【技术实现步骤摘要】
检测口蹄疫病毒通用型的RT-PCR引物及试剂盒
本专利技术属于动物病毒分子生物检测
,具体涉及一对检测口蹄疫病毒通用型的RT-PCR引物及试剂盒。
技术介绍
口蹄疫(Foot and mouth disease, FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性高度接触性传染病,主要侵害偶蹄动物,如牛、猪、羊等。其特征是发热、皮肤或粘膜发生水泡溃疡,尤其是在口腔和蹄叉部位。口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus, FMDV)属于小 RNA病毒科,约有8500个核苷酸组成。病毒基因组由一个开放性阅读框(0RF)、一个5'端非编码区(NCR)和3'端非编码区(NCR)组成,ORF编码由4种结构蛋白(VP1、VP2、VP3和VP4)、RNA聚合酶(3D)、蛋白酶(L、2A、3C)以及其他非结构蛋白(如3A等)组成。口蹄疫病毒包括7个血清型和60余个亚型,7个血清型为:A型、亚洲I型、O型、C型、南非I型、II型、III型,各型之间无交叉保护反应,同一血清不同分离株之间也存在广泛的抗原变异;由于亚型分类越来越复杂,现在由用于分析基因组遗传衍化关系的基因型代替。口蹄疫在亚洲主要流行有A、0型、C型、亚洲I型4个血清型,截至目前,我国仅见O型、A型、亚洲I型三个血清型的口蹄疫。A型在1960—1975年曾流行20多省。目前,A型口蹄疫病毒在我国已广为扩散,是仅次于O型口蹄疫的世界主要流行毒株。广西地处我国沿海地区西南部, 东部毗邻广东,西南与越南为界,是我国边疆省区之一。而越南口蹄疫疫情复杂,O型、亚洲I型、A型时有发生。2013年 ...
【技术保护点】
一对检测口蹄疫病毒通用型的RT?PCR引物,其特征在于,所述引物的上游引物核苷酸序列为5′?CTGGGCCCTTCTTCTTC?3′,下游引物核苷酸序列为5′?GCTGTTTCTCTGCTCTCTC?3′。
【技术特征摘要】
1.一对检测口蹄疫病毒通用型的RT-PCR引物,其特征在于,所述引物的上游引物核苷酸序列为5 ' -CTGGGCCCTTCTTCTTC-3 ',下游引物核苷酸序列为.5' -GCTGTTTCTCTGCTCTCTC-3'。2.一种检测口蹄疫病毒通用型的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物。3.根据权利要求2所述检测口蹄疫病毒通用型的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:RNA提取试剂、RT反应试剂、PCR反应试剂、阴性对照和阳性对照。4.根据权利要求3所述检测口蹄疫O型、A型、亚I型病毒通用型的试剂盒,其特征在于: (1)所述RNA提取试剂包括=Trizol裂解液、氯仿、异丙醇和75%的DEPC乙醇; (2)所述RT反应试剂包括:5Xbuffer缓冲液、dNTPs、HIR和下游引物Wd; (3)所述PCR 反应试剂包括:Taq DNA 酶、IOXbuffer 缓冲液、dNTPs,MgCl2 和 cDNA ; (4)所述阴性对照包括:DEPC水; (5)所述阳性对照包括:口蹄疫O型全病毒、口蹄疫A型全病毒和口蹄疫亚I型全病毒。5.一种如权利要求4所述检测口蹄疫病毒通用型试剂盒的使用方法,包括以下步骤: (1)病毒RNA的提取: 取待检样品、阳性对照、阴性对照各500μ L于1.5ml灭菌无RNA酶污染的EP管中,加入等量Trizol裂解液进行裂解,充...
【专利技术属性】
技术研发人员:冯淑萍,颜健华,胡巧云,其他发明人请求不公开姓名,
申请(专利权)人:广西壮族自治区动物疫病预防控制中心,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。