本发明专利技术公开了一种从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，包含以下步骤：（1）冬凌草原料粉碎，加入60-90%甲醇溶液超声提取2-3次，每次20-50分钟，合并过滤，加入超滤膜超滤，透过液真空减压浓缩，得浓缩液；（2）上述浓缩液加大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集流分，减压浓缩；浓缩液再用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液；（3）上述萃取液浓缩后采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。利用该方法制备冬凌草甲素，方法操作简单，产品收率高、纯度高，试剂可以循环利用，生产成本低。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然药物化学领域，特别涉及一种利用高速逆流色谱从冬凌草中提取纯化冬凌草甲素的方法。
技术介绍
冬凌草甲素又叫冬凌草素、延命草宁，四环二萜类物质，分子式C20H2806，分子量364.43，熔点248°C _250°C，微溶于水，溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮等。冬凌草甲素在癌症治疗中的作用已引起了人们的重视，现已发现其对肺癌、前列腺癌、乳腺癌等多种细胞株均有抑制作用。冬凌草为唇形科香茶属多年生草本或亚灌木。冬凌草具有清热解毒、消炎止痛、健胃活血之效。现有公开提取纯化冬凌草甲素的方法，多是冬凌草甲素的提取分离法目前主要有乙醚提取法、乙醇回流提取法及混合试剂提取法。分离纯化方法多是硅胶柱分离和重结晶。如专利(申请号02139049.5 )“一种冬凌草甲素的制备方法”公开的方法是二氯甲烷、丙醇、乙醇等混合溶剂提取，再用石油醚脱脂、硅胶柱分离、甲醇重结晶等方法。该类方法均采用硅胶柱分离，产品损失严重，操作繁琐，不适合工业化。
技术实现思路
本专利技术要解决上述技术缺陷，提供一种提取纯化冬凌草甲素的新方法。该方法能够减少有毒试剂的用量，提 高产品收率，降低生产成本。为了解决上述技术问题，本专利技术提取技术方案如下:一种从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于包含以下步骤: (1)冬凌草原料粉碎，加入60-90%甲醇溶液超声提取2-3次，每次20-50分钟，合并过滤，加入超滤膜超滤，透过液真空减压浓缩，得浓缩液； (2)上述浓缩液加大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集流分，减压浓缩；浓缩液再用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液； (3)上述萃取液浓缩后采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。所述的超滤膜为截留分子量2000的中空纤维素超滤膜。所述的大孔树脂可选AB-8、HZ816、HPD100和NK-9的一种。所述的二氯甲烷、丙酮混合溶液比例为7:5。所述的高速逆流色谱的溶剂系统可选石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，混合比例1-3:4-5:2-9:5-7，取上相做固定相，下相做流动相。采用本方法提取高纯度冬凌草甲素，工艺操作简单，产品收率高，易于实现工业化。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式: 实施例1: 取冬凌草原料5千克粉碎，加6倍量70%甲醇溶液，超声提取3次，每次30分钟，提取液合并滤过加入截留分子量2000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液减压浓缩，浓缩液加入ILHZ816大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用6倍量混合比例7:5的二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集洗脱减压浓缩至浸膏状。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例1:4:3:5，混合，取上相做固定相，注入高速逆流色谱管，开转主机，设置转速800rpm，同时泵入下相做流动相，设置流速3ml/min，待系统平衡后，用流动相溶解浸膏，注入色谱仪，根据紫外检测器收集流分，连续制备，流分减压干燥，得冬凌草甲素5.Sg，经检测，含量98.6%。实施例2: 取冬凌草原料5千克粉碎，加7倍量80%甲醇溶液，超声提取2次，每次30分钟，提取液合并滤过加入截留分子量2000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液减压浓缩，浓缩液加入ILAB-8大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用5倍量混合比例7:5的二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集洗脱减压浓缩至浸膏状。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例1: 5:7:5，混合，取上相做固定相，注入高速逆流色谱管，开转主机，设置转速800rpm，同时泵入下相做流动相，设置流速2ml/min，待系统平衡后，用流动相溶解浸膏，注入色谱仪，根据紫外检测器收集流分，连续制备，流分减压干燥，得冬凌草甲素7.5g，经检测，含量96.8% 实施例3: 取冬凌草原料5千克粉碎，加5倍量9%甲醇溶液，超声提取3次，每次30分钟，提取液合并滤过加入截留分子量2000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液减压浓缩，浓缩液加入ILHPD100大孔树脂中吸附，·挥干水分，装柱，用7倍量混合比例7:5的二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集洗脱减压浓缩至浸膏状。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例2: 5: 9:7，混合，取上相做固定相，注入高速逆流色谱管，开转主机，设置转速SOOrpm，同时泵入下相做流动相，设置流速lml/min，待系统平衡后，用流动相溶解浸膏，注入色谱仪，根据紫外检测器收集流分，连续制备，流分减压干燥，得冬凌草甲素6.3g，经检测，含量98.1%。实施例4: 取冬凌草原料5千克粉碎，加5倍量75%甲醇溶液，超声提取3次，每次30分钟，提取液合并滤过加入截留分子量2000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液减压浓缩，浓缩液加入ILNK-9大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用6倍量混合比例7:5的二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集洗脱减压浓缩至浸膏状。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例1:4: 9:5，混合，取上相做固定相，注入高速逆流色谱管，开转主机，设置转速800rpm，同时泵入下相做流动相，设置流速2ml/min，待系统平衡后，用流动相溶解浸膏，注入色谱仪，根据紫外检测器收集流分，连续制备，流分减压干燥，得冬凌草甲素6.3g，经检测，含量99.1%。权利要求1.一种从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于包含以下步骤: (1)冬凌草原料粉碎，加入60-90%甲醇溶液超声提取2-3次，每次20-50分钟，合并过滤，加入超滤膜超滤，透过液真空减压浓缩，得浓缩液； (2)上述浓缩液加大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集流分，减压浓缩；浓缩液再用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液； (3)上述萃取液浓缩后采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。2.如权利要求1所述的从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于步骤(I)中所述的超滤膜为截留分子量2000的中空纤维素超滤膜。3.如权利要求1所述的从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于步骤(2)所述的大孔树脂可选AB-8、HZ816、HPD100和NK-9的一种。4.如权利要求1所述的从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于步骤(2)所述的二氯甲烷、丙酮混合溶液比例为7:5。5.如权利要求1所述的从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于步骤(3)所述的高速逆流色谱的溶剂系统可选石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，混合比例1-3:4-5:2-9:5-7，取上相做固定相,下相做·流动相。全文摘要本专利技术公开了一种从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，包含以下步骤(1)冬凌草原料粉碎，加入60-90%甲醇溶液超声提取2-3次，每次20-50分钟，合并过滤，加入超滤膜超滤，透过液真空减压浓缩，得浓缩液；(2)上述浓缩液加大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集流分，减压浓缩；浓缩液再用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液；(3)上述萃取液浓缩后采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。利用该方法制备冬凌草甲素，方法操作简单，产品收率高、纯度高，试剂可以循环利用，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从冬凌草中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于包含以下步骤：（1）冬凌草原料粉碎，加入60?90%甲醇溶液超声提取2?3次，每次20?50分钟，合并过滤，加入超滤膜超滤，透过液真空减压浓缩，得浓缩液；（2）上述浓缩液加大孔树脂中吸附，挥干水分，装柱，用二氯甲烷、丙酮混合溶液洗脱，收集流分，减压浓缩；浓缩液再用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液；（3）上述萃取液浓缩后采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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