赤楠萌枝快速离体培育方法技术

本发明专利技术公开了一种赤楠萌枝快速离体培育方法，包括外植体选择、外植体处理、初始芽诱导培养、增殖培养、壮芽培养和生根培养工序，采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体，对外植体进行修剪、灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于增殖培养基中经过4‑5个周期增殖培养，形成丛生芽，将丛生芽接入壮芽培养基中培养，最后将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根。本发明专利技术缩短了赤楠的育苗周期，节省育苗材料，克服了传统育苗方法中存在的育苗所需材料多、周期长等问题，大大降低了生产成本，提高了生产效率，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

Syzygium buxifolium in vitro cultivation method of fast adorable branch

The invention discloses a fast isolated branch adorable Syzygium buxifolium cultivation method, including explant selection, explant, bud induction culture, proliferation culture, strong bud culture and rooting culture process, students shoots as explants collected syzygiumbuxifolium semi lignified and robust growth when the explants were sterilized, pruning after the initial inoculation in bud inducing culture medium for the bud, the bud were cultured on proliferation medium after 4 5 cycles of proliferation, formation of buds, the clusters of medium access bud strong buds, the single bud is more than or equal to 2cm into the culture medium for rooting and rooting. The invention shortens the breeding cycle of Syzygium buxifolium, saving seedling material, overcomes the problem of materials needed, long cycle of the traditional breeding methods in the nursery there, greatly reduce the production cost, improve production efficiency, and has good economic benefits, social benefits and ecological benefits.

【技术实现步骤摘要】
赤楠萌枝快速离体培育方法
本专利技术属于植物繁殖
，涉及赤楠萌枝快速离体培育方法。
技术介绍
赤楠(SyzygiumbuxifoliumHook.etArn.),属桃金娘科薄桃属，为灌木或小乔木，嫩枝有棱，干后黑褐色。叶片革质，阔椭圆形至椭圆形，有时阔倒卵形，先端圆或钝，有时有钝尖头，基部阔楔形或钝，上面干后暗褐色，无光泽，下面稍浅色，有腺点，侧脉多而密，在上面不明显，在下面稍突起；花柱与雄蕊同等。果实球形，直径5-7毫米。花期6-8月。产中国安徽、浙江、台湾、福建、江西、湖南、广东、广西、贵州等省区。生于低山疏林或灌丛。赤楠喜光，也耐阴，耐湿，适宜温暖湿润的气候环境。耐高温，不耐严寒，短期可忍耐-13℃的极端低温，但稍长时间的0℃以下低温会使其受到严重冻害。赤楠盆景艺术价值高，奇异古老的赤楠桩景更是真价难估。其根和树皮可以入药，有平喘化痰的药用价值，果子的外皮可以食用，是乡村比较常见的野果。组织培养能通过无性繁殖，遗传树种的优良特性，能在短时间内快速繁殖获得大量优质的组培苗，为优质种源推广提供可能。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对赤楠组织培养过程中芽增殖系数低，生长缓慢等问题,提供一种生长效果好、扩繁快的赤楠嫩枝组培繁殖方法。为了实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：赤楠萌枝快速离体培育方法，包括外植体选择、外植体处理、初始芽诱导培养、增殖培养、壮芽培养和生根培养工序，采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体，对外植体进行修剪、灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于增殖培养基中经过4-5个周期增殖培养，形成丛生芽，将丛生芽接入壮芽培养基中培养，最后将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根，具体操作步骤如下：（1）外植体选择：采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体；（2）外植体处理：将外植体置于自来水下冲洗10-15min，然后去除外植体叶片，再将外植体浸泡在体积浓度0.1%的升汞溶液中，控制浸泡时间15-20min，最后用纯净水洗净药物，将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5-3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；（3）初始芽诱导培养：将步骤（2）得到的外植体接种于初始芽诱导培养基中培养，培养30-35d，初始芽萌发、生长；（4）增殖培养：将高≥1cm的初始芽接入增殖培养基中进行增殖培养，35-40d转接一次，循环往复，经4-5个周期的培养，形成丛生芽；（5）壮芽培养：将步骤（4）得到的丛生芽进行切割，4-5颗芽/丛，插入壮芽培养基中，培养35-40d，形成壮芽；（6）生根培养：将步骤（5）得到的高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根；余下小芽丛再次接种于步骤（4）的增殖培养基中继续增殖，然后再重复步骤（5），循环往复，获得大量壮芽。以上所述的初始芽诱导培养基的配方为：1/2改良WPM培养基+6-BA4.0-6.0mg/L+IAA2.0-3.0mg/L+KT1.0-2.0mg/L+ZT1.5-2.0mg/L+VC15mg/L+叶酸10mg/L+VB215mg/+琼脂3.0g/L+白糖25g/L。以上所述的增殖培养基的配方为：改良WPM培养基+6-BA6.0-8.0mg/L+IAA2.0-3.0mg/L+ZT0.5-1.0mg/L+VC15mg/L+VB215mg+天冬氨酸20mg/L+琼脂3.6g/L+白糖30g/L。以上所述的壮芽培养基的配方为：改良WPM培养基+6-BA3.0-4.0mg/L+IAA1.0-1.5mg/L+VC15mg/L+VB215mg+天冬氨酸20mg/L+琼脂3.5g/L+白糖25g/L。以上所述的生根培养基的配方为：1/2改良WPM培养基+6-BA1.5-2.5mg/L+IAA1.0-1.5mg/L+琼脂3.5g/L+白糖30g/L。以上所述改良WPM培养基的组分和体积重量比为：NH4NO3410mg/L，CaCl2·2H2O80mg/L，MgSO4·7H20270mg/L，KH2PO4170mg/L，Ca(NO3)2·4H2O180mg/L，KI0.83mg/L，MnSO4·H2O21.6mg/L，ZnSO4·7H2O8.6mg/L，Na2MoO4·2H2O0.25mg/L，CuSO4·5H2O0.025mg/L，Na2·EDTA37.4mg/L，FeSO4·7H2O26.6mg/L，肌醇200mg/L，烟酸0.5mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，盐酸硫胺素1.0mg/L，甘氨酸2.0mg/L。以上步骤（3）所述的初始芽诱导培养的培育控制条件为：光培养、光照500-1000lx，培养温度20±1℃；步骤（4）所述的增殖培养、步骤（5）所述的壮芽培养、步骤（6）所述的生根培养的培育控制条件均为：光培养，光照2500-4000lx，每日光照16h，培养温度25-28℃。相对于现有技术，本专利技术具有的优点和有益效果如下：1、本专利技术以赤楠当年生嫩枝作为外植体，经过初始芽培养基培养，初始芽萌动率90%以上；经过4-5个周期增殖培养，形成丛生芽，芽增殖系数5/30d-7/30d，再将丛生芽接入壮芽培养基中培养，最后将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根，从而缩短了赤楠的育苗周期，节省育苗材料，克服了传统育苗方法中存在的育苗所需材料多、周期长等问题，大大降低了生产成本，提高了生产效率。2、本专利技术将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根，余下小芽丛继续增殖培养，使得材料能够多次继代，实现大量增殖，规模化生产壮芽，实现黄樟油素型樟树的扩繁。3、本专利技术对WPM基本培养基进行了改良，同时重点调整了与赤楠出芽壮芽相关元素，使得培养基更科学，更有针对性，更易促使赤楠芽诱导的发生、增殖和壮芽，效果显著。4、本专利技术操作过程简便，培养周期短，继代芽产量大,并且质量优，增殖系数达到5以上的组培苗产业化技术要求，具有很好的经济效益、生态效益和社会效益。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。实施例1：（1）外植体选择：采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体；（2）外植体处理：将外植体置于自来水下冲洗10min，然后去除外植体叶片，再将外植体浸泡在体积浓度0.1%的升汞溶液中，控制浸泡时间15min，最后用纯净水洗净药物，将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5-3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；（3）初始芽诱导培养：将步骤（2）得到的外植体接种于初始芽诱导培养基中培养，置于光培养、光照500lx，培养温度20±1℃的环境中培养30-35d，初始芽萌发、生长；所述的初始芽诱导培养基的配方为：1/2改良WPM培养基+6-BA4.0mg/L+IAA2.0mg/L+KT1.0mg/L+ZT1.5mg/L+VC15mg/L+叶酸10mg/L+VB215mg/+琼脂3.0g/L+白糖25g/L；（4）增殖培养：将高≥1cm的初始芽接入增殖培养基中进行增殖培养，置于光培养，光照2500lx，每日光照16h，培养温度25-28℃的环境中，35-40d转接一次，循环往复，经4-5个周期的培养，形成丛生芽；所述的增殖培养基的配方为：改良WPM培养基+6-BA6.0mg/L+IAA2.0mg/L+ZT0.5m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种赤楠萌枝快速离体培育方法，其特征在于：包括外植体选择、外植体处理、初始芽诱导培养、增殖培养、壮芽培养和生根培养工序，采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体，对外植体进行修剪、灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于增殖培养基中经过4‑5个周期增殖培养，形成丛生芽，将丛生芽接入壮芽培养基中培养，最后将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根，具体操作步骤如下：（1）外植体选择：采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体；（2）外植体处理：将外植体置于自来水下冲洗10‑15 min，然后去除外植体叶片，再将外植体浸泡在体积浓度 0.1%的升汞溶液中，控制浸泡时间15‑20 min，最后用纯净水洗净药物，将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5‑3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；（3）初始芽诱导培养：将步骤（2）得到的外植体接种于初始芽诱导培养基中培养，培养30‑35 d，初始芽萌发、生长；（4）增殖培养：将高≥1cm的初始芽接入增殖培养基中进行增殖培养，35‑40 d转接一次，循环往复，经4‑5个周期的培养，形成丛生芽；（5）壮芽培养：将步骤（4）得到的丛生芽进行切割，4‑5颗芽/丛，插入壮芽培养基中，培养35‑40 d，形成壮芽；（6）生根培养：将步骤（5）得到的高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根；余下小芽丛再次接种于步骤（4）的增殖培养基中继续增殖，然后再重复步骤（5），循环往复，获得大量壮芽。...

【技术特征摘要】
1.一种赤楠萌枝快速离体培育方法，其特征在于：包括外植体选择、外植体处理、初始芽诱导培养、增殖培养、壮芽培养和生根培养工序，采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体，对外植体进行修剪、灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于增殖培养基中经过4-5个周期增殖培养，形成丛生芽，将丛生芽接入壮芽培养基中培养，最后将高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根，具体操作步骤如下：（1）外植体选择：采集半木质化、生长健壮的当年生赤楠嫩枝作为外植体；（2）外植体处理：将外植体置于自来水下冲洗10-15min，然后去除外植体叶片，再将外植体浸泡在体积浓度0.1%的升汞溶液中，控制浸泡时间15-20min，最后用纯净水洗净药物，将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5-3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；（3）初始芽诱导培养：将步骤（2）得到的外植体接种于初始芽诱导培养基中培养，培养30-35d，初始芽萌发、生长；（4）增殖培养：将高≥1cm的初始芽接入增殖培养基中进行增殖培养，35-40d转接一次，循环往复，经4-5个周期的培养，形成丛生芽；（5）壮芽培养：将步骤（4）得到的丛生芽进行切割，4-5颗芽/丛，插入壮芽培养基中，培养35-40d，形成壮芽；（6）生根培养：将步骤（5）得到的高≥2cm的单芽插入生根培养基中诱导生根；余下小芽丛再次接种于步骤（4）的增殖培养基中继续增殖，然后再重复步骤（5），循环往复，获得大量壮芽。2.根据权利要求1所述的赤楠萌枝快速离体培育方法，其特征在于：所述的初始芽诱导培养基的配方为：1/2改良WPM培养基+6-BA4.0-6.0mg/L+IAA2.0-3.0mg/L+KT1.0-2.0mg/L+ZT1.5-2.0mg/L+VC15mg/L+叶酸10mg/L+VB215mg/+琼脂3.0g/L+白糖25g/L。3.根据权利要求1所述的赤楠萌枝快速离体培育方法，其特征在于：所述的增殖培养基的配方...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐春艳，陈素云，
申请(专利权)人：唐春艳，陈素云，
类型：发明
国别省市：广西,45