一种茄子花药诱导培养基及配制方法技术

本发明专利技术提供了一种茄子花药诱导培养基及配制方法。培养基的成分由大量元素、微量元素、铁盐及络合剂、有机成分、无机添加物、植物生长调节剂、生理活性物质、碳源、凝固剂及其它添加物所组成。培养基的配制方法包括配制母液、制备生理活性物质、配制培养液、培养液加热溶解与分装、培养基高压蒸汽灭菌、培养基加入IAA等步骤。本发明专利技术所述的培养基具有高效率地诱导茄子花药产生花粉愈伤、培养基褐化轻的优点，可以显著提高茄子花药培养效率，加快茄子花培育种进程。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种茄子花药诱导培养基及配制方法，具体涉及一种可以显著提高茄子花药培养效率的花药诱导培养基及其配制方法，属于农业科学

技术介绍
茄子（SolanummelongeneL.），别名落苏、伽、酪酥、昆仑瓜、小菰等，是茄科茄属以浆果为产品的一年生草本植物。茄子起源于亚洲东南的印度、缅甸及其临近的热带地区。古印度为最早的驯化地，至今印度仍有茄子野生种和近源种。茄子除鲜食外，还可以加工制成酱茄子、腌茄或茄子干等。茄子果实富含人体所需的蛋白质、维生素、粗纤维和矿物质等，特别是其中富含的维生素P在果蔬中含量最高，可以增加毛细血管的弹性和细胞间的黏力，防止微血管破裂，特有的维生素D可以降低血液中的胆固醇含量，经常食用茄子可防止动脉硬化和心血管疾病，还能增强肝脏生理功能，预防多种肝脏疾病，是一种良好的保健蔬菜。茄子在全世界都有分布，以亚洲最多，占世界总产量的74%。茄子在我国栽培历史悠久，类型品种繁多，是我国非常重要的果菜类蔬菜，在我国南北各地普遍栽培，2005年种植面积达到105.4万公顷，栽培面积在蔬菜作物中排第四位，产量居世界之首，是我国夏秋的主要栽培蔬菜之一。茄子除了作为一种重要的果菜类蔬菜外，在遗传育种、细胞学等方面也是很重要的研究对象，因此，开展茄子育种一直是蔬菜育种领域的重点工作。我国的茄子育种方式一直以来都以常规杂交育种为主，周期长、见效慢，不能切实满足生产上对茄子良种的迫切需求，单倍体育种是解决这一问题的重要的育种方法之一。单倍体育种可以大大提高育种选择的效率，缩小育种群体的规模，并缩短育种年限。花药培养和小孢子培养是获得单倍体的主要途径。经花药培养得到的花粉株系间性状变异幅度大，超亲现象和出现特殊优良性状的频率要显著高于常规育种，株系内性状整齐，世代间稳定性强，通过花药或小孢子培养选育出的自交系具有高度的纯和性，以此配制的杂交组合往往具有更强的杂种优势。茄子花药培养的研究开始于20世纪70年代初。1973年Raina和Lyer通过花药培养经愈伤组织获得了茄子单倍体植株。同年，我国的王纪方等通过培养茄子花药也成功的获得了纯合的单倍体植株。1975年北京市农科院蔬菜所单倍体育种组以六叶茄、九叶茄为材料经花药培养同样获得了单倍体植株，经花药培养培育出品种尤丹茄一号，该品种已在生产上推广应用。1987年，TuberosaR等进行茄子花药培养试验，成功地通过胚状体途径成苗，得到了单倍体植株。1996年，Miyoshi通过直接培养游离小孢子的方法，经愈伤组织途径获得了再生植株；2004年，连勇等以四倍体茄子为材料进行了游离小孢子培养，获得了再生植株；2007年，孙振英等利用茄子离体小孢子培养技术，通过愈伤组织途径再生获得了茄子二倍体栽培种的再生植株。茄子花药培养研究虽取得了较大进展，但在理论和应用上仍存在一些问题。至今，关于茄子小孢子由配子体发育途径向孢子体途径转变，进而形成单倍体植株的发育调控机理尚不明确，培养基成分及培养条件间相互作用关系不清楚，茄子花药培养愈伤组织、不定芽诱导率低的问题仍然不能很好的解决，这严重的影响着茄子花药培养技术的进一步发展。因此，加快茄子花培育种机理研究，开发出花药愈伤诱导率分化率更高的培养基，具有重要的现实需求。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对目前茄子花培育种中花药诱导愈伤组织效率较低的现状，提供了一种茄子花药诱导培养基及配制方法。本专利技术的目的是通过以下方式实现的：一种茄子花药诱导培养基及配制方法，其特征在于：所述培养基的组成为：大量元素：KNO31800～2000mg/L，NH4NO31600～1700mg/L，KH2PO4650～750mg/L，MgSO4?7H2O350～400mg/L，CaCl2?2H2O400～480mg/L；微量元素：MnSO4?4H2O20～25mg/L，ZnSO4?7H2O8.0～9.0mg/L，H3BO311～13mg/L，KI0.75～0.85mg/L，CuSO4?5H2O0.02～0.03mg/L，CoCl?6H2O0.02～0.03mg/L，NaMoO4?2H2O0.2～0.3mg/L；铁盐及络合剂：FeSO4?7H2O50～60mg/L，Na2-EDTA?2H2O70～80mg/L；有机成分：肌醇230～270mg/L，维生素B10.45～0.55mg/L，维生素B60.45～0.55mg/L，维生素C40～50μmol/L，烟酸0.45～0.55mg/L，叶酸0.25～0.35mg/L，丝氨酸55～65mg/L，丙氨酸14～18mg/L；无机添加物：AgNO37.5～8.5mg/L，活性炭1.6～2.0g/L；植物生长调节剂：2，4-D0.45～0.55mg/L，IAA0.35～0.45mg/L，ZT0.35～0.45mg/L；生理活性物质：马铃薯提取液45～55g/L，椰乳23～27g/L；碳源：葡萄糖45～55g/L，纤维二糖18～22g/L；凝固剂及其它添加物：植物凝胶4.7～5.3g/L，甘露醇35～45g/L，水解蛋白0.9～1.1g/L。所述的培养基的组分的最佳含量为：大量元素：KNO31900mg/L，NH4NO31650mg/L，KH2PO4700mg/L，MgSO4?7H2O375mg/L，CaCl2?2H2O440mg/L；微量元素：MnSO4?4H2O22.5mg/L，ZnSO4?7H2O8.5mg/L，H3BO312mg/L，KI0.8mg/L，CuSO4?5H2O0.025mg/L，CoCl?6H2O0.025mg/L，NaMoO4?2H2O0.25mg/L；铁盐及络合剂：FeSO4?7H2O55mg/L，Na2-EDTA?2H2O75mg/L；有机成分：肌醇250mg/L，维生素B10.5mg/L，维生素B60.5mg/L，维生素C8mg/L，烟酸0.5mg/L，叶酸0.3mg/L，丝氨酸60mg/L，丙氨酸16mg/L；无机添加物：AgNO38mg/L，活性炭1.8g/L；植物生长调节剂：2，4-D0.5mg/L，IAA0.4mg/L，ZT0.4mg/L；生理活性物质：马铃薯提取液50g/L，椰乳25g/L；碳源：葡萄糖50g/L，纤维二糖20g/L；凝固剂及其它添加物：植物凝胶5g/L，甘露醇40g/L，水解蛋白1g/L。所述的培养基配方的配制pH值为：5.6～6.0，最佳配制pH值为5.8。所述的培养基的配制方法包括如下步骤：（1）配制母液大量元素、微量元素、铁盐及络合剂母液分别配制成10、100、10倍的母液；肌醇单独配制成40倍母液，其它有机成分配制成500倍母液；IAA和ZT分别将称量好后用少量无水酒精溶解，然后用热的蒸馏水定容，2，4-D称量好后加入1mol/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种茄子花药诱导培养基及配制方法，其特征在于：所述培养基的组成为：大量元素：KNO3 1800～2000mg/L，NH4NO3 1600～1700mg/L，KH2PO4 650～750mg/L，MgSO4∙7H2O 350～400mg/L，CaCl2∙2H2O 400～480mg/L；微量元素：MnSO4∙4H2O 20～25mg/L，ZnSO4∙7H2O 8.0～9.0mg/L，H3BO3 11～13mg/L，KI 0.75～0.85mg/L，CuSO4∙5H2O 0.02～0.03mg/L，CoCl∙6H2O 0.02～0.03mg/L，NaMoO4∙2H2O 0.2～0.3mg/L；铁盐及络合剂：FeSO4∙7H2O 50～60mg/L，Na2‑EDTA∙2H2O 70～80mg/L；有机成分：肌醇 230～270mg/L，维生素B1 0.45～0.55mg/L，维生素B6 0.45～0.55mg/L，维生素C 40～50μmol/L，烟酸 0.45～0.55mg/L，叶酸 0.25～0.35mg/L，丝氨酸 55～65mg/L，丙氨酸 14～18mg/L；无机添加物：AgNO3 7.5～8.5mg/L，活性炭 1.6～2.0g/L；植物生长调节剂：2，4‑D 0.45～0.55mg/L，IAA 0.35～0.45mg/L，ZT 0.35～0.45mg/L；生理活性物质：马铃薯提取液 45～55g/L，椰乳23～27g/L；碳源：葡萄糖 45～55g/L，纤维二糖 18～22g/L；凝固剂及其它添加物：植物凝胶 4.7～5.3g/L，甘露醇35～45g/L，水解蛋白 0.9～1.1g/L。...

【技术特征摘要】
1.一种茄子花药诱导培养基及配制方法，其特征在于：所述培养基的组成为：
大量元素：KNO31800～2000mg/L，NH4NO31600～1700mg/L，KH2PO4650～750mg/L，MgSO4?7H2O350～400mg/L，CaCl2?2H2O400～480mg/L；
微量元素：MnSO4?4H2O20～25mg/L，ZnSO4?7H2O8.0～9.0mg/L，H3BO311～13mg/L，KI0.75～0.85mg/L，CuSO4?5H2O0.02～0.03mg/L，CoCl?6H2O0.02～0.03mg/L，NaMoO4?2H2O0.2～0.3mg/L；
铁盐及络合剂：FeSO4?7H2O50～60mg/L，Na2-EDTA?2H2O70～80mg/L；
有机成分：肌醇230～270mg/L，维生素B10.45～0.55mg/L，维生素B60.45～0.55mg/L，维生素C40～50μmol/L，烟酸0.45～0.55mg/L，叶酸0.25～0.35mg/L，丝氨酸55～65mg/L，丙氨酸14～18mg/L；
无机添加物：AgNO37.5～8.5mg/L，活性炭1.6～2.0g/L；
植物生长调节剂：2，4-D0.45～0.55mg/L，IAA0.35～0.45mg/L，ZT0.35～0.45mg/L；
生理活性物质：马铃薯提取液45～55g/L，椰乳23～27g/L；
碳源：葡萄糖45～55g/L，纤维二糖18～22g/L；
凝固剂及其它添加物：植物凝胶4.7～5.3g/L，甘露醇35～45g/L，水解蛋白0.9～1.1g/L。
2.根据权利要求1所述的茄子花药诱导培养基及配制方法，其特征在于：所述的培养基的组分的最佳含量为：
大量元素：KNO31900mg/L，NH4NO31650mg/L，KH2PO4700mg/L，MgSO4?7H2O375mg/L，CaCl2?2H2O440mg/L；
微量元素：MnSO4?4H2O22.5mg/L，ZnSO4?7H2O8.5mg/L，H3BO312mg/L，KI0.8mg/L，CuSO4?5H2O0.025mg/L，CoCl?6H2O0.025mg/L，NaMoO4?2H2O0.25mg/L；
铁盐及络合剂：FeSO4?7H2O55mg/L，Na2-EDTA?2H2O75mg/L；
有机成分：肌醇250mg/L，维生素B10.5mg/L，维生素B60.5mg/L，维生素C8mg/L，烟酸0.5mg/L，叶酸0.3mg/L，丝氨酸60mg/L，丙氨酸16mg/L；
无...

【专利技术属性】
技术研发人员：张瑞明，
申请(专利权)人：江苏强农农业技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32