本发明专利技术属于组织培养技术的植物再生领域，具体涉及到一种萝芙木诱导培养基及其应用，所述的诱导培养基组成为2/3MS培养基、0.1‑0.2mg/L N‑苯基‑N’‑1,2,3‑噻二唑‑5‑脲、0.1‑0.2mg/L 2,4‑二氯苯氧乙酸和800‑1500mg/L萝芙木乳汁，本发明专利技术公开的诱导培养基对萝芙木具有诱导速度快，植株健壮的优点，并且培养的萝芙木幼苗移栽成活率在90％以上，而且本发明专利技术培养基成分来源广泛，诱导速度快，适合大规模培养。
A devilpepper induction medium and its application
The invention belongs to the field of regenerative plant tissue culture technology, in particular to a devilpepper inducing medium and application thereof, wherein the induction medium was 2/3MS medium, 0.1 0.2mg/L N N '1,2,3 phenyl Thiadiazolen two triazole 5 urea, 0.1 0.2mg/L 2,4 two chlorobenzene oxygen acetic acid and 800 1500mg/L from milk, inducing medium for inducing devilpepper speed is disclosed, the advantages of robust plants, and the cultivation of Rauvolfia seedlings survival rate of more than 90%, and the composition of culture medium induced a wide range of sources, fast speed, suitable for large-scale cultivation.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于组织培养技术的植物再生领域，具体涉及到一种萝芙木诱导培养基及其应用。
技术介绍
萝芙木：直立常绿灌木，高可达3m，具乳汁，属于一种药材，功能主治镇静，降压，活血止痛，清热解毒。用于高血压病，头痛，眩晕，失眠，高热不退，外用治跌打损伤，毒蛇咬伤等。萝芙木根中分离出利血平、阿吗碱、萝莱碱、蛇根亭碱、阿吗灵、山马蹄碱、萝芙木甲素、锥洛斯明碱、霹雳萝芙辛碱、一种单萜类生物碱等多种生物碱，含量为1～2％，其中利血平具有良好的降压作用。萝芙木中尚含熊果酸0.2％，熊果酸的抗肿瘤作用广泛，极有可能成为低毒有效的新型抗癌药物。因此，萝芙木具有很高的药用价值，而且萝芙木的种植也已经得到国家的推广。由于连年的采挖，资源急剧减少，从20世纪80年代中期开始，生产厂家就把药用部位由根扩展到全株，而且为保护野生资源，满足企业生产需求，越来越多的研究机构开展了萝芙木规范化种植研究。萝芙木的繁殖主要是种子与扦插繁殖，但是种子繁殖发芽率低，生长速度慢，周期长等缺点，而扦插繁殖操作复杂，成活率低等缺点而不能广泛推广，因此，为了促进萝芙木快速繁殖，对萝芙木组织进行了培养基的研究，摆脱了外部环境对植株的影响，而且可以对优良的品种进行筛选，对品种进行优化，因此，植物培养基对萝芙木的快速繁殖十分重要。《红果萝芙木植物组织培养及快速繁殖》，张丽珍，等，江苏农业科学出版社，2015年第43卷第6期公开了红果萝芙木不同时期的培养基，以红果萝芙木茎段为外植体，研究其再生条件，结果表明：丛生芽诱导培养基为MS+1.0mg/L6－BA+0.05mg/LIBA；继代增殖、壮苗培养基分别为MS+0.3～0.5mg/L6－BA+0.02mg/LIBA、MS+0.1～0.2mg/L6-BA+0.01mg/LIBA；根分化的最适培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+0.2mg/LIBA。公开号为101731149A的中国专利申请公开了一种利用组织培养技术快速繁殖云南萝芙木的方法，该专利技术以萝芙木嫩枝带芽茎段作外植体，接种在启动培养基上诱导腋芽产生，启动培养基组成为MS+2.0-4.0mg/LBA+0.05-0.1mg/LNAA。增殖培养MS+2.5-5.0mg/LBA+0.1-0.5mg/LNAA，增殖系数为8-12，每4-5周重复继代一次。生根培养基为添加1.0mg/LNAA或IBA或NAA+IBA＝1.0mg/L的1/2MS培养基，5-6周后将生根苗移栽到炼苗基质中，20-30℃保湿遮阴炼苗3-4周转栽或大田种植，成活率达90％。此专利技术方法操作简单，繁殖速度快，遗传稳定性好，为工厂化育苗提供技术支撑。但是上述技术中诱导培养使用的是1个单位的MS培养基，铵态氮含量过高，容易伤害外植体，造成成活率低。
技术实现思路
为了解决现有技术的不足，进一步加快萝芙木组织的诱导繁殖，提高成活率，本专利技术公开了一种萝芙木诱导培养基及其应用，本专利技术公开的培养基是在改良MS培养基的基础上，添加适量的植物激素，并且加入了萝芙木乳汁，极大地加快了萝芙木的诱导速度。本专利技术技术方案如下所示：一种萝芙木诱导培养基，所述的诱导培养基组成为2/3MS培养基、0.1-0.2mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.1-0.2mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和800-1500mg/L萝芙木乳汁。进一步的，所述的诱导培养基组成为2/3MS培养基、0.16mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.15mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和1200mg/L萝芙木乳汁。N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲：CAS.NO：51707-55-2其中MS培养基的配比为：大量元素为：NH4NO31650，KNO31900，CaCl2·2H2O440，MgSO4·7H2O370，KH2PO4170；微量元素：KI0.83，H3BO36.2，MnSO4·4H2O22.3，ZnSO4·7H2O8.6，Na2MoO4·2H2O0.25，CuSO4·5H2O0.025，CoCl2·6H2O0.025；铁盐：FeSO4·7H2O27.8，Na2-EDTA·2H2O37.3；有机物质：肌醇100，烟酸0.5，盐酸吡哆醇(维生素B6)0.5，盐酸硫胺素(维生素B1)0.1，甘氨酸2.0，单位为mg/L。进一步的，所述的萝芙木乳汁采用冷冻的萝芙木乳汁。进一步的，所述的冷冻的萝芙木乳汁为：将新鲜萝芙木乳汁采摘后迅速冷藏，为了防止污染与保持营养，我们要对新鲜萝芙木乳汁进行冷藏处理。进一步的，所述的冷冻时间为2-4天，冷冻温度为1-3℃。进一步的，所述的冷冻时间为3天，冷冻温度为2℃。本专利技术还提供了所述的培养基在萝芙木诱导组织再生中的应用。所述的萝芙木诱导培养基的制备方法：将N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、2,4-二氯苯氧乙酸和萝芙木乳汁，加入到稀释后的MS培养基中，搅拌均匀，使用1M的NaOH或是HCl溶液将pH调整至5.8，120℃灭菌25min，即得。由于1个单位的MS培养基，铵态氮含量过高，容易伤害外植体，造成成活率低，本专利技术对MS培养基进行了稀释，在培养诱导期时，添加植物生长激素与萝芙木乳汁，发现与只添加植物生长激素的培养基相比，本专利技术培育出来的幼苗更加健壮。与现有技术相比，本专利技术是对MS的进一步改良，添加的萝芙木乳汁促进了萝芙木的诱导再生。具体实施方式通过以下具体实施例对本专利技术作进一步说明，使本领域技术人员更加理解本专利技术技术方案，但并非是对本专利技术的限制。本专利技术培养基购自北京拜尔迪生物技术有限公司供应的Sigma的MS培养基。实施例1一种萝芙木诱导培养基，组成为2/3MS培养基、0.16mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.15mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和1200mg/L萝芙木乳汁。所述的萝芙木乳汁为冷冻萝芙木乳汁，冷冻时间为3天，冷冻温度为2℃。所述的萝芙木诱导培养基的制备方法：将N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、2,4-二氯苯氧乙酸和萝芙木乳汁，加入到稀释后的MS培养基中，搅拌均匀，使用1M的HCl溶液，将pH调整至5.8，120℃灭菌25min，即得。实施例2一种萝芙木诱导培养基，组成为2/3MS培养基、0.1mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.1mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和1500mg/L萝芙木乳汁。所述的萝芙木乳汁为冷冻萝芙木乳汁，冷冻时间为2天，冷冻温度为3℃。所述的萝芙木诱导培养基的制备方法与实施例1类似。实施例3一种萝芙木诱导培养基，组成为2/3MS培养基、0.2mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.2mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和800mg/L萝芙木乳汁。所述的萝芙木乳汁为冷冻萝芙木乳汁，冷冻时间为4天，冷冻温度为1℃。所述的萝芙木诱导培养基的制备方法与实施例1类似。对比例1一种萝芙木诱导培养基，组成为MS培养基、0.16mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲和0.15mg/L2,4-二氯苯氧乙酸。与实施例1的区别是，所述的诱导培养基采用1个单位的MS培养基，不添加萝芙木乳汁。所述的萝芙木诱导培养基本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种萝芙木诱导培养基，其特征在于，所述的诱导培养基组成为2/3MS培养基、0.1‑0.2mg/L N‑苯基‑N’‑1,2,3‑噻二唑‑5‑脲、0.1‑0.2mg/L 2,4‑二氯苯氧乙酸和800‑1500mg/L萝芙木乳汁。
【技术特征摘要】
1.一种萝芙木诱导培养基，其特征在于，所述的诱导培养基组成为2/3MS培养基、0.1-0.2mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.1-0.2mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和800-1500mg/L萝芙木乳汁。2.根据权利要求1所述的萝芙木诱导培养基，其特征在于，所述的诱导培养基组成为2/3MS培养基、0.16mg/LN-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.15mg/...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡波，钟勇财，谢玉国，
申请(专利权)人：江西宜信堂医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36
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