本发明专利技术提供了一种新型糯玉米花粉诱导培养基，该培养基的配方由一定比例的KNO3、(NH4)2SO4、KH2PO4、CaCl2∙2H2O、MgSO4∙7H2O、Na2-EDTA、FeSO4∙7H2O、MnSO4∙4H2O、ZnSO4∙7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4∙2H2O、CoCl2∙6H2O、CuSO4∙5H2O、丙三醇、甘氨酸、叶酸、丙氨酸、赖氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、蔗糖、葡萄糖、植物凝胶、2，4-D、KT、复酞核酸、L-脯氨酸、水解蛋白、秋水仙碱、生物素和活性炭所组成。该培养基具有高效地诱导糯玉米花粉愈伤组织、降低褐化的优点，可以显著提高糯玉米花粉培养效率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种新型糯玉米花粉诱导培养基配方，具体涉及一种高效率地诱导糯 玉米花粉愈伤组织的诱导培养基配方，属于农业科学
技术介绍
玉米在全世界范围广泛种植，是仅次于小麦和水稻的第三大粮食作物。糯玉米是 玉米的一个亚种，又称蜡质玉米，起源于我国的西南地区（云南的西双版纳和广西的亚热带 地区)，故有"中国蜡质种"之称，作为栽培种有60多年的历史。 糯玉米组分特殊，用途广泛。糯玉米子粒中水溶性蛋白和盐溶性蛋白的含量都比 较高，而醇溶性蛋白的含量比较低，赖氨酸含量一般要比普通玉米增加30%~60%，消化吸 收率高；子粒淀粉完全是支链淀粉，而普通玉米子粒的淀粉是由约72%的支链淀粉和约28% 的直链淀粉构成。支链淀粉是一种重要的高分子原料，易溶于水而生成稳定的溶液，具有很 强的粘度，而凝沉性很弱，淀粉液在贮存中不发生沉淀，使其在食品加工业和工业生产中具 有特殊的用途。随着人们生活水平的提高、膳食结构的不断改善以及子粒成分特殊性能的 深入开发，糯玉米已经成为营养、保健食品和食品加工、饲料兼用、工业加工等领域不可缺 少的原材料。2003年我国糯玉米种植面积达26. 7万hm，特别在我国南方沿海一带，糯玉米 需求量急剧上升，糯玉米育种在我国具有广阔的前景。 目前糯玉米广泛采用常规育种方法，需耗费大量的人力和时间，连续多年的人工 自交与选择，获得一个纯系平均需要4~6年的时间。而通过花粉培养获得单倍体植株， 单倍体植株加倍后每个基因均以纯合体的形式存在，各种优良和不良的性状在早期世代就 能表现出来，只需一年就可获得新纯合自交系，可大大缩短育种周期，是现代植物育种中快 速、高效的育种途径之一。 我国在70年代初开始了玉米花粉培养育种的研究，取得较大进展。1975年中国科 学院遗传所首次诱导出玉米花粉植株。1977年，中国科学院植物所和广西玉米研究所合作 育成了玉米花培杂交种"桂三1号"，于1992年通过广西壮族自治区品种审定，推广8万多 亩。1980年，吴甲林等以群单105的玉米为外植体，成功的获得了 "群花"玉米自交系。但 是玉米花粉培养育种效率并不高，至今我国花培育种已育出了小麦品种12个，水稻品种22 个，然而育种的玉米花培品种只有2个。玉米花培育种效率如此低下主要是由于玉米花粉 培养效率过低、难以获得足够的选择群体造成的。因此，大幅度提高玉米花药培养效率，获 得大量的加倍纯系，是目前玉米花药培养及单倍体育种中急需解决的问题。 培养基是花粉培养的物质基础，直接关系到培养物的生长与分化，培养基组分是 影响花培效率的一个很重要的因素。培养基各组分的合适用量，以及它们之间一定的组合 关系，可导致花培效率的大幅度提高。继续筛选和优化基本培养基，提高培养基选用的针对 性，是提高花粉培养力的有效措施；大量的研究发现一些有机附加物可以显著提高花粉培 养力，发现和优化组合花粉培养有机附加物质，可进一步提高花粉培养力。 通过多年糯玉米花粉培养的摸索和实践，我们不断优化培养基配方，并且不断尝 试加入一些提高糯玉米药诱导力的添加物并组合其种类搭配及浓度，最终摸索出了一种高 效率地诱导糯玉米花粉诱导培养的新型培养基配方。我们的研究结果对于进一步推广和应 用玉米单倍体育种和理论研究无疑有较大的现实意义和实用价值。
技术实现思路
本专利技术提供了一种新型糯玉米花粉诱导培养基，该培养基的配方如下： KNO3 2550 ~2750mg/L，（NH4)2SO4 320 ~380mg/L，KH2PO4 240 ~280mg/L，CaCl2* 2H20 140 ~160mg/L，MgSO4. 7H20 200 ~240mg/L，Na2-EDTA 35 ~40mg/L，FeSO4. 7H20 26 ~ 30mg/L，MnSO4* 4H 20 6 ~8mg/L，ZnS04· 7H 20 I. 7 ~I. 9mg/L，H3BO3 I. 8 ~2. 2mg/L， KI I. I ~I. 3mg/L，Na2MoO4* 2H 20 0· 15 ~0· 20mg/L，CoCl2* 6H 20 0· 015 ~0· 020mg/L， CuS04,5H20 0.015 ~0.020mg/L，丙三醇 2.5 ~3.5mg/L，甘氨酸 0.9 ~l.lmg/L，叶酸 0.25 ~0.35mg/L，丙氛酸 1.4 ~1.6mg/L，赖氛酸 1.6 ~1.8mg/L，维生素 BI 0.9 ~Llmg/ L，维生素 B6 0.9~l.lmg/L，烟酸0.7~0.9mg/L，鹿糖23~27g/L，葡萄糖14~16g/L， 植物凝胶3. 5~4. 5g/L ; 2.4- D 1.5 ~1.9mg/L，KT 0.7 ~0.9mg/L，复酞核酸 0.25 ~0.35mg/L，L-脯氨酸 70 ~ 9011^/1^，水解蛋白0.55~0.658/1^，秋水仙碱0.13~0.1711^凡，生物素0.09~0.1111^/ L,活性炭 2. 5 ~3. Og/L，PH 5. 8-6. 0。 本专利技术所述的培养基具有高效率地诱导糯玉米花粉愈伤组织、显著降低褐化的优 点，可以大幅度地提高糯玉米花粉培养效率。下面的实施例以及对比实验可以清楚地反映 本专利技术所述培养基的特点。【具体实施方式】 实施例1 配制如下配方的培养基： KNO3 2650mg/L, (NH4)2SO4 350mg/L, KH2PO4 260mg/L, CaCl2* 2H 20 150mg/L, MgSO4* 7H 20 220mg/L, Na2-EDTA 37. 5mg/L, FeSO4* 7H 20 28mg/L, MnSO4* 4H 20 7mg/L, ZnSO4* 7H 20 I. 8mg/ L, H3BO3 2. Omg/L, KI I. 2mg/L, Na2MoO4* 2H 20 0. 175mg/L, CoCl2* 6H 20 0. 0175mg/L, CuS04?5H20 0.0175mg/L,丙三醇 3mg/L,甘氨酸 l.Omg/L,叶酸 0.3mg/L,丙氨酸 1.5mg/L， 赖氨酸1.7mg/L，维生素 BI l.Omg/L，维生素 B6 l.Omg/L，烟酸0.8mg/L,鹿糖25g/L,葡 萄糖15g/L，植物凝胶4.0g/L; 2.4- D L7mg/L，KT 0.8mg/L，复酞核酸 0.3mg/L，L-脯氨酸 80mg/L，水解蛋白 0.6g/ L，秋水仙碱 0.15mg/L，生物素 （Xlmg/L，活性炭 2.75g/L，PH 5.9。 选取糯玉米品种神农糯和苏玉糯2号作为花粉培养供体，采集单核中晚期玉米雄 穗，保存在6°c暗培养箱中低温预处理7d，然后将玉米雄穗用酒精表面消毒，外植体灭菌 (〇. 1%升汞溶液，5min)，无菌水冲洗4~5次，剥除花药外颖片，抖药法接种花药于该诱导培 养基中诱导花粉愈伤组织，在温度为27°C、湿度为60%-70%的环境下暗培养。愈伤组织形成 后(长到2 _左右)，计算愈伤组织诱导率。 实施例2 配制如下配方的培养基(丙氨酸添加浓度的优选）： KNO3 2650mg/L, (NH4)2SO4 350mg/L, KH2PO4 260本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种新型糯玉米花粉诱导培养基，该培养基的配方如下：KNO3 2550～2750mg/L，(NH4)2SO4 320～380mg/L，KH2PO4 240～280mg/L，CaCl2∙2H2O 140～160mg/L，MgSO4∙7H2O 200～240mg/L，Na2‑EDTA 35～40mg/L，FeSO4∙7H2O 26～30mg/L，MnSO4∙4H2O 6～8mg/L，ZnSO4∙7H2O 1.7～1.9mg/L，H3BO3 1.8～2.2mg/L，KI 1.1～1.3mg/L，Na2MoO4∙2H2O 0.15～0.20mg/L，CoCl2∙6H2O 0.015～0.020mg/L，CuSO4∙5H2O 0.015～0.020mg/L，丙三醇 2.5～3.5mg/L，甘氨酸 0.9～1.1mg/L，叶酸 0.25～0.35mg/L，丙氨酸 1.4～1.6mg/L，赖氨酸 1.6～1.8mg/L，维生素B1 0.9～1.1mg/L，维生素B6 0.9～1.1mg/L，烟酸 0.7～0.9mg/L，蔗糖 23～27g/L，葡萄糖 14～16g/L，植物凝胶 3.5～4.5g/L；2，4‑D 1.5～1.9mg/L，KT 0.7～0.9mg/L，复酞核酸0.25～0.35mg/L，L‑脯氨酸 70～90mg/L，水解蛋白 0.55～0.65g/L，秋水仙碱 0.13～0.17mg/L，生物素 0.09～0.11mg/L，活性炭 2.5～3.0g/L，PH 5.8‑6.0。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：王开，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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