用于核酸指数式扩增的切口和延长扩增反应制造技术
【技术实现步骤摘要】
相立申请案交叉参考本专利技术主张优先于2007年7月14日申请并且标题为“用于核酸指数式扩增的切口和延长扩增反应(NickingandExtensionAmplificationReactionfortheExponentialAmplificationofNucleicAcids)”的美国专利申请案第11/778,018号，其是全文以引用方式而提及并纳入本文中。
本专利技术一般来说涉及短DNA或RNA序列在恒温下的快速指数式扩增。
技术介绍
随着人们对可快速检测有害物种的存在或确定目标区域遗传序列的系统的需要指数式增大，体外诊断学领域快速扩展。现有分子诊断学主要检测生物标记物并且包括小分子检测、基于免疫的分析和核酸测试。两个互补或实质上互补的核酸链之间的固有特异性使得可使用单一DNA或RNA序列进行快速特异性识别，其简单性使得核酸测试具有诱人前景。用于疾病管控的对细菌和病毒威胁剂、遗传修饰食品、和单核苷酸多态性的鉴定只是这些分子诊断工具的进展极为有利的少数领域。为满足这些不断增长的需求，人们已针对这些特异性和灵敏性需求研发并调整核酸扩增技术。历史上，最常用的扩增...
【技术保护点】
一种用于扩增核酸靶序列的试剂盒，其包含a)DNA聚合酶；b)用于核酸扩增的第一模板，其包含位于3’末端且与靶序列有义链的3’末端互补的识别区域、所述识别区域上游的切口酶结合位点和切口位点、以及所述切口位点上游的稳定区域，其中所述核酸序列中与所述靶序列有义链的3’末端互补的部分长8至15个核苷酸；c)用于核酸扩增的第二模板，其包含位于3’末端且与所述靶序列有义链的互补链的3’末端互补的识别区域、所述识别区域上游的切口酶结合位点和切口位点、以及所述切口位点上游的稳定区域，其中所述核酸序列中与所述靶序列有义链的互补链的3’末端互补的部分长8至15个核苷酸；和d)一种或两种热稳定切...
【技术特征摘要】
2007.07.14 US 11/778,0181.一种用于扩增核酸靶序列的试剂盒，其包含a)DNA聚合酶；b)用于核酸扩增的第一模板，其包含位于3’末端且与靶序列有义链的3’末端互补的识别区域、所述识别区域上游的切口酶结合位点和切口位点、以及所述切口位点上游的稳定区域，其中所述核酸序列中与所述靶序列有义链的3’末端互补的部分长8至15个核苷酸；c)用于核酸扩增的第二模板，其包含位于3’末端且与所述靶序列有义链的互补链的3’末端互补的识别区域、所述识别区域上游的切口酶结合位点和切口位点、以及所述切口位点上游的稳定区域，其中所述核酸序列中与所述靶序列有义链的互补链的3’末端互补的部分长8至15个核苷酸；和d)一种或两种热稳定切口酶，其中，所述的切口酶能在所述的第一模板或第二模板的切口位点处进行切口。2.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述靶序列所包含的核苷酸比所述第一模板识别区域与所述第二模板识别区域中的核苷酸总数多1至5个。3.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述聚合酶、切口酶、和模板存于一个容器中。4.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述聚合酶、切口酶、和模板存于两个容器中。5.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述聚合酶和切口酶存于第一容器中，并且所述模板存于第二容器中。6.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述聚合酶、切口酶、和模板经冻干。7.如权利要求1所述的试剂盒，其另外包含实施所述扩增方法的说明书。8.如权利要求1所述的试剂盒，其另外包含试管。9.如权利要求1所述的试剂盒，其另外包含侧向流动装置或试条。10.如权利要求9所述的试剂盒，其中所述侧向流动装置或试条另外包含捕获探针。11.如权利要求1所述的试剂盒，其另外包含选自由以下组成的群组的检测部分：荧光染料、胶体金颗粒、胶乳颗粒、分子信标和聚苯乙烯珠粒。12.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述模板中的至少一者包含间隔子、阻断基团、或经修饰核苷酸。13.如权利要求1所述的方法，其中每个所述第一模板和所述第二模板的所述稳定区域具有...
【专利技术属性】
技术研发人员：布莱恩·K·梅普尔斯，里贝卡·C·霍姆伯格，安德鲁·P·米勒，雅罗德·普罗文斯，理查德·罗思，杰弗里·曼代利，
申请(专利权)人：爱奥尼安技术公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。