一种红松胚性细胞增殖的悬浮培养方法技术

本发明专利技术公开了一种红松胚性细胞增殖的悬浮培养方法

【技术实现步骤摘要】
一种红松胚性细胞增殖的悬浮培养方法


[0001]本专利技术涉及细胞培养
，更具体的说是涉及一种红松胚性细胞增殖的悬浮培养方法
。

技术介绍

[0002]红松
(Pinus koraiensis)
是国际著名珍贵用材树种和4大食用松树种之一，是我国东北林区人工种植和研究历史最长
、
关注度最高
、
经济价值和生态价值巨大的珍贵乡土树种；是黑龙江省的长白山和小兴安岭林区最为重要的木材生产和坚果生产树种
。
[0003]生产上，红松以播种育苗为主，种子存在休眠现象，因催芽情况播种率不稳定；红松良种采用嫁接方式繁殖，但种穗量的有限等多方面原因难以满足目前市场的需求
。
[0004]作为一种高效的植物无性繁殖技术，体细胞胚胎发生是利用植物细胞全能性理论实现植株再生的重要途径之一，同时也是一种利用人工手段短周期内实现生产增益的措施，尤其对繁殖周期较长的针叶树树种来说具有巨大的应用价值
(Grossnickle 2011
；/>Klimasze本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种红松胚性细胞增殖的培养基组合，其特征在于，包括以下培养基：培养基
①
：
1/2MLV
培养基附加琼脂
6.0g/L、L
‑
谷氨酰胺
500mg/L、
蔗糖
30g/L、2,4
‑
D 2.0mg/L、BA 1.0mg/L、
水解酪蛋白
500mg/L、
肌醇
1000mg/L
；培养基
②
：
1/2MLV
培养基附加蔗糖
20g/L、
水解酪蛋白
500mg/L、L
‑
谷氨酰胺
500mg/L、2,4
‑
D 1.0mg/L、BA 0.5mg/L
；培养基
③
：
1/2MLV
培养基附加蔗糖
20g/L、
水解酪蛋白
1000mg/L、L
‑
谷氨酰胺
500mg/L、
肌醇
1000mg/L、
五氮杂胞苷
1.0mg/L、2,4
‑
D 0.5mg/L、6
‑
BA 0.25mg/L。2.
基于权利要求1所述培养基组合的红松胚性细胞增殖的悬浮培养方法，包括以下步骤：
(1)
红松外植体的消毒方法：将种子消毒，冲洗，剥除种子外种皮
、
胚乳，取合子胚；
(2)
红松胚性愈伤组织诱导：将合子胚接种于培养基
①
诱导至获得胚性愈伤；
(3)
红松胚性愈伤悬浮培养初始材料的筛选；
(4)
红松胚性愈伤悬浮初级培养：将步骤
(3)
挑选得到的胚性愈伤组织转接到培养基
②
中进行悬浮培养；获得胚性细胞悬浮物；
(5)
红松胚性细胞悬浮增殖培养：将胚性细胞悬浮物过筛，沉淀处理，弃掉上清液取，取沉积胚性细胞加入培养基
③
进行悬浮培养后，取培养后的沉积胚性细胞接入新鲜培养基
③
中进行继代增殖悬浮振荡培养，获得红松胚性悬浮细胞系
。3.
如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，步骤
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张建瑛，殷东生，赵晟阳，王丽娜，赵存毅，李丽丽，舒钰，张宇，邱新宇，
申请(专利权)人：黑龙江省林业科学研究所，
类型：发明
国别省市：