银水牛果幼茎再生植株诱导培养基及利用其进行植株培养的方法技术

银水牛果幼茎再生植株诱导培养基及利用其进行植株培养的方法，本发明专利技术涉及再生植株诱导培养基及培养方法。本发明专利技术目的是为了解决现有银水牛果无性扦插法繁殖的生根率低，用MS培养基培养植株分化率低的技术问题。本发明专利技术的培养基由大量元素、微量元素、铁盐、有机质、激素、蔗糖和琼脂组成；其中的激素为6-苄基氨基嘌呤、玉米素和萘乙酸。方法：在4中旬～5月上旬，采集银水牛果的当年生休眠枝条，水培，得到幼茎；将幼茎清洗、消毒后接种银水牛果幼茎再生植株诱导培养基上，接种后，先放入黑暗条件下培养，然后转入光照培养，得到银水牛果再生植株。该培养方法的丛生苗诱导率达80%以上，同时节约成本约50%，种性纯度98%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物组织培养
，是一种银水牛果幼茎再生植株诱导专用培养基。
技术介绍
银水牛果2001年从加拿大引入黑龙江省大兴安岭地区种植，在大兴安岭地区栽培后，能够安全越冬并正常生长和结实。银水牛果(Shepherdia argentea)胡颓子科水牛果属，多年生灌木，原产美国北部，株高5.5米，花小，黄色，花期仲春，叶质地紧密，具有胡颓子属的银色，窄叶，长2~6cm，秋季落叶，叶色不变，果实红色至橙红色。银水牛果具有耐大气干旱、耐盐碱、耐土壤贫瘩、抗病虫害等优良特点，分布区最低温度_40°C。该树种根系发达，固氮能力强。银水牛果在沙地、丘陵地、盐碱干旱瘠薄地生长，可用于采矿迹地植被恢复，改善区域生态环境具有很高的应用价值，是优良的水土保持和防风固沙树种。银水牛果果实总黄酮含量高达4.02mg /g，维生素C含量208.20mg / 100g，并且富含钾、钙、镁、锌等元素；含18种氨基酸，其中含有人体所必需的8种，总量达8.20%。嫩茎叶粗蛋白含量达16.34%，大于粗饲料中粗蛋白含量指标(15%);粗纤维含量6.34%，远远低于粗饲料中粗纤维含量指标(18%);无氮浸出物高达58.77%。银水牛果果实红色或橙红色，营养丰富，味道鲜美，可食用，且结实量大，亦可作为经济林树种，有一定的开发潜力。而且银水牛果与沙棘相比无棘刺，便于采摘，是一种新型经济林树种。银水牛果果实成熟期9~10月，果实长期不落，采种期较长，而且种皮厚而硬，附有油脂和棕色胶膜，导致休眠期长，种子处理较难，育苗难度大。由于种子的杂合率较高，苗木质量难以控制，通过组织培养快速繁殖可以解决上述问题，保证苗木质量及后代遗传的一致性，能保持原有品种的优良性状，对保质、保纯有着特殊作用。目前国内有关银水牛果组培方面的报道甚少，有关银水牛果繁殖主要采取无性扦插方法，但生根率较低，仅有60%左右，目前尚没有丛生苗诱导的报道，且未见在生产上应用。用MS培养基对银水牛果进行再生植株诱导培养，其分化率为30%~50%，分化率低。
技术实现思路
本专利技术目的是为了解决现有银水牛果无性扦插法繁殖的生根率低，用MS培养基培养植株分化率低的技术问题，本专利技术提供银水牛果幼茎再生植株诱导培养基(记为SNP及银水牛果植株培养方法。本专利技术的银水牛果幼茎再生植株诱导培养基(SNJ每升由400~450mg的ΝΗ4Ν03、900 ~920mg 的 KN03、170 ~190mg 的 KH2P04、370 ~395mg 的 MgS04.7H20、100 ~llOmg的 CaCl2.2Η20、6.2 ~6.5mg 的 Η3Β03、22.3 ~24.3mg 的 MnS04.4Η20、8.6 ~9.2mg 的ZnS04.7Η20、0.25 ~0.3mg 的 Na2Mo04.2Η20、0.025 ~0.03mg 的 CuS04.5Η20、0.025 ~0.03mg 的 CoCl2.6Η20、37.3 ~37.9mg 的 Na2_EDTA、27.8 ~28.2mg 的 FeS04.7H20、100 ~105mg 的 C6H1206、0.5 ~0.7mg 的 C6H5N02、0.1 ~0.15mg 的 C12H17C1N40S.HC1、0.5 ~0.6mg的 C8Hn03N.HC1、2 ~2.5mg 的 C2H5N02、0.5 ~2.0mg 的 6-苄基氨基嘌呤(6_ΒΑ)、0.05 ~0.5mg玉米素(ZT)和0.05~0.5mg萘乙酸(NAA)、20~25g的鹿糖、6~7g的琼脂和余量的蒸馏水组成。本实施方式中硝酸铵(nh4no3)、硝酸钾(kno3)、磷酸二氢钾(kh2po4)、硫酸镁(MgS04.7H20)和二氯化钙(CaCl2.2H20)为培养基中的大量元素；硼酸(Η3Β03)、硫酸锰(MnS04.4H20)、硫酸锌(ZnS04.7H20)、钥酸钠(Na2Mo04.2H20)、硫酸铜(CuS04.5H20)和氯化钴(CoCl2.6H20)为培养基中的微量元素；乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA)和硫酸铁(FeS04.7H20)为培养基中的铁盐；肌醇(C6H1206)、烟酸(C6H5N02)、盐酸硫胺素(C12H17C1N40S.Η(:1)、、盐酸吡哆醇(C8Hn03N.Η(:1)和甘氨酸(C2H5N02)为培养基中的有机质；6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、玉米素(ZT)和萘乙酸(NAA)为培养基中的激素。利用上述的银水牛果幼茎再生植株诱导培养基进行银水牛果植株培养的方法，按以下步骤进行:一、在4中旬~5月上旬，采集银水牛果的当年生休眠枝条，放置在光照培养箱中水培催芽，光照培养箱每天换1次水，当幼茎长至2~3cm时，剪下来备用。二、将步骤一培养的银水牛果幼茎清洗、消毒；三、将经步骤二处理的幼茎在超净台上切成1~2cm的茎段，接种到上述的银水牛果幼茎再生植株诱导 培养基上，接种后，先放入黑暗条件下培养6~7天，然后转入光照培养15~20天，得到银水牛果再生植株。本专利技术的培养基是在MS培养基的基础上将大量元素的用量进行了调整，降低了大量元素中的N03_、Ca2+元素浓度，将微量元素中将KI含量降为0，有利于银水牛果的器官分化。利用6-苄基氨基嘌呤、玉米素和萘乙酸作为植物生长调节剂，以银水牛果的当年生休眠枝条经水培获得的幼茎为培养材料诱导再生植株，利用本专利技术培养基进行银水牛果幼茎再生植株的培养，丛生苗诱导率达80%以上，比现有MS培养基诱导分化率提高30%以上，同时节约成本约50%。实验表明，本专利技术培养基芽增殖明显，易诱导再生植株。通过幼茎培养诱导出不定芽及再生植株，而且种性一致性强，经组培苗移栽植株生长与性状测定，种性纯度98%以上，表现出高度一致性和丰产性，且能够达到快速繁殖优良种苗的目的。【具体实施方式】【具体实施方式】一:本实施方式的银水牛果幼莖再生植株诱导培养基(记为SNJ每升由 400 ~450mg 的 NH4N03、900 ~920mg 的 KN03、170 ~190mg 的 KH2P04、370 ~395mg的 MgS04.7H20、100 ~llOmg 的 CaCl2.2Η20、6.2 ~6.5mg 的 Η3Β03、22.3 ~24.3mg 的MnS04.4Η20、8.6 ~9.2mg 的 ZnS04.7Η20、0.25 ~0.3mg 的 Na2Mo04.2Η20、0.025 ~0.03mg的 CuS04.5Η20、0.025 ~0.03mg 的 CoCl2.6Η20、37.3 ~37.9mg 的 Na2_EDTA、27.8 ~28.2mg 的 FeS04.7H20、100 ~105mg 的 C6H1206、0.5 ~0.7mg 的 C6H5N02、0.1 ~0.15mg 的C12H17C1N40S.HCl'0.5 ~0.6mg 的 C8Hn03N.HC1、2 ~2.5mg 的 C2H5N02、0.5 ~2.0mg 的 6-苄基氛基嘿呤(6_ΒΑ)、0.05~0.5mg玉米素(ZT)和0.05~0.5mg蔡乙酸(NAA)、20~25g的蔗糖、6~7g的琼脂和余量的蒸馏水组成。本实施方式中硝酸铵(nh4no3)、硝酸钾(kno3)、磷酸二氢钾(k本文档来自技高网...

【技术保护点】
银水牛果幼茎再生植株诱导培养基，其特征在于该培养基每升由400～450mg的NH4NO3、900～920mg的KNO3、170～190mg的KH2PO4、370～395mg的MgSO4·7H2O、100～110mg的CaCl2·2H2O、6.2～6.5mg的H3BO3、22.3～24.3mg的MnSO4·4H2O、8.6～9.2mg的ZnSO4·7H2O、0.25～0.3mg的Na2MoO4·2H2O、0.025～0.03mg的CuSO4·5H2O、0.025～0.03mg的CoCl2·6H2O、37.3～37.9mg的Na2?EDTA、27.8～28.2mg的FeSO4·7H2O、100～105mg的C6H12O6、0.5～0.7mg的C6H5NO2、0.1～0.15mg的C12H17ClN4OS·HCl、0.5～0.6mg的C8H11O3N·HCl、2～2.5mg的C2H5NO2、0.5～2.0mg的6?苄基氨基嘌呤、0.05～0.5mg玉米素和0.05～0.5mg萘乙酸、20～25g的蔗糖、6～7g的琼脂和余量的蒸馏水组成。

【技术特征摘要】
1.银水牛果幼茎再生植株诱导培养基，其特征在于该培养基每升由400~450mg的NH4N03、900 ~920mg 的 KN03、170 ~190mg 的 KH2P04、370 ~395mg 的 MgS04.7H20、100 ~llOmg 的 CaCl2.2Η20、6.2 ~6.5mg 的 Η3Β03、22.3 ~24.3mg 的 MnS04.4Η20、8.6 ~9.2mg的 ZnS04.7Η20、0.25 ~0.3mg 的 Na2Mo04.2Η20、0.025 ~0.03mg 的 CuS04.5Η20、0.025 ~0.03mg 的 CoCl2.6Η20、37.3 ~37.9mg 的 Na2_EDTA、27.8 ~28.2mg 的 FeS04.7H20、100 ~105mg 的 C6H1206、0.5 ~0.7mg 的 C6H5N02、0.1 ~0.15mg 的 C12H17C1N40S.HC1、0.5 ~0.6mg的 C8Hn03N.HC1、2 ~2.5mg 的 C2H5N02、0.5 ~2.0mg 的 6-苄基氨基嘌呤、0.05 ~0.5mg 玉米素和0.05~0.5mg萘乙酸、20~25g的蔗糖、6~7g的琼脂和余量的蒸馏水组成。2.根据权利要求1所述的银水牛果幼茎再生植株诱导培养基，其特征在于该培养基每升由 400mg 的 NH4N03、900mg 的 KN03、170mg 的 KH2P04、370mg 的 MgS04.7H20、100mg的 CaCl2.2Η20、6.2mg 的 Η3Β03、22.3mg 的 MnS04.4Η20、8.6mg 的 ZnS04.7Η20、0.25mg 的Na2Mo04.2Η20、0.025mg 的 CuS04.5Η20、0.025mg 的 CoCl2.6Η20、37.3mg 的 Na2_EDTA、27.8mg的 FeS04.7H20、100mg 的 C6H1206、0.5mg 的 C6H5N02、0.lmg 的 C12H17C1N40S.HC1、0.5mg 的C8Hn03N *HCl>2mg 的 C2H5N02、1.0mg 的 6-苄基氨基嘌呤、0.lmg 玉米素和 0.05mg 萘乙酸、20g的蔗糖、6g的琼脂和余量的蒸馏水组成。3.根据权利要求1所述的银水牛果幼茎再生植株诱导培养基，其特征在于该培养基每升由 400mg 的 NH4N03、900mg 的 KN03、170mg 的 KH2P04、370mg 的 MgS04.7H20、100mg的 CaCl2.2Η20、6.2mg 的 Η3Β03、22.3mg 的 MnS04.4Η20、8.6...

【专利技术属性】
技术研发人员：王承义，李晶，宋国华，孙一萌，王丹，徐永波，梁鸣，林玉秋，
申请(专利权)人：黑龙江省林业科学研究所，
类型：发明
国别省市：