水曲柳悬浮培养体系的建立方法技术

本发明专利技术提供了一种水曲柳悬浮细胞体系的建立方法，1）以水曲柳茎段作为外植体，诱导愈伤组织，在添加激素TDZ和BA、蔗糖、琼脂的WPM固体培养基上获得愈伤组织；2）将步骤1）中得到的愈伤组织接种到添加激素BA和2,4-D、蔗糖的WPM液体培养基中，振荡培养。3）培养10-15d继带一次，连续继带培养3-5个继带，获得生长均匀、快速增殖的悬浮细胞系。本发明专利技术具有繁殖速度快、培养规模大和提供大量均匀植物细胞培养物的特点。

【技术实现步骤摘要】

一种利用基本培养基和附加不同激素成份对，本专利技术属于植物细胞工程

技术介绍
水曲柳(Fraxinusm andshu rica.)属于木犀科白腊树属，是一种高大落叶乔木，为我国东北珍贵的“三大硬阔”之一，木材材质优良，纹理美观，广泛应用于各领域。国外已有研究发现其树皮中含有香豆素类成分，包括秦皮甲素(Esculin)，秦皮乙素(Esculetin),秦皮苷(Fraxin),异秦皮定(Isofraxidin),白腊树精(Mandshurin, Fraxinol) 0香豆素类化合物不仅能直接抑制癌细胞，而且可以通过增 强机体免疫力产生抗癌作用。但目前香豆素类化合物主要来自于木樨科白蜡树树皮和叶中，这极大的造成了资源的浪费和破坏，不利于可持续发展。如果能运用细胞工程手段，利用细胞大量培养及代谢产物分离，提高水曲柳中香豆素类物质含量，同时避免季节性对生产带来的影响，这将对水曲柳中香豆素的生产与利用具有重要的意义。以单细胞或小细胞团作为对象进行水曲柳细胞、基因工程等研究具有很大优势，因为单细胞或小细胞团受周围细胞和微环境影响较小，而且遗传上比较稳定；生长速度快，通过生物技术手段对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水曲柳（Fraxinusm？andshu？rica.）愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，包括以下步骤：(1)水曲柳的外植体消毒后接种在启动培养基上，得到愈伤组织；(2)将步骤(1)所得岛的无菌愈伤组织，切成小块，接种到液体培养基中；(3)置于摇床上振荡、光照培养；(4)继代培养后可得到悬浮细胞系。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：齐凤慧，詹亚光，曾凡锁，
申请(专利权)人：东北林业大学，齐凤慧，詹亚光，
类型：发明
国别省市：