一种鲨鱼糖蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开一种鲨鱼糖蛋白及其制备方法和用途，本发明专利技术所述鲨鱼糖蛋白是从鲨鱼鱼肉经组织捣碎、脱脂、酶解、再经DEAE-cellulose-52柱层析、Sephadex?G-100柱层析和反相高效液相色谱纯化，浓缩、再经冷冻干燥步骤得到鲨鱼糖蛋白。本发明专利技术的鲨鱼糖蛋白的分子量约为26.4kDa，糖和蛋白含量分别为33.65％和66.35％，含有O-糖肽键和N-糖肽键，单糖的组成包括L-岩藻糖、L-阿拉伯糖、L-半乳糖、D-葡萄糖和D-甘露糖，相应比例为1.00∶1.53∶7.27∶9.07∶2.09；蛋白质由17中氨基酸组成。本发明专利技术的鲨鱼糖蛋白在临床上可以作为一种新生血管抑制剂使用，可用于肿瘤等疾病的治疗，具有广阔的市场前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制药工程
，尤其涉及是一种鲨鱼糖蛋白及其制备方法以及在抗肿瘤方面的应用。
技术介绍
糖蛋白(glycoprotein)是一类由糖类物质(多为寡糖)与蛋白质或多肽以共价键(O-糖苷键或N-糖苷键)连接而形成的结合蛋白，广泛地存在于动物、植物和微生物体内，是生物体内一类非常重要的功能大分子。自20世纪60年代以来，生物化学、化学和药学等领域的研究人员经过广泛和深入的研究，发现糖蛋白具有显著的药用价值和保健价值，具有抗肿瘤、提高免疫力、降血脂、抗糖尿病、抗氧化和防衰老等多种功能。目前已成功应用于临床并具有显著生物活性的药用蛋白制剂大都是糖蛋白。近年来，天然产物来源的糖蛋白，在生物化学、蛋白质工程学、临床医学、药物化学及功能食品等领域受到高度重视。特别是存在于动、植物中的具有显著生物活性的糖蛋白，在创新药物及功能性食品开发方面具有广阔的应用前景。鲨鱼肉味甘、咸，性平，归脾、肺经。具补虚、健脾、利水、祛瘀消肿之功效。主治久病体虚、脾虚浮肿和创口久不愈合等病症。目前，国内外学者对鲨鱼研究主要集中在软骨抗肿瘤活性成分(多糖、蛋白质、多肽)、鲨鱼皮胶体蛋白、鲨鱼肝脏的鱼肝油本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鲨鱼糖蛋白，其特征在于该鲨鱼糖蛋白的分子量为26.4Da，其中糖和蛋白含量分别为33.65％和66.35％，该鲨鱼糖蛋白中单糖的组成包括L?岩藻糖、L?阿拉伯糖、L?半乳糖、D?葡萄糖和D?甘露糖，相应比例为1.00∶1.53∶7.27∶9.07∶2.09。

【技术特征摘要】
1.一种鲨鱼糖蛋白，其特征在于该鲨鱼糖蛋白的分子量为26.4Da，其中糖和蛋白含量分别为33.65%和66.35%，该鲨鱼糖蛋白中单糖的组成包括L-岩藻糖、L-阿拉伯糖、L-半乳糖、D-葡萄糖和D-甘露糖，相应比例为1.0O: 1.53: 7.27: 9.07: 2.09。2.根据权利要求1所述的鲨鱼糖蛋白，其特征在于所述鲨鱼糖蛋白中有17种氨基酸，其中IOOg总氨基酸中含有丙酸酸10.4g，精氨酸5.9g，天冬氨酸8.3g，半胱氨酸0.lg，谷氨酸8.7g，甘氨酸15.6g，组氨酸0.2g，异亮氨酸1.2g，亮氨酸2.9g，赖氨酸2.2g，蛋氨酸0.9g,苯丙氨酸2.6g,脯氨酸9.5g,丝氨酸16.7g,苏氨酸8.9g,酪氨酸0.3g,缴氨酸5.6g。3.根据权利要求1所述的鲨鱼糖蛋白，其特征在于所述鲨鱼糖蛋白的组分在280nm处有蛋白质特征吸收值，同时用苯酚-硫酸法检测时，在490nm有多糖特征吸光值的组分。4.根据权利要求1所述的鲨鱼糖蛋白，其特征在于所述鲨鱼糖蛋白的糖肽的结合方式为N-糖肽键和O-糖肽键。5.一种根据权利要求1至4任一权利要求所述的鲨鱼糖蛋白的制备方法，其特征在于步骤为: 1)匀浆:g鱼肉于80% 95(V) %乙醇溶液中匀浆2 4min，匀浆液用0.5 1.5mol/L NaOH调pH值至8.5 9.5，用双蒸水调乙醇浓度至50% 70 (V) %，于20 30°C水浴中保温20 40min后，于3000 5000r/min离心10 20min,收集上清液；加NaCl将上清液的NaCl浓度调至5% IO(Wt) %，于20 30°C水浴中10 15小时，于3000 5000r/min离心10 20min,收集沉淀； 2)脱脂:将I)所得沉淀物加入乙醚处理2 3小时，过滤得沉淀物，冻干得脱脂蛋白粉末； 3)酶解:将2)所得脱脂蛋白粉末按照料液比1: ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，李忠瑞，罗红宇，邓尚贵，马佳卉，栗丽，
申请(专利权)人：浙江海洋学院，
类型：发明
国别省市：