一种脂肪细胞体外培养方法技术

本发明专利技术公开了一种脂肪细胞体外培养方法。本发明专利技术将脂肪组织先匀浆处理成乳糜状，然后用改进的接种环将乳糜组织在培养瓶底壁均匀涂片，之后翻转培养瓶加入含牛磺酸的培养液，平放入培养箱，30-40分钟后将培养瓶翻转，让培养液进入培养瓶底壁的涂片中继续培养，24-36小时后细胞贴壁生长，4-5天后有约80-90%细胞贴壁。本发明专利技术培养方法与胶原酶消化法相比，操作步骤简单，花费时间短，通常不会造成培养污染，而且由于不受胶原酶消化的影响，细胞活性较高，贴壁后生长状态良好；与组织块培养法相比，细胞培养周期大大缩短，而且细胞生长均匀。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物培养技术，具体是。
技术介绍
脂肪组织是机体内最大的能量储库，脂肪代谢是生命最基本的能量代谢方式。现在普遍认为脂肪代谢异常可引发多种疾病，如肥胖、动脉粥样硬化、II型糖尿病、高血压和血脂代谢障碍等。为了更深入地对脂肪代谢紊乱疾病进行研究，研究者发现建立脂肪细胞体外培养模型是一种有效的途径(Armani A, Mammi C, Marzolla V, et al. . Cellular models for understanding adipogenesis, adipose dysfunction, and obesity. J Cell Biochem. 2010，110(3) : 564-72.)。脂肪细胞体外培养方法目前主要有两种，分别是胶原酶消化法和组织块培养法。 胶原酶消化法首先将脂肪组织剪碎，然后加入一定浓度的胶原酶，37°C消化60-90分钟，期间每隔约10分钟用吸管吹打混匀组织，之后将消化的组织液过200目细胞筛，收集过滤的液体离心洗涤两次，最后加入培养液放培养箱培养，约16-18小时后细胞贴壁生长，3-4天后有约80-90%细胞贴壁。这种方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂肪细胞的体外培养方法，其特征是，将脂肪组织先匀浆处理成乳糜状，然后用接种环将乳糜组织在培养瓶底壁均匀涂片，之后翻转培养瓶加入含牛磺酸的培养液，平放入培养箱，30？40分钟后将培养瓶翻转，让培养液进入培养瓶底壁的涂片中继续培养。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谭秀文，游伟，成海建，刘桂芬，刘晓牧，万发春，宋恩亮，韩红，
申请(专利权)人：山东省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：