当前位置: 首页 > 专利查询>李刚专利>正文

对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集制造技术

技术编号:9736638 阅读:145 留言:0更新日期:2014-03-06 05:22
本发明专利技术公开了对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集,首先对样品进行酶切鉴定,即在适宜的温水中进行消化,至少5小时,然后用百分之二点三的琼脂糖凝胶电泳进行测试,检验其结果;第二步是对其进行序列测定,即对于回收的阳性产物,以此作为模版继续拧PCR扩增,然后连接、转化,得到阳性克隆物,对其进行测序;去除PCR反应中的反应物,加入适量的酶混合物,二者重量比例为5:1;充分混合后烤箱中烘干;温浴;悬浮沉淀物;吸取沉淀物即可;在进行悬浮之前,可以进行低速离心,最多三分钟;所述酶切鉴定和序列鉴定两个步骤之间,时间间隔不能超过12小时。本发明专利技术的有益效果是,实验的特异性和灵敏性比较高,能够配合阐述核酸序列结构,操作相对简单,对条件要求不高。

【技术实现步骤摘要】
对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集
本专利技术涉及一种实验方法,具体来说是指对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集。
技术介绍
禽流感病毒(AIV)属甲型流感病毒。流感病毒属于RNA病毒的正黏病毒科,分甲、乙、丙3个型。其中甲型流感病毒多发于禽类,一些亚型也可感染猪、马、海豹和鲸等各种哺乳动物及人类;乙型和丙型流感病毒则分别见于海豹和猪的感染。一般来说,禽流感病毒与人流感病毒存在受体特异性差异,禽流感病毒是不容易感染给人的。个别造成人感染发病的禽流感病毒可能是发生了变异的病毒。变异的可能性一是两种以上的病毒进入同一细胞进行重组,如猪既可感染人流感病毒,又可能感染禽流感病毒,每种病毒都具有8个基因片段,从理论上讲,可以形成256个新的重组病毒;二是病毒基因位点由于某种因素的影响,1983年4月,美国宾夕法尼亚州曾暴发H5N2型病毒引起的鸡和火鸡低致病性禽流感,由于没有及时得到有效控制,到同年10月份,同样的H5N2型毒株突然由低致病性变成高致病性,造成禽类大量死亡。因此对于禽流感病毒的研究刻不容缓。
技术实现思路
为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案:本文档来自技高网...

【技术保护点】
对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集,其特征在于,首先对样品进行酶切鉴定,即在适宜的温水中进行消化,至少5小时,然后用百分之二点三的琼脂糖凝胶电泳进行测试,检验其结果;第二步是对其进行序列测定,即对于回收的阳性产物,以此作为模版继续拧PCR扩增,然后连接、转化,得到阳性克隆物,对其进行测序;去除PCR反应中的反应物,加入适量的酶混合物,二者重量比例为5:1;充分混合后烤箱中烘干;温浴;悬浮沉淀物;吸取沉淀物即可。

【技术特征摘要】
1.对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集,其特征在于,首先对样品进行酶切鉴定,即在适宜的温水中进行消化,至少5小时,然后用百分之二点三的琼脂糖凝胶电泳进行测试,检验其结果;第二步是对其进行序列测定,即对于回收的阳性产物,以此作为模版继续拧PCR扩增,然后连接、转化,得到阳性克隆物,对其进行测序;去除PCR反应中的反应物,加入适量的酶混合物,...

【专利技术属性】
技术研发人员:李刚
申请(专利权)人:李刚
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1