赤皮青冈无菌外植体制备及初始芽诱导方法技术

本发明专利技术公开了一种赤皮青冈无菌外植体制备及初始芽诱导方法，包括外植体准备、外植体消毒处理以及初始芽诱导工序，采集赤皮青冈当年生嫩枝作为外植体，进行消毒处理后，获得的无菌外植体接种于初始芽诱导培养基中，在适宜环境中培养20‑30天后，获得生长快、活力旺盛的赤皮青冈初始芽。本发明专利技术选取当年赤皮青冈生嫩枝为组培繁殖材料，采用一定的浓度及消毒时间的多种药剂相配合的消毒处理的方式，无菌外植体获取率高，达到90%以上，使用了优化诱导培养基及培养方式，外植体褐化少，初始芽发生率高，芽苗伸长快、活力旺盛，具有较好的经济效益和社会效益。

Preparation of aseptic explant and induction method of initial bud of Cyclobalanopsis glauca

The invention discloses a Cyclobalanopsis gilva aseptic explant preparation and initial bud induction method, including explant preparation, disinfection of explants and the initial bud induction process, acquisition of Cyclobalanopsis gilva year shoots as explants, disinfected, sterile explants were obtained from the bud induction medium. 20 training in proper environment for 30 days, get Cyclobalanopsis gilva bud fast growth, strong vitality. The invention selects the year of Cyclobalanopsis gilva shoots breeding materials for tissue culture, combined with various agents with certain concentration and time of disinfection disinfection way, sterile explants obtained high rate reached more than 90%, the use of optimized induction medium and cultivation, explant browning, bud incidence shoot elongation, fast and vigorous, with good economic and social benefits.

【技术实现步骤摘要】
赤皮青冈无菌外植体制备及初始芽诱导方法
本专利技术属于植物组织培养
，尤其是涉及一种赤皮青冈无菌外植体制备及初始芽诱导方法。
技术介绍
赤皮青冈(Cyclobalanopsisgilva(Blume)Oerst),属壳斗科青冈属(CyclobalanopsisOerst)植物，为常绿乔木，高达30米，树皮暗褐色，耐贫瘠，在我国广泛分布于浙江、湖南等省。赤皮青冈心材呈深红褐色，边材呈黄褐色，纹理直，质坚重，强韧有弹性，气干密度0.85-0.91克/立方厘米，用途广泛，经济价值很高，是我国珍贵的硬材树种之一。由于大量砍伐，已沦为濒危树种。一方面，赤皮青冈种子属于顽拗性种子，其萌发时间很长，发芽率较低，且容易遭虫害，不易保存，存活率很低，有性繁殖速度慢；另一方面,有性繁殖不能保证林木的优良特性，然而，组织培养能通过无性繁殖，遗传树种的优良特性，能在短时间内快速繁殖获得大量优质的组培苗，为优质种源推广提供可能。赤皮青冈属组织培养困难的树种，主要是因为外植体消毒困难，还有在初始芽诱导培养过程中，易褐化、初始芽发生率低、芽苗不伸长、活性差等瓶颈问题，严重限制了赤皮青冈优良无性系的推广与应用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种赤皮青冈无菌外植体制备及初始芽诱导方法，其特征在于：包括外植体准备、外植体消毒处理以及初始芽诱导工序，采集赤皮青冈当年生嫩枝作为外植体，进行消毒处理后，获得的无菌外植体接种于初始芽诱导培养基中，在适宜环境中培养20‑30天后，获得生长快、活力旺盛的赤皮青冈初始芽，其操作步骤如下：（1）外植体准备：在至少连续3天晴朗的气候里，采集赤皮青冈的树冠外围生长健壮的当年生嫩枝作为外植体；外植体消毒处理：将外植体用无菌水冲洗干净后，置于体积浓度为0.1‑0.3 %的广谱杀菌剂中浸泡20‑30 min，取出外植体将其置于体积浓度为70 %酒精中浸泡1‑2 min，再移入体积浓度为5‑8 %的氯化汞溶液中...

【技术特征摘要】
1.一种赤皮青冈无菌外植体制备及初始芽诱导方法，其特征在于：包括外植体准备、外植体消毒处理以及初始芽诱导工序，采集赤皮青冈当年生嫩枝作为外植体，进行消毒处理后，获得的无菌外植体接种于初始芽诱导培养基中，在适宜环境中培养20-30天后，获得生长快、活力旺盛的赤皮青冈初始芽，其操作步骤如下：（1）外植体准备：在至少连续3天晴朗的气候里，采集赤皮青冈的树冠外围生长健壮的当年生嫩枝作为外植体；外植体消毒处理：将外植体用无菌水冲洗干净后，置于体积浓度为0.1-0.3%的广谱杀菌剂中浸泡20-30min，取出外植体将其置于体积浓度为70%酒精中浸泡1-2min，再移入体积浓度为5-8%的氯化汞溶液中浸泡10-20min，取出放于体积浓度为10-25%的双氧水和2-5滴吐温的混合液中搅拌浸泡20-30min后，最后用无菌水洗3-4次，每次冲洗3-5min；将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5-3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；（3）初始芽诱导：将步骤（2）得到的外植体接种于诱导培养基中；所述的诱导培养基为：改良1/2MS培养基+噻苯隆（TDZ）0.5-2.0mg·L-1+MT1.0-3.0mg·L-1+6-BA1.0-3.0mg·L-1+葡萄糖30g·...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐春艳，陈素云，
申请(专利权)人：唐春艳，陈素云，
类型：发明
国别省市：广西,45