在所述非人转基因动物中表达含有人免疫缺陷病毒的一部分的转基因，诱导所述肾病。在某些实施方案中，所述药剂结合i)ApoL1的人G0变体(SEQIDNO：01)，ii)ApoL1的人G0变体和ApoL1的人G1变体(SEQIDNO：02)，iii)ApoL1的人G0变体和ApoL1的人G2变体(SEQIDNO：03)，或iv)ApoL1的人G0变体，ApoL1的人G1变体和ApoL1的人G2变体。在某些实施方案中，所述药剂是抗体。在另一个方面，本专利技术提供了一种产生肾病的动物模型的方法，所述方法包括：在表达人ApoL1的非人转基因动物中诱导肾病。在某些实施方案中，通过在所述非人动物中表达含有人免疫缺陷病毒的一部分的转基因，诱导所述肾病。在某些实施方案中，通过施用多柔比星诱导所述肾病。在某些实施方案中，以从15mg/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达人ApoL1的非人转基因动物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.10 US 62/077,7741.一种表达人ApoL1的非人转基因动物。2.根据权利要求1所述的非人转基因动物，其中所述非人转基因动物表达i)ApoL1的G0变体(SEQIDNO：01)，ii)ApoL1的G1变体(SEQIDNO：02)，iii)ApoL1的G2变体(SEQIDNO：03)，iv)ApoL1的G0变体和ApoL1的G1变体，v)ApoL1的G0变体和ApoL1的G2变体，vi)ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体，或vii)ApoL1的G0变体、ApoL1的G1变体和ApoL1的G2变体。3.根据权利要求1所述的非人转基因动物，其中所述动物是啮齿动物。4.根据权利要求3所述的非人转基因动物，其中所述啮齿动物是小鼠。5.根据权利要求1所述的非人转基因动物，其中所述非人转基因动物患有肾病。6.根据权利要求5所述的非人转基因动物，其中所述肾病是HIV相关的肾病。7.根据权利要求5所述的非人转基因动物，其中所述肾病是多柔比星诱导的肾病。8.来自从根据权利要求1-7中的任一项所述的非人转基因动物的细胞或组织。9.一种确定药剂是否能够降低人ApoL1的血清浓度的方法，所述方法包括：a)测量根据权利要求1-7中的任一项所述的非人转基因动物中的人ApoL1的血清浓度；b)将所述药剂施用给所述非人转基因动物；和c)测量所述非人转基因动物中的人ApoL1的血清浓度；其中所述非人转基因动物中的人ApoL1的血清浓度的下降指示所述药剂能够降低人ApoL1的血清浓度。10.一种鉴别能够减轻肾病进展的药剂的方法，所述方法包括：a)在根据权利要求1-4中的任一项所述的非人转基因动物中诱导肾病；b)将所述药剂施用给所述非人转基因动物；和c)基于所述非人转基因动物的肾的病理学表型，评估肾病的进展；其中与未施用所述药剂的非人转基因动物相比更低发展的肾病将所述药剂鉴别为能够减轻肾病进展。11.根据权利要求10所述的方法，其中通过施用多柔比星诱导所述肾病。12.根据权利要求10所述的方法，其中通过在所述非人转基因动物中表达含有人免疫缺陷病毒的一部分的转基因，诱导所述肾病。13.根据权利要求9-12中的任一项所述的方法，其中所述药剂结合i)ApoL1的人G0变体(SEQIDNO：01)，ii)ApoL1的人G0变体和ApoL1的人G1变体(SEQIDNO：02)，iii)ApoL1的人G0变体和ApoL1的人G2变体(SEQIDNO：03)，或iv)ApoL1的人G0变体、ApoL1的人G1变体和ApoL1的人G2变体。14.根据权利要求9-12中的任一项所述的方法，其中所述药剂是抗体。15.一种产生肾病的动物模型的方法，所述方法包括：在表达人ApoL1的非人转基因动物中诱导肾病。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述非人动物是根据权利要求1-4中的任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：迪那·格兰特·威尔逊，奥迪德·福尔曼，安德鲁·彼得森，文晓晖，苏珊娜·J·斯凯尔斯，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH