快速检测猪萨佩罗病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术公开了首个快速检测猪萨佩罗病毒感染的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有a)RNA裂解液，b)PrimeScript?RTEnzymeMixI，c)逆转录反应液，d)定量引物F及R，e)SYBR?PremixExTaqII，f)标准阳性模板，g)阴性对照品等。采用本发明专利技术的试剂盒进行检测，简化了操作步骤，缩短了反应时间，减少了污染几率，并且能够提高检测的准确度和速度，一个样本可在3个小时内完成检测。荧光定量PCR在扩增完成后可以直接通过标准曲线定量起始病毒的拷贝数，能为流行病学提供可靠信息，该试剂盒还可以应用于（抗）猪萨佩罗病毒药物的研究，对生物制品进行定量检测及质量监控；应用前景十分广泛。

【技术实现步骤摘要】
快速检测猪萨佩罗病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用
本专利技术属于生物
，具体涉及首次专利技术一种快速检测猪萨佩罗病毒的SYBRGree I实时荧光定量PCR试剂盒。该试剂盒可高效方便地对临床样本中猪萨佩罗病毒进行检测及定量，可以进行猪萨佩罗病毒的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
技术介绍
猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus, PSV)是一类无囊膜,微球型,单股正链RNA病毒，属于小RNA病毒科，由于最初从腹泻猪的肠道中分离得到，所以先前称为猪肠道病毒8 型(Porcine enterovirus 8，PEV-8),归为猪肠道病毒 II 类群(Porcine enterovirus A,PEV A)。近年来，由于病毒基因组学及分子遗传进化分析的发展，该病毒已与亲缘关系较近的一类猿猴及禽小RNA病毒单独划分为萨佩罗病毒属，其也改称为猪萨佩罗病毒。PSV主要通过口腔进入体内，也有通过呼吸道等途径传播的，在粪便、呼吸道的分泌物及其污染物，都可携带病毒，导致其它易感猪的感染。PSV进入机体后，常引起腹泻，有时可引起病毒血症本文档来自技高网...

【技术保护点】
快速定量检测猪萨佩罗病毒的荧光定量PCR试剂盒，试剂盒包括：a)RNA裂解液，b)?PrimeScript??RT?Enzyme?Mix?I，c)逆转录反应液，d)定量引物F及R,?e)?SYBR??Premix?Ex?Taq?II，f)?ROX?Reference?Dye，g)标准阳性模板，h)阴性对照品，i)无菌双蒸水????所述逆转录反应液含有5×PrimeScript??Buffer，Oligo?dT?Primer，Random?6?mers引物，标准阳性模板是含有猪嵴病毒特异性目的片段的质粒，阴性对照样品由SPF猪粪便样品中提取RNA，经过逆转录获得的cDNA样品，SYBR??Pre...

【技术特征摘要】
1.快速定量检测猪萨佩罗病毒的荧光定量PCR试剂盒，试剂盒包括: a)RNA裂解液，b) PrimeScript? RT Enzyme Mix I, c)逆转录反应液，d)定量引物F及 R, e) SYBR? Premix Ex Taq II, f) ROX Reference Dye, g)标准阳性模板，h)阴性对照品，i)无菌双蒸水 所述逆转录反应液含有 5XPrimeScript? Buffer, Oligo dT Primer, Random 6 mers引物， 标准阳性模板是含有猪嵴病毒特异性目的片段的质粒，阴性对照样品由SPF猪粪便...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰道亮，陈亚冰，李键，吉文汇，孙焕，华修国，
申请(专利权)人：西南民族大学，
类型：发明
国别省市：