一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法，其特征在于，步骤如下：首先提取目的病毒的RNA片段；建立扩增反应体系：包括RNA、DNA聚合缓冲液以及适当的反转录酶等；将上述物质与三倍提及的医用蒸馏水混合，轻微振荡；将引物引入其中；35摄氏度的环境下进行温水浴；琼脂糖凝胶泳进行电测；高速离心；悬浮；弃上清；与HA基因区进行对比即可；其中所述琼脂糖凝胶电泳质量百分比为百分之一到百分之二；所述医用蒸馏水在使用前需要在室温下温热至少24小时，使其温度至少保持在25摄氏度。本发明专利技术的有益效果是，实验的特异性和灵敏性比较高，能够配合阐述核酸序列结构，操作相对简单，对条件要求不高。

【技术实现步骤摘要】
一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法
本专利技术涉及一种生化实验方法，具体来说是指一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法。
技术介绍
禽流感病毒(AIV)属甲型流感病毒。流感病毒属于RNA病毒的正黏病毒科，分甲、乙、丙3个型。其中甲型流感病毒多发于禽类，一些亚型也可感染猪、马、海豹和鲸等各种哺乳动物及人类；乙型和丙型流感病毒则分别见于海豹和猪的感染。一般来说，禽流感病毒与人流感病毒存在受体特异性差异，禽流感病毒是不容易感染给人的。个别造成人感染发病的禽流感病毒可能是发生了变异的病毒。变异的可能性一是两种以上的病毒进入同一细胞进行重组，如猪既可感染人流感病毒，又可能感染禽流感病毒，每种病毒都具有8个基因片段，从理论上讲，可以形成256个新的重组病毒；二是病毒基因位点由于某种因素的影响，1983年4月，美国宾夕法尼亚州曾暴发H5N2型病毒引起的鸡和火鸡低致病性禽流感，由于没有及时得到有效控制，到同年10月份，同样的H5N2型毒株突然由低致病性变成高致病性，造成禽类大量死亡。因此对于禽流感病毒的研究刻不容缓。
技术实现思路
本专利技术为克服上述技术不足，具体技术方案如下: 一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法，步骤如下:首先提取目的病毒的R N A片段；建立扩增反应体系:包括R NA、D N A聚合缓冲液以及适当的反转录酶等；将上述物质与三倍提及的医用蒸馏水混合，轻微振荡；将引物引入其中；3 5摄氏度的环境下进行温水浴；琼脂糖凝胶泳进行电测；高速离心；悬浮；弃上清；与11 A基因区进行对比即可。本专利技术中，其中所述琼脂糖凝胶电泳质量百分比为百分之一到百分之二。本专利技术中，所述医用蒸馏水在使用前需要在室温下温热至少2 4小时，使其温度至少保持在2 5摄氏度。本专利技术的有益效果是，实验的特异性和灵敏性比较高，能够配合阐述核酸序列结构，操作相对简单，对条件要求不高。具体实施例具体步骤如下:首先提取目的病毒的R N A片段；建立扩增反应体系:包括R NA、D N A聚合缓冲液以及适当的反转录酶等；将上述物质与三倍提及的医用蒸馏水混合，轻微振荡；将引物引入其中；3 5摄氏度的环境下进行温水浴；琼脂糖凝胶泳进行电测；高速离心；悬浮；弃上清；与11 A基因区进行对比即可；其中所述琼脂糖凝胶电泳质量百分比为百分之一到百分之二 ；所述医用蒸馏水在使用前需要在室温下温热至少2 4小时，使其温度至少保持在2 5摄氏度。以上所述，仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内，根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变，都·应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法，其特征在于，步骤如下：首先提取目的病毒的ＲＮＡ片段；建立扩增反应体系：包括ＲＮＡ、ＤＮＡ聚合缓冲液以及适当的反转录酶等；将上述物质与三倍提及的医用蒸馏水混合，轻微振荡；将引物引入其中；３５摄氏度的环境下进行温水浴；琼脂糖凝胶泳进行电测；高速离心；悬浮；弃上清；与ＨＡ基因区进行对比即可。

【技术特征摘要】
1.一种对亚型禽流感病毒H5N1的检测方法，其特征在于，步骤如下:首先提取目的病毒的R N A片段；建立扩增反应体系:包括R N A、D N A聚合缓冲液以及适当的反转录酶等；将上述物质与三倍提及的医用蒸馏水混合，轻微振荡；将引物引入其中；3 5摄氏度的环境下进行温水浴；琼脂糖凝胶泳进行电测；高速离心；悬浮；弃上清；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李刚，
申请(专利权)人：李刚，
类型：发明
国别省市：