诱导间充质干细胞成为软骨细胞的方法技术

本发明专利技术提供了一种诱导间充质干细胞（MSCs）成为软骨细胞的方法，包括的步骤有：获取MSCs和软骨细胞；将软骨细胞接种于软骨细胞培养液中进行培养；将MSCs接种于插入式细胞培养皿中，再将所述插入式细胞培养皿置于所述软骨细胞培养液中，并将软骨细胞培养液更换成软骨细胞诱导分化培养基后进行共同培养。该诱导方法能使得MSCs与软骨细胞可以模拟体内环境而发生协同作用，使得诱导MSCs分化成软骨细胞因子与软骨细胞分泌的细胞外基质作诱导因子的协同作用，从而显著缩短诱导MSCs分化成软骨细胞的时间，提高了软骨细胞增殖率，并且同时提高了诱导分化后细胞的II型胶原的表达率与表达量和糖胺聚糖（GAG）的分泌量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于干细胞
，具体涉及一种。
技术介绍
目前修复软骨组织的传统方法是采用自体软骨细胞，此法必须在关节镜下切取非负重区的关节软骨，对其中的软骨细胞进行扩增，这种手术唯一的优点为无抗原性，但造成机体损伤很大。另外软骨组织中绝大部分为基质，软骨细胞数量少且难分离，体外传代次数有限，一般最多培养3 4代，所以难以获得大量细胞。当前，骨髓间充质干细胞诱导成软骨细胞普遍采取高密度聚团诱导。该方法一般将扩增后的细胞离心成细胞团，再用成软骨细胞诱导培养基进行微团诱导。但是成软骨细胞诱导需要大量的骨髓间充质干细胞，为了获得大量的骨髓间充质干细胞，必须在体外进行长时间的传代培养，而随着细胞培养时间的延长，干细胞的多向分化潜能会出现程序性丢失，消化过程中使用的胰酶也会导致细胞活性的降低。间充质干细胞(MSCs)是成体干细胞的一种，它具有多向分化潜能，为类风湿性关节炎，骨关节炎及先天性软骨发育不良等疾病的细胞治疗开辟了一条新的途径。并且最新研究表明，MSCs可以作用于抑制患者自身的炎症反应，以及缓解一些退行性疾病的症状。目前采用MSCs分化成软骨细胞的方法一般是将MSCs培养至传代的MSC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导间充质干细胞成为软骨细胞的方法，包括如下步骤：获取间充质干细胞和软骨细胞；将所述软骨细胞接种于软骨细胞培养液中进行培养；将所述间充质干细胞接种于插入式细胞培养皿中，再将接种有所述间充质干细胞的所述插入式细胞培养皿置于所述软骨细胞培养液中，并将所述软骨细胞培养液更换成软骨细胞诱导分化培养基后进行共同培养；其中，所述软骨细胞诱导分化培养基中含有2×10?7～5×10?7mol/L的甲状旁腺激素相关蛋白1?34。

【技术特征摘要】
1.一种诱导间充质干细胞成为软骨细胞的方法，包括如下步骤: 获取间充质干细胞和软骨细胞； 将所述软骨细胞接种于软骨细胞培养液中进行培养； 将所述间充质干细胞接种于插入式细胞培养皿中，再将接种有所述间充质干细胞的所述插入式细胞培养皿置于所述软骨细胞培养液中，并将所述软骨细胞培养液更换成软骨细胞诱导分化培养基后进行共同培养；其中，所述软骨细胞诱导分化培养基中含有2X10—7 5X10_7mol/L的甲状旁腺激素相关蛋白1-34。2.根据权利要求1所述的诱导间充质干细胞成为软骨细胞的方法，其特征在于:在所述将软骨细胞培养液更换成软骨细胞诱导分化培养基进行共同培养的步骤中，所述软骨细胞诱导分化培养基还包含如下配方组分: 作为基础成分的DMEM高糖培养液3.根据权利要求1所述的诱导间充质干细胞成为软骨细胞的方法，其特征在于:在将所述软骨细胞接种于软骨细胞培养液的步骤中，所述软骨细胞的接种量为0.5X104 I X IO4 个/cm2。4.根据权利要求1所述的诱导间充质干细胞成为软骨细胞的方法，其特征在于:在将所述间充质干细胞接种于插入式细胞培养皿中的步骤中，所述间充质干细胞的接种量为2X104 5X104 个/cm2。5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵文卓，王涵，刘韬，
申请(专利权)人：深圳市博泰生物医学科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：