浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法技术

本发明专利技术公开了一种浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法，包括类原球茎诱导、增殖、分化及生根步骤。在液体培养基中，类原球茎诱导的优选培养条件为TDZ 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L，诱导率为62.5%；在固体培养基中，类原球茎诱导的优选培养条件为TDZ 0.6mg/L+ NAA 0.2mg/L+6‑BA 2.0mg/L，诱导率为59.3%。类原球茎增殖的优选培养条件为稀效唑1.5 mg/L+6‑BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L，增殖系数为8.4，其中稀效唑是类原球茎增殖的主要因子。类原球茎分化的优选条件为6‑BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L，分化率为87.3%。植株生根诱导的优选培养条件为1/2 MS+NAA 1.0mg/L+IBA 1.0mg/L，生根率达100%。

Methods to establish the rapid propagation system of Zhejiang jinxianlian tissue culture

The invention discloses a method for establishing Zhejiang Anoectochilus tissue culture rapid propagation system, including PLB Induction, proliferation, differentiation and rooting steps. In the liquid culture medium, culture conditions optimization of PLB Induction for TDZ 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L, the induction rate was 62.5%; in the solid culture medium, culture conditions optimization of PLB Induction for TDZ 0.6mg/L+ NAA 0.2mg/L+6 BA 2.0mg/L, the induction rate was 59.3%. Optimization of culture conditions for the proliferation of protocorm like body of Uniconazole 1.5 mg/L+6 BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L, the multiplication coefficient is 8.4, which is the main factor of Uniconazole protocorm-like proliferation. The optimum conditions of protocorm differentiation for 6 BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L, differentiation rate was 87.3%. Plant root induction optimization of culture condition for 1/2 MS+NAA 1.0mg/L+IBA 1.0mg/L, the rooting rate was 100%.

【技术实现步骤摘要】
浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法
本专利技术属于植物组培领域，尤其是一种涉及浙江金线莲组织培养体系的建立方法。
技术介绍
浙江金线莲（Anoectochiluszhejiangensis）为兰科开唇兰属多年生珍稀草本植物，主要分布在浙江、福建等地，作为一种珍贵中草药，具有广阔的开发利用前景。浙江金线莲的生物学特性及药理活性与同属基原植物金线莲相近，对生长条件要求比较严格，自然萌发率不到千分之一，且自然繁殖时间长且繁殖率不高，再加上近年来人为大量采挖，导致浙江金线莲野生资源日趋枯竭，因此保护野生浙江金线莲已经到了刻不容缓的地步。植物组织培养是保护濒危植物的有效技术手段，可在短时间内繁殖出大量新生植株。在组织培养中，培养基的筛选将直接影响到组织培养的成功与否，植物激素的浓度配比将直接影响到植株快繁的效率。因此培养基与激素配比的选择对组织培养的成功与否具有重要作用。迄今有关金线莲基原植物，如中国台湾金线莲、金线莲、福建金线莲等快速繁殖体系的研究已有报道[王勇.金线莲组织培养新体系建立及优化.北方园艺,2010,13:178-179；陈永快,林一心,邹晖等.福建金线莲和中国台湾金线莲本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法，其特征是：包括类原球茎诱导、增殖、分化及生根步骤，其中，类原球茎的诱导、增殖及分化以MS为基本培养基，生根以1/2 MS为基本培养基，加入植物生长调节剂，pH 5.8，液体培养基蔗糖质量百分比浓度为5.0%，固体培养基蔗糖质量百分比浓度为3.0%，类原球茎分化培养基中添加质量含量10%香蕉泥；１）类原球茎诱导：采用液体培养基或固体培养基，液体培养基中含 TDZ 0.6 mg/L + NAA 0.4 mg/L；固体培养基含TDZ 0.6 mg/L + NAA 0.2 mg/L + 6‑BA 2.0 mg/L；2）类原球茎增殖：增值培养基中含稀效唑1....

【技术特征摘要】
1.一种浙江金线莲组织培养快速繁殖体系的建立方法，其特征是：包括类原球茎诱导、增殖、分化及生根步骤，其中，类原球茎的诱导、增殖及分化以MS为基本培养基，生根以1/2MS为基本培养基，加入植物生长调节剂，pH5.8，液体培养基蔗糖质量百分比浓度为5.0%，固体培养基蔗糖质量百分比浓度为3.0%，类原球茎分化培养基中添加质量含量10%香蕉泥；１）类原球茎诱导：采用液体培养基或固体培养基，液体培养基中含TDZ0.6mg/L+NAA0.4mg/L；固体培养基含TDZ0.6mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L；2）类原球茎增殖：增值培养基中含稀效唑1.5mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L，其中稀效唑是类原球茎增殖的主要因子；3）类原球茎分化：对类原球茎进行分化培养，10天类原球茎球体顶部开始突起变尖，变绿，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈常理，金关荣，骆霞虹，唐楠楠，余杨，李珊，程舟，朱关林，
申请(专利权)人：浙江省萧山棉麻研究所，
类型：发明
国别省市：浙江,33