辣椒轻斑驳病毒反转录-环介导等温扩增检测用引物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于辣椒轻斑驳病毒反转录-环介导等温扩增检测的引物、检测方法及其应用，所述引物为PMMoV-F3、PMMoV-B3、PMMoV-FIP和PMMoV-BIP，其核苷酸序列如序列表SEQ?ID?NO：1～4所示。本发明专利技术还进一步提供了检测辣椒轻斑驳病毒的方法，该方法以样品总RNA为模板，利用本发明专利技术特异性引物进行RT-LAMP扩增，判断样品中是否含有辣椒轻斑驳病毒。本发明专利技术引物特异性好，检测方法快速准确，灵敏度高，适合于进出境植物检疫、种子健康检查及农业生产上辣椒轻斑驳病毒的快速检测诊断，应用前景广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测技术，具体地说涉及辣椒轻斑驳病毒反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP )检测引物、检测方法及其应用。
技术介绍
辣椒轻斑驳病毒virus, PMMoV)是一种正单链RNA的杆状病毒,属于杆状病毒科(Kirgaririt/ae)、烟草花叶病毒属(TbAaffiorirw1S)成员，在世界范围内广泛分布，是辣椒上最重要的可经种子传播的病原之一。PMMoV虽然在辣椒叶片上产生轻微或没有产生症状，但能引起果实退绿斑驳、畸型、变小，偶尔坏死，严重影响辣椒的产量和品质。此外，该病毒还可能是一个能够同时感染人类的植物病毒，已有报道指出该病毒与人的发热、腹部疼痛、瘙痒有关，并引起免疫反应。在我国，1989年报道在辽宁的辣椒上发生，1994年报道在新疆石河子辣椒上危害，而后发生危害的报道很少。但近5年来，先后在陕西、北京、宁夏、山东青岛、河北保定等地的辣椒上发现该病毒，具有危害地区越来越广、危害面积也在逐年增加 的趋势。环介导等温扩增(Loop-mediatedisothermal amplification, LAMP)是一种在等温条件下高特异性、高灵敏性、快速地扩增DNA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种辣椒轻斑驳病毒RT?LAMP检测引物，由PMMoV?F3、PMMoV?B3、PMMoV?FIP和PMMoV?BIP引物组成，其特征在于核苷酸序列为：PMMoV?F3：5’??CAGGTGGACTTCGGTCTT??3’PMMoV?B3：5’??CAAGCTTTGAAAGGTACAGT??3’PMMoV?FIP?：5’??ATTTCCCCCGATATCATATGTCGTGGAACTAGAATACTTGATGATGC??3’PMMoV?BIP?：5’??GTCGTGACTACGTTCATTGCTGTCAATGCTATCCTTTTGAGC?3’。

【技术特征摘要】
1.一种辣椒轻斑驳病毒RT-LAMP检测引物，由PMMoV-F3、PMMoV_B3、PMMoV-FIP和PMMoV-BIP引物组成，其特征在于核苷酸序列为:PMMoV-F3:5’ _ CAGGTGGACTTCGGTCTT _3’PMMoV-B3:5’ _ CAAGCTTTGAAAGGTACAGT _3’PMMoV-FIP:5’ - ATTTCCCCCGATATCATATGTCGTGGAACTAGAATACTTGATGATGC -3’PMMoV-BIP:5’ - GTCGTGACTACGTTCATTGCTGTCAATGCTATCCTTTTGAGC-3’。2.一种利用权利要求1检测引物检测辣椒轻斑驳病毒的RT-LAMP方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄天培，廖富荣，关雄，方志鹏，吴媛，郭木金，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：