一种肠道病毒EV核酸恒温扩增方法技术

本发明专利技术公开了一种肠道病毒EV核酸恒温扩增方法，具体地，本发明专利技术方法包括步骤：在反应体系中进行扩增，所述的反应体系中含有扩增肠道病毒EV的特异性引物对，所述引物可以从极低EV拷贝数的检测样品中扩增出对应于肠道病毒EV特征性序列的扩增产物。本发明专利技术方法能够高特异性、高灵敏度、低污染、快速地对含有EV?RNA的待测样品进行扩增，具有检测效率高，准确度高的特点，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒的生物检测
，具体涉及将特异性靶标捕获技术和实时荧光核酸恒温扩增检测技术结合的肠道病毒(EV)的实时荧光核酸恒温扩增检测中使用的引物、探针及相关试剂盒。
技术介绍
手足口病是一种全球性传染病，多发生于婴幼儿，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，在少数患者中可引发心肌炎、肺水肿、脑膜脑炎等致命性并发症。在我国，1981年在上海首次发现手足口病；此后，全国各地都有发病报道。有些地区的流行率高达1000/10万。目前已确认的引发手足口病的肠道病毒有20多种(型)，柯萨奇病毒A组的16、4、5、9、10型，B组的2、5型，埃可病毒11型以及肠道病毒均为手足口病较常见的病原体，其中以柯萨奇病毒A16型(Cox A16)和肠道病毒(EV71)最为常见。目前EV的主要检测方法有:病毒分离培养法、血清学检查和RT-PCR法。病毒分离培养和血清学方法，繁杂费时，无法满足病毒流行期间同时处理大量样本的需要。RT-PCR法需要经历几十个温度变化的循环过程，扩增反应时间长，且产物为DNA，易污染。因此，开发一种快速、灵敏、特异且不易污染的试剂盒非常必要。实时突光核酸恒温扩增检测技术(S本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肠道病毒EV的扩增方法，其特征在于，所述扩增方法包括步骤：在反应体系中进行扩增，所述的反应体系中含有扩增肠道病毒EV的特异性引物对，所述引物对包括：T7引物：序列如SEQ?ID?NO:3所示；和nT7引物：序列如SEQ?ID?NO:4所示。

【技术特征摘要】
1.一种肠道病毒EV的扩增方法，其特征在于，所述扩增方法包括步骤:在反应体系中进行扩增，所述的反应体系中含有扩增肠道病毒EV的特异性引物对，所述引物对包括: T7引物:序列如SEQ ID NO:3所示;和 nT7引物:序列如SEQ ID NO:4所示。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应体系还包括肠道病毒EV的捕获探针。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应体系还包括肠道病毒EV的检测探针。4.如权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于，所述方法还包括步骤:在扩增反应过程之中或之后，检测肠道病毒EV的特异性探针发出的荧光信号。5.一种肠 道病毒EV的非诊断性检测方法，其特征在于，所述检测方法包括: 用如权利要求1中所述的扩增方法扩增待测样品；和 在扩增反应过程之中或之后，检测肠道病毒EV的特异性探针发出的荧光信号。6.一种肠道病毒EV的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括: (a)第一容器，以及位于所述容器内的扩增肠道病毒的特异性引物对，所述引物对包括: T7引物:序...

【专利技术属性】
技术研发人员：于明朗，马道亮，汤嘉维，居金良，
申请(专利权)人：上海仁度生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：